d-dimer测定试剂盒标准操作规程

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1、标题：NycoCardD-dimer测定试剂盒标准操作规程版本号：1修订号：0文件编号：1402-yan-06-LJ-发布日期：2006年03月10日生效日期：2006年03月10日发布部门：检验科质量管理小组编制人：审核人：批准人（签章）：D-二聚体标准操作规程（NycoCardD-dimer测定试剂盒）1.检测目的：本试剂盒用于检测血浆中纤维蛋白的降解产物D-二聚体（D-dimer）的浓度。可作为血栓性疾病诊治过程的重要辅助工具。2.原理：基于免疫过滤试验原理，将血浆加入检测卡孔内，样品被吸入，D-dimer分子被吸附到包被D-dimer

2、单克隆抗体的膜中，然后加入D-dimer单克隆抗体与胶体金偶联物溶液，膜中D-dimer将与抗体金偶联物发生结合反应，形成三明治嵌合体，过剩偶联物用洗涤液洗去。样本中存在病理水平的D-dimer，检测膜显现微红色，颜色的深浅与样本中D-dimer的浓度成正比。色泽强度可用比色卡进行对比评价，也可用读数仪（NycoCard®READER）进行读数。3.试剂盒：NycoCardD-dimer测定试剂盒3.1试剂盒的组成：试剂盒的规格为48人份/盒3.11检测卡包装在铝箔袋内，每卡有6个检测孔，孔内的渗水膜包被D-dimer单克隆抗体。卡已经过处理

3、，允许使用记号笔在孔下的空白处对病人/标本的属性进行标记。3.12偶联抗体反应液R11×3ml，黑盖棕色瓶，为D-dimer单克隆抗体与胶体金偶联物溶液。3.13洗涤液R21×12ml，白色瓶盖，内容PH8.0的缓冲液，主要成分为小牛血清白蛋白及清洗剂。3.14阳性质控品1×1ml，白色瓶盖，主要为纤维蛋白的降解产物与小牛血清白蛋白的缓冲液及稳定剂，参考值参见瓶签所示范围。3.15判读比色卡1个，塑料比色卡，五个颜色逐深的孔分别代表0.3-8mg/L的5个水平D-dimer的浓度，用于判读检测结果。3.16塑料袋2只，一只存放开启的未使用的检

4、测卡，一只用于存放使用后的检测卡。3.2试剂盒的储存条件：在2-8℃贮存，失效期见试剂盒上的标签。避免储存温度超过25℃、光线直射和潮湿。试剂盒室温下储存可达一周。3.21检测卡检测卡在2-8℃保存在未开启的铝箔袋内或开启后放置在盒中的塑料袋内，可稳定至标签所示的效期。使用过的检测卡放置在盒中的塑料袋，在2-8℃保存，检测结果可稳定四周。3.22试剂及阳性质控品未开启的试剂（2-8℃）可稳定至失效期。开启后的试剂（2-8℃）可稳定3个月。使用后，应拧紧瓶盖。2.标本采集4.1标本名称及类型4.11标本名称：血液4.12标本类型：柠檬酸抗凝的无

5、血小板血浆4.13标本量：静脉取血2~3ml4.2标本采集方法：住院病人卧位真空采血管采血，门诊与急诊病人坐位采血，静脉取血2~3ml，加入抗凝剂（0.11或0.11M柠檬酸钠），比例为9：1（血：抗凝剂）。然后最好立即以2000g离心力离心15分钟分离血浆，最迟须在6小时内分离血浆。4.3标本送检间隔最长时间及标本采集后保存条件：标本采集后最好立即送检，送检间隔最长时间2h。血浆标本须在24小时内进行测定。样本可于-20℃保存4周内再测定，冰冻量在1.0ml内，复溶条件为37℃水浴15分钟。3.实验条件：温度18℃-30℃，最佳23℃，空调

6、冷却能力必须约为172kcal/小时（最大）。相对湿度50％-85％。电压220V±10％清洁度执行临床实验室安全准则NCCLS同类标准GP17—A避免强光照射及辐射源辐射。2.操作步骤：在检测卡的反应孔下标记患者或质控品的标记，操作步骤如下：6.1预清洗：吸取50ul洗涤液R2加入反应孔内，使洗涤液浸润反应卡，注意勿使加样器触及反应孔膜。6.2加样：向反应孔加入50ul未稀释的柠檬酸盐抗凝的无血小板血浆标本或质控品，样品应在45秒内渗入卡内。6.3加偶联液：向反应孔加入50ul偶联液R1，加入前须将偶联物瓶颠倒两次使其混匀。偶联液应在45秒

7、内渗入卡内。6.4用加样器吸取50ul洗涤液R2加入反应孔中。并保持反应孔周围清洁，可用吸水纸吸拭。3.结果判读：检测结果须在洗涤液完全吸入检测卡之后2分钟内立即判读。7.1使用NycoCard®-Reader小型读数仪：请参阅读数仪操作说明，测量范围：0.1-20.0mg/L。7.2使用比色卡：将比色窗置于反应孔上对比相近颜色而获得结果，五个浓度颜色相当于如下血浆D-dimer浓度：①3mg/L②1mg/L③2mg/L④4mg/L⑤8mg/L报告结果可按最接近样品颜色的比色窗值报告。若样品颜色正介于二色窗之间，也可按二浓度的平均值报告。检测

8、结果以D-dimer的浓度mg/L表示。2.正常参考范围：正常人血浆D-dimer浓度低于0.3mg/L；Cut-off值为0.3mg/L。9.质量控制：试剂盒内含