胎兔和成兔皮肤伤口愈合的病理学比较

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1、胎兔和成兔皮肤伤口愈合的病理学比较【关键词】伤口愈合关键词:伤口愈合;成纤维细胞;宫内手术;瘢痕0引言胎儿皮肤创伤后无瘢痕愈合，为人们提供了一个理想的组织修复模型.弄清无瘢痕愈合机制，可使人们控制成年人伤口向着无瘢痕方向发展.现认为胎儿无瘢痕愈合主要与胎儿皮肤内在特性有关.我们旨在对比观察胎兔和成兔皮肤伤口愈合过程.1材料和方法1.1材料孕22～24d母兔18只和成兔18只（沈阳军区总医院医学动物实验科提供），体质量3～5kg，术前常规饲养2～3d，自由饮水进食.1.2方法胎兔经846合剂im麻醉后，母兔取仰卧位，腹部脱毛消毒后，于下腹正

2、中逐层打开腹壁，暴露子宫，子宫呈双角多胎（6～8胎），通常选择第2胎位，作一与子宫长轴一致的椭圆型全层荷包（包括羊膜），10号刀片沿荷包长轴切开子宫，固定胎兔尾部，沿脊柱正中从尾向头全层切开皮肤，长约1.5cm，6～0号丝线间断缝合，将胎兔小心送回子宫，注入保温羊水及青霉素生理水，系紧荷包，外加一连续缝合，仔细检查宫内羊水有无外漏，同法完成对侧胎兔操作.成兔经846合剂im麻醉后，于后背部脊柱旁选择5cm×3cm区域脱毛清毒，行长2cm全层切口，1～0丝线间断缝合.胎兔分别在术后1，2，3，4和5d，成兔分别在术后1，2，3，4，5，6，

3、7，10和14d，每日2～3只，按上述麻醉方法，以伤口为长轴，将上述胎兔伤口及成兔伤口全层切取，分别行光镜及电镜检查.光镜检查按石蜡包埋法常规固定，脱水处理，切片后行HE染色，饱和苦味酸-天狼猩红及Gordon-Sweet嗜银染色，光镜及偏光镜观察炎症反应、伤口愈合时间、胶原性质;电镜检查以25mLL-1戊二醛和10mLL-1饿酸双重固定后，梯度乙醇脱水，包埋，超薄切片（5～7pm），phillip-CM电镜观察成纤维细胞形态.2结果术后母兔、成兔全部成活，胎兔成活率为67%.胎兔伤后2d，上皮增生覆盖伤口，真皮层相互连接，出现轻微的白细

4、胞浸润.伤后3d，伤口完全愈合，真皮层呈纤细网状，嗜银染色阳性，与周围正常组织不能区分，炎性细胞继续增多.电镜下见纤维母细胞胞质中有丰富粗面内质网，有的扩张，有的扩张成池，少数线粒体，核卵圆形，核仁清楚，常染色质多，胶原纤维少（图1）.成兔伤后2d出现少许白细胞浸润，以后炎性细胞浸润增多，伤后6d伤口开始愈合，伤口主要由成纤维细胞和纤细的胶原及基质填充，偏光镜下呈弱双折光性绿色纤细的Ⅲ型胶原，伤口愈合晚期，胶原粗大成束，排列紧密，偏光镜下呈弱双折光性黄红色I型胶原，电镜下观察见纤维母细胞成片生长，相互之间有联接，胞质丰富，有粗面内质网和线

5、粒体，并可见到微丝，核梭形，有凹陷切迹，纤维丝密集（图2）.图1－图2略3讨论胎儿皮肤无瘢痕愈合现象是Rowllatt［1］于1971年在临床上偶然发现的.自1981年以后，Harrison等［2］对28例行宫内手术切口的愈合情况进行了观察，均表明胚胎皮肤伤口愈合快而无瘢痕形成.随后一系列各种动物实验均证实了该临床发现.胚胎伤口具有与成年不同的愈合方式，伤口缺乏明显炎症反应，胶原排列有序，ECM中含有较多的透明质酸.成纤维细胞是参与成年组织修复的主要细胞，并参与调节ECM的合成.由于胎儿处于温暖、无菌的羊水环境及兔疫功能低下，故曾以为无瘢

6、痕愈合主要与胎儿生理环境有关.Longaker等［3］发现移植于胎羊的成年羊皮肤创伤后仍以瘢痕愈合，提示无瘢痕愈合与皮肤内在特性有关.Lorenz等［4］发现移植于裸鼠皮上胎儿皮片伤口由鼠胶原堆积留瘢痕，而皮囊中皮片伤口由胚胎成纤维细胞愈合而不留瘢痕，因此指出胎儿成纤维细胞在无瘢痕愈合中是主要的效应细胞.在胎儿伤口愈合过程中，胶原的量虽少，但其合成却是明显上调的.我们对胎兔成纤维细胞超微结构观察表明其合成功能活跃，为上述观点提供了组织学依据.Estes等［5］发现妊娠晚期胎儿成纤维细胞表现出肌成纤维细胞特征，而此期胎儿创伤有瘢痕形成，推测

7、，随着胎儿发育成熟，成纤维细胞也相应完成了胎儿型向成年型的改变，进而改变了伤口愈合的结果，导致了妊娠晚期的瘢痕形成.本研究也发现胎兔成纤维细胞仅有内质网扩张，微线稀少，而成兔成纤维细胞具肌成纤维细胞特征:细胞成片生长，相互有连接，内质网扩张，微丝增多，出现核凹陷切迹，说明参与两种愈合过程的成纤维细胞内在特性不同.总之，应用多种动物进行无瘢痕愈合的研究已广泛开展，但对其确切机制尚未明了.有特深入研究调控表型的机制，为进一步控制伤口愈合向无瘢痕方向转化提供依据.参考文献:［1］RowlattU.Intrauterinewoundhealing

8、ina20-weekhumanfe-tus［J］.VirchowsArch，1979;381（1）:353-361.［2］HarrisonMR，AdzickNS.Thefetusasapati