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1、螺旋藻小分子多肽制备工艺的研究浙江农业ActaAgricuhuraeZhejiangensis22(6):802～807,2010螺旋藻小分子多肽制备工艺的研究武萌萌,刘士伟,李博生(北京林业大学生物科学与技术学院,北京100083;2北京林业大学螺旋藻研究所,北京100083)摘要:碱性蛋白酶水解螺旋藻蛋白制备多肽粗品.根据中心组合试验设计原理,在单因素试验的基础上,以水解度为响应值,利用响应面法对影响螺旋藻蛋白水解的各种影响因素如温度,pH,酶解时间和加酶量进行了系统研究,得到最佳工艺条件为:p
2、H值7.0,反应温度55℃,酶解时间160rain,酶底比4300U/g,水解度可达到26.8%.超滤截取相对分子量小于5kD以下的组分,冷冻干燥后过SephadexC一25凝胶柱层析收集螺旋藻小分子肽段.根据标准蛋白色谱层析检测所得制品为相对分子量在307～1450D范围的螺旋藻小分子肽段.关键词:螺旋藻;多肽;响应面;酶解中图分类号:Q949.22文献标识码:A文章编号:1004—1524(2010)06—0802—06Preparationandpurificationoflow—molecu
3、lar??weightpeptidesfromspirulinaproteinWUMeng—meng,LIUShi—wei,LIBo—sheng''(DepartmentofBiologyScienceandTechnology,BeringForestryUniversity,Bering100083,China;Instituteofirulina,BengForestryUniversity,Beng100083,China)Abstract:Alcalaseproteasewasusedto
4、hydrolyzetheproteinextractsofSpirulinatoproducepolypeptides.TheeffectsofpH,enzymedosage,hydrolysistimeandtemperatureondegreeofhydrolysiswereinvestigatedbysinglefactortestrespectively.andthesefactorswereoptimizedbyresponsesurfacemethodology(RSM)whichwas
5、de—signedbasedonBox—Behnkencentralcombination.Theoptimumhydrolysisconditionswereasfollows:pH:7.en—zymedosage(ratioofenzymetosubstrate)4300U?g～,hydrolysistemperature55~Candtime160min.Thehy—drolysatesofSpirulinaproteinwereuhrafihratedby5kDhollowfiberuhra
6、fihrationmembraneandpurifiedbySepha—dexG-25columnchromatographywithPBS(pH=7)aseluent.Low—molecular—weightpeptideswerecollected,andthemolecularweightwasfrom307Dto1450D.Keywords:Spirulina;peptides;responsesurfacemethodology;enzymaticbydrolysate螺旋藻(Spirul
7、ina)属于蓝藻门,颤藻科中的一个属,含有多种营养成分,其中蛋白质含量高达60%～70%,并含有多种维生素,微量元素和必需氨基酸,具有营养及医疗保健功能,成为近收稿日期:2010—03—17基金项目:国家林业公益性行业科研专项资助(200704025);教育部重点研究项目(102023)作者简介:武萌萌(1986一),男,硕士研究生,研究方向为螺旋藻开发利用.E—mail:mengmengwoo@163.eom通讯作者,李博生,E—mail:1bs7778@yeahnet年来开发利用的营养价值最高的
8、天然食品….目前,螺旋藻多以干粉形式直接应用于食品行业,由于其溶解性差和腥昧浓重的局限性,使其应用受到一定的限制,如何充分开发利用螺旋藻中的功效成分,是拓宽螺旋藻应用领域的关键问题.近年来的研究发现,人类摄取蛋白质经消化酶作用后,并非主要以氨基酸的形式吸收,而是以肽的形式吸收.一些小分子肽同时具有免疫调节,抗氧化,降血压,抗菌等多种生理功能.武萌萌等:螺旋藻小分子多肽制备工艺的研究已有报道从大豆,玉米,蛋黄,猪血,菜籽种子和其他微藻蛋白的水解物中成功提取具有生理功能的
