玉米细菌性枯萎病和玉米内州萎焉病的酶联免疫-实时荧光 pcr检测

玉米细菌性枯萎病和玉米内州萎焉病的酶联免疫-实时荧光 pcr检测

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1、玉米细菌性枯萎病和玉米内州萎焉病的酶联免疫-实时荧光+PCR检测27玉米细菌性枯萎病和玉米内州萎焉病的酶联免疫-实时荧光+PCR检测27玉米细菌性枯萎病和玉米内州萎焉病的酶联免疫-实时荧光+PCR检测27玉米细菌性枯萎病和玉米内州萎焉病的酶联免疫-实时荧光+PCR检测27玉米细菌性枯萎病和玉米内州萎焉病的酶联免疫-实时荧光+PCR检测27玉米细菌性枯萎病和玉米内州萎焉病的酶联免疫-实时荧光+PCR检测27玉米细菌性枯萎病和玉米内州萎焉病的酶联免疫-实时荧光+PCR检测27玉米细菌性枯萎病和玉米内州萎焉病的酶联免疫-

2、实时荧光+PCR检测27玉米细菌性枯萎病和玉米内州萎焉病的酶联免疫-实时荧光+PCR检测27玉米细菌性枯萎病和玉米内州萎焉病的酶联免疫-实时荧光+PCR检测27浙江农业学报ActaAgriculturaeZhejiangensis,2014,26(5):1273-12772014,26(5):1273-1277.http://www.zjnyxb.cn陈曦,张明哲,林晓佳,等.玉米细菌性枯萎病和玉米内州萎焉病的酶联免疫—实时荧光PCR检测[J].浙江农业学报,DOI:10畅3969/j.issn.1004-1524

3、畅2014畅05畅24玉米细菌性枯萎病和玉米内州萎焉病的酶联免疫—实时荧光PCR检测陈 曦,张明哲,林晓佳,吴志毅,陈吴健,吴 蓉,夏 拯1111121(1浙江省检验检疫科学技术研究院,浙江杭州310016;2杭州出入境检验检疫局,浙江杭州310006)摘 要:针对玉米细菌性枯萎病和玉米内州萎焉病这两种检疫性病菌进行酶联免疫—实时荧光PCR检测研究,对该方法进行了特异性、灵敏度以及实际样品模拟试验。结果表明,该方法具有较好的特异性,检测低限在100~200cfu・mL,同时可用于实际样品的检测鉴定。27关键词:玉米

4、细菌性枯萎病;玉米内州萎焉病;酶联免疫—实时荧光PCR中图分类号:S435        文献标志码:A文章编号:1004-1524(2014)05-1273-05-1CHENXi,ZHANGMing-zhe,LINXiao-jia,WUZhi-yi,CHENWu-jian,WURong,XIAZheng1111121Theimmuno-capturereal-timePCRdetectiontechnologyofPantoea.stewartiisubsp.stewariiandClavibactermichi

5、ganensissubsp.nebraskense12(ZhejiangAcademyofScience&TechnologyforInspection&Quarantine,Hangzhou310016,China;HangzhouEntry-ExitInspectionandQuarantineBureau,Hangzhou310006,China)Abstract:Animmuno-capturePCR(IC-PCR)methodwasstudiedtodetecttwoquarantinebacterial

6、,Pantoeastew-artiisubsp.stewariiandClavibactermichiganensissubsp.nebraskense.Specificityandsensitivityofthemethodwere-1examined,andtheactualsamplesimulationexperimentwasconducted.Theresultsshowedthatthismethodwashighdetectionandidentificationoftheentry-and-exi

7、tsamples.species-specific.Theminimumlimitofdetectionisbetween10-100cfu・mL.ThemethodcanalsobeusedforKeywords:Pantoeastewartiisubsp.stewarii;Clavibactermichiganensissubsp27.nebraskense;immuno-capturePCR目前我国外来生物入侵的情况十分严重[1-4]3畅2%与8畅8%。与此同时,在进口方面增长速度更加迅猛,2011年,全国进

8、口525万t,较2010年157畅2万t,增长了233%。因此,加强口岸检疫工作,防范危险性病害传入刻不容缓。建立有效的病原检测技术体系是防范危险性病菌传入的可靠保证。检疫性玉米细菌病害主要有两种:玉米细菌性枯萎病和玉米内州萎蔫,一些具危险性的外来有害生物相继传[5-6]入,导致新的疫情不断突发在2000亿元以上[7]。据报道每年各种外来有害生物对我国造成的

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