资源描述：
《钌ⅱ多吡啶配合物对多重耐药菌mrsa光动力抗菌作用研究（可编辑）》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、钌Ⅱ多吡啶配合物对多重耐药菌MRSA光动力抗菌作用研究765南开大学硕士学位论文钌(Ⅱ)多吡啶配合物对多重耐药菌MRSA光动力抗菌作用的研究姓名:王钰铖申请学位级别:硕士专业:临床医学指导教师:顾瑛2012-05摘要研究目的研究新型光敏剂钌多吡啶配合物、和对耐甲氧西林金,的光动力黄色葡萄球菌.,抗菌作用,为探索抗多重耐药菌提供实验依据。方法、、、和用配制不同浓度的三种光敏剂溶液,分别测定不同浓度的三种光敏剂的吸收光谱,根据吸收光谱选定三种光敏剂的治疗激发光波长。三种光敏剂对的抗菌作用的研究。实验分组、单纯光敏剂组、单纯光照组和空白对照组。组:不
2、同浓度的光敏剂与菌液光、.、.、.敏剂终浓度为、、,细菌终浓度为/孵育后,以激发波长激光照射、激光照射和,照射时间功率密度/。单纯光敏剂组:光敏剂与菌液浓度同组,孵育,不予照光。单纯光照组:菌液浓度同组,不予光敏剂孵育,激光照射剂量同组。空白对照组:菌液浓度同组,不予光敏剂,不予照光。处理后内以稀释平板法测定细菌存活浓度,通过与空白对照组比较,分析组各浓度点的抗菌效果,并对三种光敏剂的抗菌效率进行比较。抗菌作用位点的初步研究:选择浓度为.的光敏剂对进行处理激光照射参数同前,分别在处理后即刻、、用%戊二醛将菌液固定,以磷钨酸进行负染色后,在透射电
3、镜下观察细菌形态学改变。以.的为光敏剂,对对数生长期的菌液进行处理激光照射参数同前后,提取基因组进行琼脂糖凝胶电泳。结果三种光敏剂的最大吸收峰均在紫外波段。在可见光区的吸收峰在和,的吸收峰在和,的吸收峰在摘要和,根据三种光敏剂在和波长处的摩尔消光系数的比较,选用为激发波长,和则以为激发波长。单纯或激光照射均不影响细菌的活性,三种光敏剂的单纯光敏剂组对细菌活性也无影响。和的抗菌作用较强,时即能达到有效杀菌使细菌存活浓度降低前两种光敏剂浓度为.时才能达到有效杀菌。以上,而在浓度为电镜观察发现细菌膜结构包括细胞壁和细胞膜破坏严重,形成碎片,细胞内容物
4、外溢,染色体暴露。处理后随着时间延长,各视野内膜结构仍然完整的细菌数量递减。电泳结果显示组电泳条带变淡。结论三种钌多吡啶配合物光敏剂介导的作用能有效杀伤,其抗菌作用≈。细菌的膜结构可能是光敏剂钌多吡啶配合物介导的作用的主要位点。关键词:光动力疗法,钌多吡啶配合物,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,多重耐药菌,.?,.、、、矛口..‘.:、、、.、.、.打/../.:,,.:.:,..,....垒里皇竺一?????????????????????????????一,%,..一.,.,撕曲.,.,,.,./,..,,,...,.,......:,,第一章
5、前言第一章前言,是目前国际上正在发展的一种光动力疗法新疗法,已经成功应用于肿瘤的治疗,成为手术、放疗、化疗之外的第四种疗法。其基本原理是光敏剂,在合适的光源照射下,从基态经寿命极短的单线态,系间穿越到三线态。受光激发的三线态光敏剂可进行两种形式的反应:经过氢原子或电子转移,直接同底物或溶剂反应,形成自由基,为型反应;能量转移到氧分子,形成单线态氧,为型反应。通过型、型反应产生的以单线态氧为代表的一系列毒性活性产物可以与细胞或微生物的磷脂、核酸和蛋白质等生物大分子反应,破坏生物膜结构或其他功能单位,使细胞或微生物死亡,从而达到治疗效果。光敏剂分子
6、的结构特点使其更易聚集在生长旺盛的细胞中,因此肿瘤细胞是良好的作用靶点,与肿瘤细胞相似,微生物由于繁殖迅速,比正常体细胞对光敏剂亲和性更强,因此,可选择性作用于感染的微生物,是一种有效的灭活微生物的方法。在第一次世界大战时期,灭活微生物被用于战伤感染的治疗【。抗生素是由细菌、霉菌或其他微生物在生活过程中所产生的具有抗病原体活性的一类物质。这类物质细菌杀伤作用强,在有效杀菌浓度以上,几乎能完全杀灭细菌;通常作用于细菌独有的结构,具有高选择性,对人体无明显副作用。年,青霉素粗制品首次应用于临床,随后的几十年是抗生素的“黄金时代”,现抗生素的种类已达
7、几千种,在临床上常用的也有几百种,主要是微生物培养液的提取物以及用化学方法合成或半合成的化合物。目前抗生素的作用机理主要有以下种:阻碍细胞壁合成,导致细菌在低渗环境下膨胀破裂死亡,以这种方式作用的主要是.内酰胺类抗生素;与细菌胞膜相互作用,增强细胞膜的通透性,开放膜上的离子通道,导致细菌细胞内液渗漏或电解质失衡而死亡,以这种方式作用的抗生素有多粘菌素等;与细菌核糖体或其反应底物如、相互作用,抑制结构蛋白和酶的合成,以这种方式作用的抗生素主要包括四环类抗生素、大环内酯类抗生素、氨基糖苷类抗生素、氯霉素等;阻碍细菌复制和转录,进而抑制细菌分裂繁殖,
8、以这种方式作用的主要是人工合成的抗生素喹诺酮类。第一章前言。????????????????????????????????????????????一
