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1、HPLC法测定蓝莓中鞣花酸含量摘要:目的建立蓝莓提取物中鞣花酸含量的HPLC测定方法。方法色谱条件ODSHYPERSILC18柱(100mm×4.6mm,5μm),柱温40℃,用CH3OH-EtOAc-KH2PO4/H3PO4(0.05mol/L)(体积比44∶2∶54)作为流动相,检测波长为254nm。结果鞣花酸在0.318~318.0μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.99902。平均加样回收率为95.42%,RSD为1.03%。结论本方法精确可靠。关键词:蓝莓;鞣花酸;HPLCDeterminationofellagicaci
2、dintheextractsofLblueraspberrybyHPLCLIUYAN1SONGLi-qiu1FANJun-juan2LIUHuna-yu2(1StandardInformationResearchInstituteofShenyangQualityandTechnicalSupervisionBureau,Shenyang110161;2LiaoningAgriculturalVocation-TechnicalCollege,Yingkou115009)Abstract:Todeveloparapidandsensitiv
3、ehigh-performanceliquidchromatographicassayfordeterminationofellagicacidintheextractsofLblueraspberry.MethodChromatographywasperformedonaODSHYPERSIL-C18column(250mm×4.6mm,5μm)at254nm.Themobilephaseconsistedofamixtureofmethanol,ethylacetate,0.05mol/LKH2PO4-H3PO4(44∶2∶54)ata
4、flowrateof1.0ml/min.ResultandConclusionThelinearrangeofellagicacidwas0.318-318.0μgwithacorrelationcoefficientof0.99902.Theaveragerecoverywas95.42%andRSD1.03%.ThemethodisaccurateandreproducibleKeywords:Lblueraspberry.;ellagicacid;HPLC蓝莓为多年生落叶或长绿果树,是一种具有极高经济价值的新兴世界性小浆果果树,是越桔
5、属植物中营养成分最丰富的类型,被联合国粮农组织(FAO)确定为人类五大健康食品之一。果实中大多含有特别丰富的、有益于健康的氨基酸、蛋白质、脂肪、碳水化合物、叶酸、鞣花酸、鞣花单宁、丰富的食用纤维、果糖、维生素C、维生素E、维生素A、SOD、熊果甙、花青甙、类黄酮及钾、铁、锌、锰等微量元素。现已成为保健食品的良好原料。随着我国人民生活水平的不断提高,对保健食品的要求和希望越来越高,因此,加速蓝莓的发展有着广阔的前景,它将会成为21世纪的另一个新兴产业。鞣花酸是广泛存在于各种软果、坚果等植物组织中的一种天然多酚组分,它是没食子酸的二聚衍生物,是
6、一种多酚二内酯[1]。它不仅能以游离的形式存在,而且更多的是以缩合形式(如鞣花单宁、苷等)存在于自然界。鞣花酸对化学物质诱导癌变及其它多种癌变有明显的抑制作用,具有抵抗肺癌、食管癌[2],抗氧化[3]等作用。从机理上讲,它是一种抗氧化剂,能与人体内有害自由基结合,具有强力去癌变功效,可抗衰老、增加肌体免疫力;具有凝血[4]、降压、镇静作用[5],对多种细菌、病毒有很好的抑制作用[6];最新研究发现鞣花酸有抑制酪氨酸酶过剩的作用,从而使导致皮肤雀斑、黄褐斑形成的黑色素难以形成,达到美白皮肤的效果。目前,国外正在开发以鞣花酸为原料的保健食品与药
7、物。本文建立了HPLC法测定蓝莓中鞣花酸含量的方法,并对文献报道的多种色谱条件进行了比较,表明本文方法精确可行。1.实验部分1.1实验材料蓝莓试材取自于内蒙古牙克石市伊图里河镇(大兴安岭)1.2仪器与设备Agilenthp1100高效液相色谱仪(美国安捷伦公司);KudosSK5200H型超声仪(上海科导);DF200A200/0.1mg电子天平(德国赛多利斯股份公司);UFENG型真空抽滤机;C18固相萃取柱(上海安谱科技有限公司);R-205旋转蒸发仪等(瑞士Buchi)。1.3试剂和溶液1.3.1试剂鞣花酸标准品(纯度≥96%),美国
8、sigma公司生产。色谱纯:乙酸乙酯、甲醇(国药集团化学试剂有限公司)。分析纯:丙酮(北京化学试剂公司)、盐酸(沈阳市东兴试剂厂)、二甲亚砜(沈阳市东兴试剂厂)、磷酸(北京化学试