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时间:2017-11-12
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1、SDS–聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS–PAGE)操作过程(一)安装夹心式垂直板电泳槽(二)配胶及凝胶板的制备(三)样品的处理与加样(四)电泳(五)凝胶板剥离与固定(六)染色与脱色,观察结果具体过程见视频。试剂1.标准蛋白质(Mark)与待检测蛋白样品2.样品溶解液3.30%丙烯酰胺(丙烯酰胺Acr、甲叉双丙烯酰胺Bis)4.凝胶缓冲液:SDS0.2g,加0.2mol/LPH7.2磷酸盐缓冲液至100ml。5.1%TEMED(N,N,N–四甲基乙二胺)6.10%过硫酸铵(AP)7.电极缓冲液:0.1%SDS、0.1
2、mol/LPH7.2磷酸盐缓冲液。8.1%琼脂:琼脂1g,用上述缓冲液溶解至100ml4℃保存。9.固定液:甲醇:冰乙酸:水为1:2:710.染色液:考马斯亮蓝R–2500.25g加上述固定液500ml,过滤后应用。脱色液:冰乙酸:甲醇:水为2:9:9二器材1.夹心式垂直板电泳槽。2.电泳仪。3.微量加样枪。
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