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1、IFNγ促进人单核细胞向不典型成熟DC分化作者:王惠明,王沂芹,阮志华,傅晓岚,徐文岳,赵婷婷,吴玉章【摘要】 目的:研究IFNγ对人单核细胞表型及分化的影响。方法:采用免疫磁珠法从健康志愿者外周血单个核细胞(PBMCs)中特异性分选单核细胞,以细胞因子IFNγ、TNFα、IFNα刺激单核细胞后,观察单核细胞生长特性,并以流式细胞术检测单核细胞表面CD1a、CD14、CD80、CD83、CD86、HLADR等分子表达。结果:细胞因子IFNγ、TNFα、IFNα对单核细胞形态、生长及表型转化有不同影响。
2、IFNγ促进单核细胞黏附聚集形成“细胞小岛结构”,刺激单核细胞形态向梭形及多角形转化;IFNγ上调单核细胞表达CD80、CD83、CD86及HLADR分子,同时下调CD14分子表达。结论:IFNγ促进单核细胞向不典型的成熟DC方向分化。【关键词】单核细胞IFNγ表型 [Abstract]AIM:ToexplorethemorphologicandphenotypicchangesofmonocytessinresponsetothestimulationofIFNγ,TNFαandIFNα.METHODS
3、:NewlyisolatedmonocytesfromhumanPBMCsweretreatedwithIFNγ,TNFα12orIFNα.Thephenotypicgrowthofmonocyteswithorwithoutstimulationwasobservedbymicroscope.ThesurfaceexpressionofCD1a,CD14,CD80,CD83,CD86,andHLADRonthemonocyteswasassayedbyflowcytometry.RESULTS:AfterIFN
4、γstimulation,monocytesdisplayedtheshapeoffusiformorpolygonandweremorelikelytoadhereandclustertoformthedistinctstructureas“cellislet”.IFNγalsoinducedorupregulatedthesurfaceexpressionofCD80,CD83,CD86,andHLADRonthemonocytesanddownregulatedtheCD14expression.IFN
5、γeveninducedtheCD1aexpressionandchangedthemonocytesphenotypefromCD14+CD1a-CD83-toCD14+CD1a+CD83+afterstimulatedfor5days.CytokinesTNFαandIFNαhavethedifferentimpactsonmonocytesfromIFNγ.CONCLUSION:IFNγhavetheimmunoregulatoryfunctionofmakingmonocytesdifferentiate
6、tountypicalmaturedendriticcells(DC). [Keywords]monocytes;IFNγ;phenotype 干扰素γ(Interferonγ,IFNγ)是一种重要的免疫调节因子,它由活化的淋巴细胞分泌,广泛地作用于体内包括淋巴细胞在内的多种细胞。目前发现,在多种疾病或免疫炎症状态下,机体存在高水平的IFNγ,表明IFNγ12调控着多种疾病或免疫炎症的发生发展过程。单核细胞是单核巨噬系统的主要成分。单核细胞起源于骨髓,主要分布于外周血,进入组织后最终转变为巨噬细胞。单核
7、细胞一般处于免疫静息状态,但在各种外部条件作用下,它可以通过转化为DC[1]或者分泌大量细胞因子[2,3]来参与或调节免疫应答。研究发现,单核细胞与淋巴细胞之间存在着交互作用和对话机制,并且IFNγ在介导单核细胞与淋巴细胞之间对话中发挥着关键作用[4]。 IFNγ能刺激单核细胞产生系列细胞因子如IL15、IL12、TNFα、IL6、MCSF等[4,5],IFNγ还可以协同细胞因子IL4、GMCSF或IL12诱导单核细胞向DC[6]或巨噬细胞[7]分化。但IFNγ本身对单核细胞表型分化的调节作用,
8、目前仍不明确,我们对此进行了初步研究。 1材料和方法 1.1材料以下单克隆抗体(mAb)及其同型对照抗体购自eBioscience公司:小鼠抗人CD14(61D3)、抗人CD1a(HI149)、抗人CD80(1610A1)、抗人CD83(HB15e)、抗人CD86(IT2.2)、抗人HLADR(LN3)。F