临床生物化学和生物化学检验

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1、临床生物化学和生物化学检验实验操作技能项目与考核标准一、刻度吸量管的使用技能1.选择：使用前先根据需要选择适当的吸量管，刻度吸量管的总容量最好等于或稍大于最大取液量。临用前要看清总容量和刻度。2.执管：用拇指和中指（辅以无名指），拿住吸量管上部，用食指堵住管上口和控制液流。刻度数字要朝向自己。3.取液：另一只手捏压橡皮球，将吸量管插入液体内（不得悬空，以免液体吸入球内），用橡皮球将液体吸至最高刻度上端1~2cm处，然后迅速用食指按紧吸量管上口，以免液体从吸量管下口流出。4.调准刻度：将吸量管提出液面，吸粘性较大的液体时，先用滤纸擦干管尖外壁；然后用食指控制液体使之缓慢下降，当至所需刻

2、度时，立即按紧吸量管上口（此时液体凹面、视线和刻度应在同一水平面上）。5.放液：放松食指，让液体自然流入容器内，放液时，管尖最好接触容器内壁，但不要插入容器内原有的液体中，以免污染吸量管和试剂。6.洗涤：吸取血液、血清等粘稠液体及尿液标本的吸量管，使用后要及时用自来水冲洗干净；吸一般试剂的吸量管可不必马上冲洗，实验完毕后再冲洗。冲洗干净后，晾干，再浸泡于铬酸洗液中，数小时后取出，再用流水冲净，最后用蒸馏水冲洗，晾干备用。二、溶液的混匀技术混匀的方式大致有以下几种，可随使用的器皿和液体容量而选用。1.旋转混匀法用手持容器，使溶液作离心旋转，适用于未盛满液体的试管或小口器皿，如锥形瓶。旋

3、转试管时最好用手腕旋转。2.指弹混匀法左手持试管上端，用右手指轻轻弹动试管下部，使管内溶液作旋涡运动。3.倒转混匀法适用于有塞量筒和容量瓶、试管内容物的混匀。一般试管内容物的混匀可用聚乙烯等薄膜封口，再用手按住管口倒转混匀。4.吸管混匀法用吸量管将溶液反复吸放数次，使溶液充分混匀。5.玻棒搅动法适用于烧杯内容物的混匀，如固体试剂的溶解和混匀。6.甩动混匀法右手持试管上部，轻轻甩动振摇，即可混匀。97.电磁搅拌混匀法在电磁搅拌机上放置烧杯，在烧杯内放入封闭于玻璃或塑料管中的小铁棒，利用磁力使小铁棒旋转以达到混匀杯中液体的目的，适用于酸碱自动滴定，pH梯度滴定等。8.振荡器混匀法利用振荡

4、器使容器中的内容物振荡，达到混匀的目的。9.注意：(1)混匀时须防止容器内液体溅出或被污染。(2)严禁用手指直接堵塞试管口或锥形瓶口振摇。三、离心机的使用方法使用离心机前，应检查离心机转动状态是否平稳，以确定离心机的性能；检查套管与离心管大小是否相配，套管是否铺好软垫（用棉药或橡皮），检查套管底部应无碎玻璃片或漏缝。检查合格后，将一对离心管（待分离管与非分离空白管）放入一对套管中，然后连套管一起分置粗天平两侧，用滴管向非分离空白管一侧加水，直至天平两侧彼此相等为止。将各对平衡的套管连同内容物放置于离心机内，两个等重的离心管必须放于对称位置。放妥后，接通电源开关，逐步扭动转速旋钮，缓慢

5、增加离心机转速，直到所需的转速。达规定时间后，将转速旋钮逐步调回零，待离心机停稳后，取出离心管。四、721型分光光度计使用方法如下：1.接通电源（指示灯亮），预热15～20分钟。2.灵敏度选择钮放在“1”档（如调不到“OD=0”时选用较高的档次）。3.转动波长选择钮，选用所需的波长。4.揭开比色杯暗箱盖，转动“0电位器”使电表指针对准T=0处。5.将比色杯放入比色杯架，使空白管对向光路，盖好比色杯暗箱盖。转动“100电位器”，调准电表指针使之指向OD=0（T=100）处。6.拉动比色杯座的拉杆，使测定杯进入光路，迅速从电表上读出光密度值，并记录。测读过程中，随机拉回拉杆到原位，使空白

6、杯进入光路，随时调整OD=0。7.比色完毕后，关上电源开关，取出比色杯，将比色杯暗箱盖好，清洗比色杯并晾干。9五、恒温水浴箱的使用1、加水到适当高度。2、接通电源，打开开关。3、调节温度，使之恒温。4、如长时间不用，应关上开关拔掉电源。六、氨基酸的薄层层析技术操作步骤：（一）薄板的制备1．称取硅胶G0.5g放入研钵中，加1.5ml0.2%羧甲基纤维素钠，研磨成均匀的稀糊状。2．将上述糊状物倾倒在4×10cm的玻璃片（图11）上，使之均匀地布满于玻片，将玻片轻轻地晃动，使硅胶G均匀分布，表面平坦，光滑，无水层及气泡，然后水平放置在空气中使其自然干燥。3.薄板上硅胶干后，放入105℃的恒

7、温干燥箱内活化，半小时后取出，晾凉备用。（二）点样1．在距离薄板一端约2cm处用细线向下压硅胶，压成一条点样线。2．用直径约1mm的玻璃毛细管分别吸取甘氨酸、精氨酸、酪氨酸及混合氨基酸溶液，在点样线上点样，每隔0.8cm处点一种样品（约5ul），点样直径约2~3mm。待点样处干后，再将样品在原点样处重复点一次。（三）展层1．硅胶板的点样端向下，倾斜地放入层析缸内，使其与缸底平面呈约30。角。2．用长颈漏斗加入展开剂使展开剂离点样处1~2cm处为止。3．盖上