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时间:2018-08-01
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1、COX-2及VEGF在乳腺癌中的表达及临床意义作者:曹飞麟,朱敏,谢伯剑,甘梅富,潘印,徐东,周申康,毕铁男【摘要】[目的]探讨环氧化酶2(COX-2)及血管内皮生长因子(VEGF)在乳腺癌中的表达及其临床意义。[方法]应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),检测了96例乳腺癌患者癌组织及癌旁组织中COX-2和VEGF的表达。[结果]COX-2mRNA和VEGFmRNA分别在87.50%和83.33%乳腺癌组织中表达,而仅在16.67%和31.25%癌旁组织中表达,癌组织与癌旁组织COX-2mRNA和VEGFmRNA的表达差异有显著意义。[结论]COX-2mRN
2、A、VEGFmRNA在乳腺癌组织中明显增高。COX-2的表达同VEGF的表达密切相关。【关键词】乳腺肿瘤TheExpressionofCyclooxygenase-2andVEGFinBreastCancerandItsSignificanceAbstract:[Purpose]Toinvestigatetheexpressionofcyclooxygenase-2(COX-2),vascularendothelialgrowthfactor9(VEGF)inbreastcanceranditsclinicalsignificance.[Methods]Thee
3、xpressionofCOX-2andVEGFin96casesofbreastcancertissuesandcanceradjacenttissuesweredetectedbyreversetranscription-PCR.[Results]ExpressionofCOX-2mRNAandVEGFmRNAwas87.50%and83.33%inbreastcancertissues;16.67%and31.25%incanceradjacenttissuesrespectively.TheexpressionofCOX-2mRNAandVEGFmRNAw
4、assignificantlydifferentbetweencancertissueandcancersadjacenttissue.[Conclusion]ExpressionofCOX-2andVEGFmRNAinbreastcancerissignificantlyincreased.ExpressionofCOX-2iscloselycorrelatedwithexpressionofVEGF.Keywords:breastneoplasms;cyclooxygenase-2;VEGF;reversetranscriptionpolymerasecha
5、inreaction9环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)是一种多功能的蛋白质,在多种恶性肿瘤组织中,COX-2的表达增高,它与恶性肿瘤发生发展密切相关。我们采用RT-PCR和免疫组化法检测了96例乳腺癌组织中COX-2和VEGF的表达,探讨COX-2、VEGF在乳腺癌中的表达情况及其相关性,以及COX-2选择性抑制剂用于乳腺癌高危人群化学预防和治疗的可能性。1材料与方法1.1研究对象收集台州医院肿瘤外科2002年12月至2003年5月因患乳腺癌行根治性手术并经病理证实的肿瘤标本及配对的癌旁组织96例。同时留取石蜡标本,行HE及免疫组织化
6、学染色。年龄23~58岁,平均42.5岁。组织类型:浸润性导管癌80例,髓样癌8例,黏液腺癌4例,导管内癌4例。肿瘤分期:Ⅰ~Ⅱ期76例,Ⅲ~Ⅳ期20例。1.2主要试剂TRIzol(Invitrogen公司),M-MuLV逆转录酶,RNA酶抑制剂(MBI,Ferments),Taq酶(Generay公司)COX-2、VEGF、β-actin引物(上海生物工程公司合成);鼠抗人COX-2蛋白及VEGF抗体的单克隆抗体购自福建生物技术有限公司;COX-2扩增产物为488bp,上游引物:5′-TCAAGTCCCTGAGCATCTAC-3′;下游引物:5′-CATTCC
7、TACCACCAGCAACC-3′;VEGF引物序列:上游引物:5′-GCTCTACCTCCACCATGCCA-3′;下游引物:5′-AGCTCATCTCTCCTATGTGC-3′,β9-肌动蛋白扩增产物为619bp,上游引物:5′-CGCTGCGCTGGTCGTCGACA-3′;下游引物:5′-GTCACGCACGATTTCCCGCT-3′。1.3实验方法RT-PCR检测COX-2mRNA及VEGFmRNA表达:(1)提取RNA:取新鲜乳腺癌组织50mg~100mg在液氮中速冻,玻璃匀浆器中彻底匀浆,按Trizol试剂盒说明书裂解抽提总RNA,异丙醇沉淀,溶于
8、DEPC水。紫外分光光度
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