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《hac协同降解制备水溶性壳聚糖及其抑菌性研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、HAc协同降解制备水溶性壳聚糖及其抑菌性研究第24卷第3期2010.09沈阳化工大学JOURNALOFSHENYANGUNI,RSrrYOFCHEMICALTECHNOLoGYVo1.24No.3Sep.2010文章编号:1004—4639(2010)03—0209—06H202/HAc协同降解制备水溶性壳聚糖及其抑茵性研究孟玲,王雷(沈阳化工大学环境与生物工程学院,辽宁沈阳110142)摘要:采用H0/HAc协同降解法对壳聚糖进行降解.通过正交实验获得16种水溶性壳聚糖片段,并对降解条件进行研究.以水稻纹枯茵Rhizzctaniasolaui
2、,小麦赤霉病Fusariumgraminearum以及小麦根瘤病Helminthnsporiumsativum3种植物常见病原菌作为实验菌种,利用含毒介质法分别测定16种水溶性壳聚糖对上述3种病原茵的抑茵效果.实验结果表明,降解后的片段较未降解前具有较好的抑茵作用;同一片段在高浓度时的抑茵效果高于低浓度;同一降解条件下获得的水溶性壳聚糖片段对不同植物病菌的抑制作用效果不同.关键词:HO/HAc;水溶性壳聚糖;降解;抑菌作用中图分类号:$482.2文献标识码:A甲壳素(chitin)是除植物纤维素外的第二大生物资源,壳聚糖(Chitosan)是甲
3、壳素的脱乙酰基产物.壳聚糖具有良好的生物相容性,在农业,食品,日用化学品等方面具有广泛的应用….研究表明,壳聚糖可作为植物生长调节剂,促进农作物产量提高,还可作为土壤改良剂及用于收获后农产品的保鲜等,尤其在抑制植物病害方面已逐渐成为人们研究的热点.如壳聚糖可以诱导植物产生广谱抗性,增强植物的自身防卫能力,抑制多种植物病原微生物的生长,而且对环境不会造成污染.由于壳聚糖(Chitosan)相对分子质量大,一般在数十万甚至上百万,因而水溶性差,使其在应用方面受到了很大的限制.壳聚糖经降解生成的低聚合度的壳聚糖片段具有较高的溶解度,易被吸收利用,更显
4、示其独特的生理活性和功能性质J.关于相对分子质量对壳聚糖抑菌性能的影响已有不少研究,但是研究结果并不统一J.本文通过不同条件下HO/HAc协同降解壳聚糖的研究,获得一系列的水溶性壳聚糖片段,并将各种片段对水稻纹枯菌,小麦赤霉病和小麦根瘤病3种植物病菌的抑制作用分别进行了初步的研究.1材料与方法1.1实验材料与仪器壳聚糖,金湖甲壳食品有限公司,脱乙酰度>90%,相对分子质量30万,食品级;双氧水,乙酸,乙醇,磷酸氢二钠,硝酸钙,蔗糖,蛋白胨和琼脂均为分析纯;供试病原菌:水稻纹枯菌(Rhi.zzctaniasolaui),小麦赤霉病(Fusa
5、riumgra—minearum)和小麦根瘤病(Helminthnsporiumsa.tivum),由沈阳化工研究院农药生测中心提供.LDZX-40BI立式自动电热压力蒸汽灭菌器,LD4-2低速离心机,JJ一1电动搅拌器,DHG.9070A电热恒温鼓风干燥箱,LRH-280生化培养箱,HNP一水平流形超净工作台,FA1104电子天平.'1.2实验方法1.2.1水溶性壳聚糖的制备根据正交实验表(见表1,表2),将壳聚糖(CTS)溶解于稀乙酸(HAc)水溶液中,快速升温到所需温度,在搅拌条件下滴加质量分数为收稿日期:2009—09—16作者简介:孟
6、玲(1969一),女,吉林吉林人,副教授,博士,主要从事生物农药方面的研究210沈阳化工大学2010年30%的HO,反应若干时间后,调节pH值为7.0～7.5,抽滤,滤液在室温条件下醇沉,3000r/rain离心15min,将固体于6O℃烘箱中干燥30min后,得水溶性低聚壳聚糖.表1H:O/HAc降解壳聚糖因素水平表Table1ThefactorlevelsofdegradationsolublechitosanthroughHAc/H202注:W(CTS)/%:壳聚糖的质量分数;V(HAc)/%:乙酸的体积分数.表25因素4水平表Table
7、2Designednormaltest(5factorsand4leves)1.2.2水溶性壳聚糖产率的测定根据产物(水溶性壳聚糖)质量与原料(壳聚糖)质量的比值计算水溶性壳聚糖的产率.水溶性壳聚糖产率/%=xl00.原料(壳聚糖)质量'1.2.3壳聚糖降解片段抑菌效果测定采用含毒介质法¨引,供试药剂为不同相对分子质量的壳聚糖乙酸溶液,壳聚糖质量浓度分别为10mg/L和100mg/L,各供试菌种均另设不加壳聚糖的乙酸溶液作为空白对照.每实验号设3个平行实验.将PDA培养基加入壳聚糖乙酸溶液充分混合,高压蒸汽灭菌后,待其冷却后接种直径0.5cm的
8、病原菌菌片,放置培养箱中25℃培养1—2d后进行调查,调查时分别测量每个处理的供试病原菌菌落生长直径,并计算抑菌率.抑菌率/%=[(空白对照的菌落直径
