实时荧光定量pcr检测转基因玉米mon88017-江苏农业学报

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1、江苏农业学报（ＪｉａｎｇｓｕＪ．ｏｆＡｇｒ．Ｓｃｉ．），２０１６，３２（５）：９９２～９９８９９２ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｊｓｎｙｘｂ．ｃｏｍ宋君，王东．实时荧光定量ＰＣＲ检测转基因玉米ＭＯＮ８８０１７［Ｊ］．江苏农业学报，２０１６，３２（５）：９９２⁃９９８．ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００⁃４４４０．２０１６．０５．００６实时荧光定量ＰＣＲ检测转基因玉米ＭＯＮ８８０１７宋君，王东（四川省农业科学院分析测试中心，四川成都６１００６６）摘要：为完善中国转基因生物及产品定量分析标准化技术体系，保障中国生物安全和降低生态风险，本研究建立了转基因玉米ＭＯＮ８８０１７及产品的实时荧光定量

2、ＰＣＲ分析方法，并用特异性、准确度、灵敏度以及测量不确定度等指标评价了该方法。结果显示该方法分析转基因玉米ＭＯＮ８８０１７特异性很强；２９次重复测量含量为１?５０％的转基因玉米ＭＯＮ８８０１７样品，平均测量值（１?５４１％）接近真实值（１?５０％），相对偏差为２?７０％，测量值的变异系数为０?１１０４，回收率为１００?００％，测量不确定度为０?０９６；在９７?５％的置信水平下能检测到最低含量为５个拷贝的ＭＯＮ８８０１７分子片段。因此，本研究建立的转基因玉米ＭＯＮ８８０１７实时荧光定量ＰＣＲ方法具有较高的特异性、准确度和灵敏度，能为中国转基因生物安全监管提供良好的技术支撑。关键词：转基因玉米Ｍ

3、ＯＮ８８０１７；实时荧光定量ＰＣＲ；特异性；灵敏度；精确度；测量不确定度中图分类号：Ｓ５１３?０３５?３文献标识码：Ａ文章编号：１０００⁃４４４０（２０１６）０５⁃０９９２⁃０７Ａｒｅａｌ⁃ｔｉｍｅｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅＰＣＲｆｏｒｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｇｅｎｅｔｉｃａｌｌｙｍｏｄｉ⁃ｆｉｅｄｍａｉｚｅＭＯＮ８８０１７ＳＯＮＧＪｕｎ，ＷＡＮＧＤｏｎｇ（ＡｎａｌｙｔｉｃａｌａｎｄＴｅｓｔｉｎｇＣｅｎｔｅｒ，ＳｉｃｈｕａｎＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅ，Ｃｈｅｎｇｄｕ６１００６６，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎｏｒｄｅｒｔｏｃｏｍｐｅｎｓａｔ

4、ｅａｎｄｉｍｐｒｏｖｅｔｈｅｓｔａｎｄａｒｄｉｚｅｄｔｅｃｈｎｉｃａｌｓｙｓｔｅｍｓｏｆｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅａｎａｌｙｓｅｓｆｏｒｇｅｎｅｔｉ⁃ｃａｌｌｙｍｏｄｉｆｉｅｄｏｒｇａｎｉｓｍｓ（ＧＭＯｓ）ａｎｄｐｒｏｔｅｃｔＣｈｉｎａ′ｓｂｉｏ⁃ｓａｆｅｔｙａｎｄｒｅｄｕｃｅｅｃｏｌｏｇｉｃａｌｒｉｓｋ，ａｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｇｅｎｅｔｉｃａｌｌｙｍｏｄｉｆｉｅｄ（ＧＭ）ｍａｉｚｅＭＯＮ８８０１７ｗａｓｄｅｖｅｌｏｐｅｄｕｓｉｎｇｒｅａｌ⁃ｔｉｍｅｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅＰＣＲ．Ｔｈｅｍｅｔｈｏｄｗａｓｅｖａｌｕａｔｅｄｂｙ

5、ｓｅｖｅｒａｌｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｉｃａｌｉｎｄｉｃｅｓｓｕｃｈａｓｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ，ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ，ａｃｃｕｒａｃｙａｎｄｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｕｎ⁃ｃｅｒｔａｉｎｔｙ．ＴｈｅｍｅａｎｖａｌｕｅｏｆＧＭｍａｉｚｅｃｏｎｔｅｎｔ（１?５４１％）ｒｅｐｅａｔｅｄｌｙｍｅａｓｕｒｅｄｆｏｒ２９ｔｉｍｅｓｗａｓｃｌｏｓｅｔｏｔｈｅｒｅａｌｖａｌｕｅ（１?５０％）ｗｉｔｈｔｈｅｖａｒｉａｔｉｏｎｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｏｆ０?１ａｎｄｔｈｅｒｅｌａｔｉｖｅｄｅｖｉａｔｉｏｎｏｆ２?７０％．Ｔｈｅｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓａｎｄｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｕｎｃｅｒ⁃ｔａｉｎｔｙｗｅｒｅ１００?００％

6、ａｎｄ０?０９６，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＴｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆＭＯＮ８８０１７ｍｏｌｅｃｕｌａｒｆｒａｇｍｅｎｔａｓｌｏｗａｓｆｉｖｅｃｏｐｉｅｓｃｏｕｌｄｂｅｄｅｔｅｃｔｅｄａｔ９７?５０％ｃｏｎｆｉｄｅｎｃｅｌｅｖｅｌ．ＴｈｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｆｏｒｔｈｅＧＭｍａｉｚｅＭＯＮ８８０１７ｉｓｏｆｈｉｇｈｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ，ａｃｃｕｒａｃｙａｎｄｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙａｎｄｉｓｃａｐａｂｌｅｏｆｐｒｏｖｉｄｉｎｇｔｅｃｈｎｉｃａｌｓｕｐｐｏｒｔｆｏｒｔｈｅｓａｆｅｔｙｓｕｐｅｒｖｉｓｉｏｎｏｆｇｅｎｅｔｉｃａｌｌｙｍｏｄｉｆ

7、ｉｅｄｏｒｇａｎｉｓｍｓｉｎＣｈｉｎａ．收稿日期：２０１６⁃０１⁃１５Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｇｅｎｅｔｉｃａｌｌｙｍｏｄｉｆｉｅｄｍａｉｚｅＭＯＮ８８０１７；基金项目：四川省质监局标准化技术体系研究项目ｒｅａｌ⁃ｔｉｍｅｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅＰＣＲ；ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ；ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ；（ＺＹＢＺ２０１３－３９）ａｃｃｕｒａｃｙ；ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｕｎｃｅｒｔａｉｎｔｙ作者简