多重pcr检测水产品中四种食源性致病菌的研究与检测试剂盒的开发

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1、浙江工商大学硕士学位论文多重PCR检测水产品中四种食源性致病菌的研究与检测试剂盒的开发姓名：翁思聪申请学位级别：硕士专业：食品科学与工程指导教师：励建荣201112 规定致病菌不得检出。然而传统致病菌检测方法存在检测时间长，一 浙江工商大学硕士学位论文球菌、副溶血性弧菌的复合共增菌培养基��，用于水产品中上述常见四种食源性致病菌的同时快速增菌。以缓冲蛋白胨水为基础培养基，通过挑选适合的促进剂、抑制剂及营养物质进行单冈素试验和正交试验，确定其最佳成分及配比；分析了��培养基对目标菌的生长选择性及生长特

2、性，并通过����方程构建生长模型，获得四�⑸秆〕鼋鸹粕�咸亚蚓��������酶基因��⑸趁攀暇���������的侵袭蛋白基因��、志 浙江工商大学硕士学位论文方法对比验证得出，四种致病菌的整体检测符合率达�％以上，两内完成样品的检验。性及重复性进行了测定和评价。结果表明，该实际盒检测效果稳定，��冢��婊��℃条件保存，其保质期可接近或达到一年，但试剂的反复冻融对试剂盒的检测效果影响较大，使用者应该根据实际检测需求选择适合的保存方 浙江工商大学硕士学位论文�����甈���������．���

3、����������������������������������������������疭�������������������畃���� �������．�������������������������������������，�������������������狿�������狿���甌��������������������������������������������������������������������������� 浙江工商大学硕士学位论文�����������甌��

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5、�������������������．���������甌������ 浙江工商大学硕士学位论文����������，�����������痑�����甌��������鎤��—�����������������������������������������������������；�����；���肠；����������；�����������；����� 浙江工商大学硕士学位论文��本文所涉及的水产品中食源性致病菌的概述肠杆菌，其生活在被人或动物粪便污染的环境中，此外还有志贺氏菌、金黄色葡

6、菌、金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌、志贺氏菌等致病菌不得检出。沙门氏菌形态呈两端钝圆的短杆，长��无英膜，除鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌外，大多有周身鞭毛，能运动；属 浙江工商大学硕士学位论文志贺氏菌属�����是人类及灵长类动物细菌性痢疾最为常见的病原菌。之，痢疾志贺氏菌最弱。一般加热���菌量再大也不引起疾病�约澳诙舅睾屯舛舅夭�����。 浙江工商大学硕士学位论文程中受到污染及奶牛化脓性乳腺炎或禽畜局部化脓时，对肉体其它部位的感染。�，无芽孢，鞭毛，大多数无荚膜，呈革兰氏染色阳性。其对营养要求不

7、高，需氧或兼性厌氧，最适生长温度为菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，致病力强弱主要取决于其产生的毒素和侵副溶血性弧菌为革兰氏阴性弯曲的球杆菌或呈弧菌，一端有单鞭毛，运动活泼，大小为��．��岬，需氧或兼性厌氧，生长营养要求不高，但在无盐的环境敏感，当�引起心房纤维性颤动、期前收缩或心肌损害��。��食源性致病菌检测技术的研究进展 浙江工商大学硕士学位论文过程操作繁琐，检测周期长，无法满足现代公共卫生事业对各种病原微生物快速时分析多种成分，以及由于对结构类似的化合物存在一定程度的交叉反应，而难免疫磁珠

8、分离技术整合了免疫反应的高度特异性和磁性分离快速简单的优点，而广泛用于分离、浓缩、纯化微生物或特异性抗原物质等方面。其原理是利用人工合成的内含铁成分，可被磁铁磁力所吸引，外有功能基因，可结合活性蛋白质�固�的磁珠，作为抗体的载体。当磁珠上的抗体与相应的微生物或特异性抗原物质结合后，则形成抗原一抗原．磁珠免疫复合物，这种复合物具有较高的������将兔抗副溶血性弧菌荚膜多克隆���拥窖蚩雇肐�包被的磁珠方法。 浙江工商大学硕士学位论文��．��免疫芯片成的��部梢宰魑D