第十九节 消化道寄生虫的病原检查

第十九节 消化道寄生虫的病原检查

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时间:2017-11-12

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1、第十九节消化道寄生虫的病原检查主要是根据蠕虫的虫卵、幼虫、成虫或节片,原虫的滋养体、包囊、卵囊或孢子囊,某些节肢动物;可随粪便排出体外有些虫体可在肛周产卵,绦虫孕节主动从肛门逸出过程中被挤破、虫卵可散落在肛周,所以,采用粪便检查或肛门周围检查寄生虫注意:①保证粪便新鲜,一般不超过24小时②盛粪便的容器须干燥、洁净,无污染;③容器外贴有标签,④受检粪量一般为5~10g,或不少于30g,⑤要严格按照粪检程序进行操作,以免漏检。1.直接涂片法用以检查蠕虫卵、原虫的包囊和滋养体。方法简便,连续作3次涂片,可提高检出率。(1)蠕虫卵检查:滴一滴生理盐水于洁净的载玻片,用棉签棍或牙签挑取绿豆大小的粪便

2、块,在生理盐水中涂抹均匀;涂片的厚度以透过涂片约可辨认书上的字迹为宜。一般在低倍镜下检查,如用高倍镜观察,需加盖片。应注意虫卵与粪便中异物的鉴别。虫卵都具有一定形状和大小;卵壳表面光滑整齐,具固有色泽;卵内含卵细胞或幼虫。(2)原虫检查①活滋养体检查:涂片应较薄,方法同查蠕虫卵。气温愈接近体温,滋养体的活动愈明显。必要时可用保温台保持温度。②包囊的碘液染色检查:直接涂片方法同上,以一滴碘液代替生理盐水。如碘液过多,可用吸水纸从盖片边缘吸去过多的液体。若同时需检查活滋养体,可在用生理盐水涂匀的粪滴附近滴一滴碘液,取少许粪便在碘液中涂匀,再盖上盖片。涂片染色的一半查包囊;末染色的一半查活滋养体

3、。二、厚涂片透明法(改良加藤法)取约5mg(已用100目不锈钢筛除去粪渣)粪便,置于载玻片上,覆以浸透甘油-孔雀绿溶液的玻璃纸片,轻压,使粪便铺开(20×25mm)。置于30~36℃温箱中约半小时或25℃约1小时。待粪膜稍干,即可镜检。玻璃纸准备:将玻璃纸剪成22×30mm大小的小片,浸于甘油-孔雀绿溶液(含纯甘油100ml、水100ml和3%孔雀绿1ml的水溶液)中,至少浸泡24小时,至玻璃纸呈现绿色。使用此法需掌握粪膜的合适厚度和透明的时间。如粪膜厚,透明时间短,虫卵难以发现;如透明时间过长,则虫卵变形,也不易辨认。定量透明法适用于各种粪便内蠕虫卵的检查及计数。此法系应用改良聚苯乙烯作

4、定量板,大小为40×30×1.37mm,模孔为一长圆孔,大小为8×4mm,两端呈半圆形,所取的粪样平均为41.7mg。操作时将大小约4×4cm的100目尼龙网或金属筛网覆盖在粪便标本上,自筛网上用刮片刮取粪便,置定量板于载玻片上,用一手的两指压住定量板的两端,将刮片上的粪便填满模孔,刮去多余粪便。掀起定量板,载玻片上留下一个长形粪样,然后在粪条上覆盖含甘油-孔雀绿溶液的大小约为5.0~2.6cm的玻璃纸条,展平后加压,使玻璃纸下的粪便铺成长椭圆形。经1~2小时粪便透明后置镜下计数。将所得虫卵数×24,再乘上述粪便性状系数,即为每克粪便虫卵数。三、浮聚法:利用比重较大的液体,使原虫包囊或蠕虫

5、卵上浮,集中于液体表面。常用的方法有两种:(1)饱和盐水浮聚法:此法用以检查钩虫卵效果最好。用竹签取黄豆粒大小的粪便置于漂浮杯(高3.5cm,直径约2cm的圆形直筒瓶)中,加入少量饱和盐水调匀,再慢慢加入饱和盐水到液面略高于瓶口,但不溢出为止。此时在杯口覆盖一载玻片,静置15分钟后,将载玻片提起并迅速翻转,镜检。(2)硫酸锌离心浮聚法:此法可用于检查原虫包囊,球虫卵囊和蠕虫卵。取粪便约1g,加10~15倍的水,充分搅碎,按离心沉淀法过滤,反复离心3~4次,至水清为止,最后倒去上液,在沉渣中加入比重1.18的硫酸锌液(33%的溶液),调匀后再加硫酸锌溶液至距管口约1cm处,离心1分钟。用金属

6、环取表面的粪液置于载玻片上,加碘液一滴,镜检。(3)蔗糖离心浮聚法:此法适用于检查粪便中隐孢子虫的卵囊。取粪便约5g,加水15~20ml,以260目尼龙袋或4层纱布过滤。取滤液离心5~10分钟,吸弃上清液,加蔗糖溶液(蔗糖500g,蒸馏水320ml,石炭酸6.5ml)再离心,然后如同饱和盐水浮聚法,取其表液膜镜检(高倍或油镜)。卵囊透明无色,囊壁光滑,内有一小暗点和发出淡黄色的子孢子。隐孢子虫的卵囊在漂浮液中浮力较大,常紧贴于盖片之下,但1小时后卵囊脱水变形不易辨认,故应立即镜检。也可用饱和硫酸锌溶液或饱和盐水替代蔗糖溶液。浓聚法1.沉淀法:原虫包囊和蠕虫卵的比重大可沉集于水底,有助于提高

7、检出率。但比重较小的钩虫卵和某些原虫包囊则效果较差。(1)重力沉淀法:取粪便20~30g、加水成混悬液,经金属筛(40~60孔)或2、3层湿纱布过滤,再加清水冲洗残渣;过滤粪液在容器中静置25分钟,倒去上液,重新加满清水,以后每隔15~20分钟换水一次(3~4次),直至上液清晰为止。最后倒去上液,取沉渣作涂片镜检。如检查包囊,换水间隔时间宜延长至约6小时换一次(2)离心沉淀法:将上述滤去粗渣的粪液离心(1500~2000

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