温度和ph值对螺旋藻amy活性的影响[1]

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1、温度和pH值对螺旋藻AMY活性的影响[1]第7卷　第8期　2007年4月科　学　技　术　与　工　程Vol17　No18　Apr12007167121819(2007)0821300205ScienceTechnologyandEngineeringZ　2007　Sci1Tech1Engng.生物科学温度和pH值对螺旋藻AMY活性的影响扈瑞平　栗淑媛1　刘　燕1　乔　辰2(内蒙古医学院生化教研室,呼和浩特　010059;内蒙古师范大学生命科学院1,呼和浩特　010022;内蒙古农业大学农学院2,呼和浩特　010018)AMY上的差异,为螺旋藻种质资源的开发利用提供。理论依据

2、。摘　要　采用3,5-二硝基水杨酸(DNS)法对内蒙古毛乌素沙地碱湖的钝顶螺旋藻S1与国外引进的钝顶螺旋藻S2和极大螺旋藻S3的淀粉酶(AMY)活性,及温度和pH值对其影响进行了初步的比较研究。结果表明:S1、S2和S3的AMY活性在25℃、　　淀粉酶(amylase,简写AMY)广泛存在于动、。按其特性和作用方式分为两种,α-淀粉酶(EC3.2.1.1)和β-淀粉酶(EC3.2.1.2)[2,3]pH516时分别为7117U/gFW、4411U/gFW和5416U/gFW;植最适温度均为40℃;最适值均为pH516。我国特有的S1AMY对温度和pH适应范围宽,且在低温、

3、高温、强酸和强碱下的活性比引进种的高。关键词　螺旋藻　淀粉酶　活性　温度　pH值中图法分类号　Q94912;　文献标识码　A步的比较研究。旨在发现我国特有种与引进种在物组织中[1]螺旋藻含有极为丰富的营养成分和生理活性物质,具有提高机体免疫力和抗衰老的作用[4]。作为1　材料和方法功能性食品和保健品的螺旋藻日益受到人们的重视,但螺旋藻的基础研究相对滞后[5,6]。有关螺旋111　实验材料藻AMY的研究未见报道,本文以内蒙古毛乌素沙实验材料见表1。地碱湖特有的钝顶螺旋藻与国外引进的钝顶螺旋藻和极大螺旋藻为材料,对其AMY动力学进行了初表1　实验材料一览表材料物　　种产　　地

4、来　　源S1钝顶螺旋藻Spirulina(Arthrospira)platensis内蒙古巴彦淖尔碱湖自采S2钝顶螺旋藻Spirulina(Arthrospira)platensis非洲乍得湖南京大学生物科学与技术系S3极大螺旋藻Spirulina(Arthrospira)maxima墨西哥SosaTexcoco湖中国农业科学院注:下文对应材料以此表为准。用Zarrouk培养液[7]将螺旋藻在室温自然光照下培养,达到对数生长期时取样,用400目筛绢滤得新鲜藻,用蒸馏水冲洗,吸水至干备用。　2006年12月4日收到　　国家自然科学基金项目(39960062)和内蒙古自然科学

5、基金项目(99030324)资助112　方法11211　酶液制备准确称取备用的新鲜藻体1g,置于预冷研钵中,加入1mLpH516的磷酸缓冲液及少许石英砂,在冰浴中充分研磨为匀浆。在4℃下离心20min(RCF=8500g),取上清液定容至15mL,为酶提取图1　螺旋藻淀粉酶温度曲线图1　螺旋藻淀粉酶温度曲线　　7期扈瑞平,等:温度和pH值对螺旋藻AMY活性的影响表3　低温和高温下螺旋藻AMY活性的比较温度S1S2S2(℃)活性(U/gFW)为最大活性%活性(U/gFW)为最大活性%活性(U/gFW)为最大活性%S1/S2S1/S30111713170000∞∞101716

6、2014916171211121810118116904815561314182616716121231361496171920170000∞∞　　注:S1/S2和S1/S3是指酶活性的比。液备用,以失活的酶液做对照。11212　AMY活性测定采用3,5-二硝基水杨酸(DNS)法[8],在25℃、pH516条件下测定AMY活性,每个样品至少重复三次。在25℃、pH516条件下,每min催化淀粉水解生成1mg葡萄糖的酶量定为一个酶活力单位(U)。酶提取液为总AMY测定液;酶提取液于70℃恒温水浴中保温15min为α-AMY测定液;酶提取液在pH310缓冲液处理15min,为

7、β-AMY测定液。11213　温度2活性曲线的制作在0℃～96℃(沸腾)范围内分别测定酶活性,每个样品重复三次。绘制酶活性温度曲线。11214　pH2活性曲线的制作在酸度值pH(212～1410)范围内,测定AMY活性,每个样品重复三次。绘制酶活性pH曲线。2　结果与分析211　螺旋藻AMY活性螺旋藻AMY活性见表2。表2　螺旋藻AMY活性(U/gFW)及百分含量(%)材料总AMYα-AMYβ-AMYU/gFW%U/gFW%U/gFW%S1711710020172910511071.0S24411100418111539138