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1、微生物学通报MicrobiologyChinatongbao@im.ac.cnJUN20,2011,38(6):847−852©2011byInstituteofMicrobiology,CAS洋葱伯克霍尔德菌T1828质粒消除方法及条件钟义军1,2,3吴晓玉1,3*刘好桔1,3武琳2饶志强1,3王园秀1,3(1.江西农业大学生物科学与工程学院江西南昌330045)(2.江西省红壤研究所江西南昌331717)(3.南昌市发酵应用技术重点实验室江西南昌330045)摘要:采用十二烷基硫酸钠和提高生长温度结合法、紫外线涂布平板法、冻
2、融法、吖啶橙法和黄芩甙提取液消除法等方法消除洋葱伯克霍尔德菌T1828菌株质粒,探讨适合洋葱伯克霍尔德菌质粒消除的方法,并研究最佳质粒消除条件。结果表明十二烷基硫酸钠和提高生长温度结合法最适合于洋葱伯克霍尔德菌T1828质粒消除,同时最佳消除条件为:在T1828培养16h后加入SDS使其终浓度0.1%,36°C处理18h,消除率达到49%。筛选到的无质粒突变株可以用于进一步的研究。关键词:洋葱伯克霍尔德菌T1828,质粒消除,质粒提取,消除条件PlasmideliminationmethodandconditionsofBurk
3、holderiacepaciaT1828ZHONGYi-Jun1,2,3WUXiao-Yu1,3*LIUHao-Ju1,3WANGYuan-Xiu1,3WU-Lin2RAOZhi-Qiang1,3(1.CollegeofBioscienceandEngineering,JiangxiAgriculturalUniversity,Nanchang,Jiangxi330045,China)(2.RedSoilInstituteofJiangxiProvince,Nanchang,Jiangxi331717,China)(3.Nanc
4、hangKeyLaboratoryofFermentationApplicationandTechnology,Nanchang,Jiangxi330045,China)Abstract:ToexplorethesuitableforBurkholderiacepaciaplasmideliminationmethodandstudytheop-timalconditionsforplasmidelimination,weeliminatedplasmidofBurkholderiacepaciaT1828byusingsodi
5、umdodecylsulfateandimprovingthegrowthtemperaturecombinationmethod,UV-coatedplatemethod,freeze-thawmethod,acridineorangemethodandbaicalinextractionmethodssuchaseliminationmethods.Theresultsshowedthatsodiumdodecylsulfateandimprovingthegrowthtemperaturecombina-tionmetho
6、disbestsuitedtoBurkholderiacepaciaT1828plasmidelimination,whilethebestconditions基金项目：江西省自然科学基金项目(No.2008GJN0016);江西省教育厅科技项目(No.GJJ09171);江西农业大学校基金项目(No.2548)*通讯作者：:wuxiaoyu58@yahoo.com.cn收稿日期：2010-10-15;接受日期：2011-02-23fortheeliminationareT1828cultureafter16hbyaddingS
7、DSto0.1%ofthefinalsolubilitydealtwith18hat36°C,theeliminationratereach49%.Theplasmid-freemutantstrainscanbeusedforfurtherstudy.Keywords:BurkholderiacepaciaT1828,Plasmidelimination,Plasmidextraction,Eliminateconditions冠菌素(也称冠毒素,Coronatine,简称COR)是微生物产生的高活性次生代谢产物。研究发现,C
8、OR类似茉莉酸甲酯(Methyljasmonaste,简称MeJA)诱导水稻颖花快速开放[1−2],且COR的作用效果高于黄芩甙消除法等方法处理菌株T1828,获得菌株T1828质粒消除的适宜方法与条件,为探讨菌株产冠菌素性能与质粒之间关系提供材料。1材料与方法
