学位论文-—一株猪链球菌的分离与鉴定.doc

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1、毕业论文一株猪链球菌的分离与鉴定IsolationandidentificationofStreptococcussuis目录摘要：1前言31材料与方法41.1病原菌分离及镜检41.2相关试剂及培养基41.2.1相关试剂41.2.2培养基41.2.3标准菌株及实验动物51.3病原菌生化试验51.3.1糖发酵实验51.4药敏试验51.5病原菌PCR鉴定51.5.1引物51.5.2PCR模板的制备61.5.3PCR体系、条件及检测61.6病原菌毒力实验62结果与分析72.1镜检结果及分析72.2生化试验结果及分析82.3药敏试验结果及分析92.4PCR电泳结果及分析92.

2、5毒力实验结果及分析103讨论12参考文献13致谢14附录15一株猪链球菌的分离与鉴定摘要：2型猪链球菌(Streptococcussuistype2，SS2)是一个重要的人兽共患病原菌，可引起猪败血症、脑膜炎及急性死亡，并可导致人感染并死亡。猪链球菌2型感染已成为影响全世界养猪业的重要问题之一，全面了解猪链球菌的毒力和感染机制，有效预防和治疗2型猪链球菌感染已迫在眉睫。本研究主要采用病料分离、镜检、PCR鉴定、药敏试验、生化试验、动物攻毒试验等对一株猪源链球菌进行分离鉴定，对其毒力、抗药性进行初步评估，为猪链球菌的深层研究提供参考依据。关键词：2型猪链球菌；鉴定；毒

3、力15IsolationandidentificationofStreptococcussuisDONGYa-liAbstract:Streptococcussuistype2(SS2)isanimportantswinepathogenandazoonoticagent。Itcancausesepsis,meningitis,andacutedeathofpigs,andcanleadtohumaninfectionanddeath.Streptococcussuistype2infectionshavebeenoneoftheimportantquestionst

4、othepigsindustryworldwide,ItisimminenttocomprehensivefingdingoutthevirulenceandinfectionmechanismsofStreptococcussuisandpreventionandtreatmentofSS2infectineffectively.Thisstudywithpurifiedmicroscopy,PCR,susceptibilitytesting,biochemicaltesting,drugtestingandotheranimalattackonthestrepto

5、coccusswinetype2toisolateandidentifieit.WeevaluatesomeofitsvirulenceandresistancetoprovidreferenceforthedeepresearchesofSS2.Keywords:Type2Streptococcussuis;Identification;Virulence15前言猪链球菌病是链球菌属马链球菌兽疫亚种、马链球菌类马亚种、Lancefield分群中D、E、L群链球菌以及猪链球菌引起猪的疫病的总称,是一种常见的猪传染病，世界各国均有发生．危害性严重，也是一直困扰我国养猪业

6、的重要传染病之一．猪链球菌(Streptococcussuis)是革兰阳性兼性厌氧球菌，是引起猪链球菌病最主要的病原,根据其荚膜多糖抗原性的差异分为35个血清型，其中猪链球菌2型（Streptococcussuistype2,SS2）是毒力最强、危害最严重、流行最广泛的血清型之一[1]。可引起猪脑膜炎、心内膜炎、关节炎、肺炎、败血症及急性死亡等，也可感染人并致死，是一种重要的人畜共患病病原[2]。猪链球菌病是对当今养猪业造成危害的一个重要疾病。病猪的鼻液、尿液、血液、肌肉、内脏和关节液均可检出病原体。未经过无害化处理的病死猪肉、内脏和废弃物是散播本病的重要传染源。呼吸

7、道是主要传播途径。本病一年四季均可发生，但以4-10月份发病较多，常为地方性流行，短期可波及全群，发病率、病死率很高[3,4]。1954年在英国从暴发败血症、脑膜炎和关节炎的乳猪中分离得到一株α2溶血猪链球菌。Elliot(1968)将此菌命名为荚膜2型猪链球菌。之后,该菌在澳大利亚、美国、丹麦、日本、泰国、新加坡及欧洲和北美洲的许多国家导致猪只发病。1990年初广东省某猪场暴发疑似猪2型链球菌,1998-1999年江苏省部分猪饲养集中地区的猪群中连续2年在盛夏季节突然暴发流行猪链球菌病,经鉴定病原菌为猪链球菌2型,在该病流行期间有25人感染发病,死