铁皮石斛的脱分化与再分化研究

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1、生物技术综合实验题目：铁皮石斛的脱分化与再分化研究Title：Dedifferentiationandre-differentiationofDendrobium学院生命与环境科学学院年级专业2011级生物技术学生姓名丁铭学号110153322指导教师赵军完成日期2014年5月9目录摘要关键词正文一、铁皮石斛的概述及其药用价值--------------------------------------4二、自然生长和繁殖条件-------------------------------------

2、---------4(一)、铁皮石斛的繁殖特性----------------------------------------4(二)、自然生殖条件----------------------------------------------4(三)、繁殖状况--------------------------------------------------5三、实验操作-------------------------------------------------------5(一)、培养基的配

3、制---------------------------------------------5（二）、铁皮石斛的脱分化与再分化---------------------------------6(三)、观察实验结果---------------------------------------------8四、结论-----------------------------------------------------------8参考文献9【摘要】铁皮石斛为石斛属珍稀濒危药用植物,药用部分是新鲜或

4、干燥茎,具有益胃生津、滋阴清热的功效。铁皮石斛的种子极小、无胚乳,自然条件下需与某些真菌共生才能萌发,很难用实生苗栽培,本文主要介绍通过铁皮石斛外植体的脱分化与再分化的研究来实现铁皮石斛的组织培养，从而应用到现实中来扩大铁皮石斛的生产，以便铁皮石斛的药用价值能够得到更好的利用。【关键词】铁皮石斛、组织培养、愈伤组织、脱分化、再分化9【正文】一、铁皮石斛的概述及其药用价值铁皮石斛,为石斛属珍稀濒危药用植物,俗称铁皮枫斗,又称黑节草,属于兰科附生兰类,是一种珍稀的药用植物和和名贵的室内观赏植物。野生的

5、铁皮石斛大多分布在东亚、东南亚及澳大利亚等国家和地区[1]。在我国主要分布于秦岭、淮河以南的云南、广西、贵州、浙江等地的山区。铁皮石斛的种子极小、无胚乳,自然条件下需要与某些真菌共生才能萌发,很难用实生苗栽培;而传统的分株、扦插等方式的繁殖率极低,加上人为的过度采挖和破坏生境,其资源已濒临灭绝,被国家列为重点保护的药用植物之一。鉴于铁皮石斛在我国栽培的地域局限性,规模化开发石斛活性物质急需要开辟新的途径。而铁皮石斛组培以其繁殖规模大、速度快为优势是生产有效物质的一种有前途的途径和手段,是解决其资源

6、紧缺问题的有效途径。因此对铁皮石斛组织培养及其工艺条件的深入研究就具有了非常重要的意义,它不仅具有显著的经济效益和社会效益,同时也具有显著的生态效益。二、自然生长和繁殖条件(一)、铁皮石斛的繁殖特性铁皮石斛的种子极为细小，胚胎发育不完全，无胚乳组织，在自然状态下发芽率极低，有性繁殖极为困难，生长于悬崖峭壁之阴处，自然产量极为稀少，由于价值不菲，长期以来一直处于过度采挖状况，其野生资源已濒临绝种，被国家列为一级保护植物，野生资源远远不能满足药材市场的需要，人工繁殖主要靠无性繁殖，从根部不断分蘖或从上

7、部茎节处生根长出新的植株[2]，但是产量很低，仍然离市场的需求相差甚远。科研人员努力探索人工快繁的方法，取得了不少的进展。(二)、自然生殖条件铁皮石斛生于海拔2100-2500m的林中树上或林缘岩石上，或在河沟沟溪山谷旁峭壁上，并常与石苇等苔藓植物附生在一起，在我国主要分布于广西"云南"贵州等地[3]，喜阴凉“湿润”通风多雾的小气候。石斛在14摄氏度时开始生长，20-26摄氏度且空气湿度大于80%最适宜；在30摄氏度且相对湿度小于50%的情况下，叶脉变黄，叶片下垂，茎现皱缩，如崖缝渗水过多则易烂根

8、致亡。9石斛喜光又怕强阳光直射，忌干燥与高温[5]。(三)、繁殖状况铁皮石斛的有性繁殖极为困难，主要原因包括:（1）其种子极为细小，胚胎发育不完全，无胚乳组织，在自然状态下发芽率极低，（2）苛刻的生长环境，也限制了其有性繁殖,何平荣等［4］研究表明，铁皮石斛平均自然结实率为0.31%。铁皮石斛主要靠根部无性分蘖繁殖而不断生出新的植株并成丛生长，有时也从上部茎节处生根长出新植株[3]。三、实验操作(一)、培养基的配制（a）实验用品1）、仪器和用品：500ml试剂瓶4个。100ml试剂