欢迎来到天天文库
浏览记录
ID:12401412
大小:39.00 KB
页数:4页
时间:2018-07-16
《5毕业论文外文翻译》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、温州大学本科毕业论文乐清野生种群泥螺同工酶的生化遗传分析农业生物技术学报JournalofAgriculturalBiotechnology2007,15(2):242~246泥蚶能量代谢相关的同工酶的分析苏秀榕1吕振明1李太武1刘志明2钱锟3(1.宁波大学生命科学与生物工程学院,宁波315211;2.美国东新墨西哥大学生物学系,帕特鲁斯88130;3.美国旧金山大学生物学系,旧金山23430)摘要:利用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析了泥蚶(Tegillarcagranosa)能量代谢相关的10种同工酶。酯酶和α-淀粉酶是同能量吸收有关的酶,主
2、要分布于消化腺里。苹果酸脱氢酶、苹果酸酶、异柠檬酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶、醇脱氢酶、乳酸脱氢酶、6-磷酸葡萄糖脱氢酶和三磷酸腺苷激酶是与能量代谢相关的酶。泥蚶的能量供应有3种途径:有氧呼吸、无氧酵解和磷酸戊糖途径。从泥蚶体内含有很高活性的6-磷酸葡萄糖脱氢酶可知,磷酸戊糖途径是泥蚶糖代谢的主要途径,NADP为供能体。同其它贝类相比,泥蚶的三磷酸腺苷激酶的活性很低,这与它们的埋栖生活不活跃运动的习性是一致的。关键词:泥蚶;能量代谢;同工酶中图分类号:S185文献标识码:A文章编号:1006-1304(2007)02-0242-05有3类与能
3、量代谢有关的酶,它们分别参与有氧呼吸、无氧酵解和磷酸戊糖途径。泥蚶,亦称血蚶和蚶子,属于蚶科,泥蚶属,瓣鳃类,是中国四大传统水产养殖贝类之一(Wangetal.,1993)。泥蚶含丰富的蛋白质和维生素B12,口感良好,故大规模养殖于我国沿海地区。近年来,随着水产养殖面积的增加和农业的大规模发展,在沿海区域出现了一些泥蚶疾病,造成泥蚶产量大幅度减少(Lietal.,2003)。造成这种现象的可能原因,除了海洋环境的恶化及蚶科种质资源的退化外,能量代谢的失衡也是一主要原因。因此,应持续发展农业和人工繁育技术,进一步改善海洋的生态环境和泥蚶的
4、遗传质量,也有必要去探索海洋生物的生物能学,这将帮助我们研究这种生物的能量代谢问题。曾采用同工酶电泳技术对马来西亚半岛的6个地理种群的蜗牛进行了研究(Chohetal.,2006)。共研究了25种定居于沿海的蜗牛(软体动物门,腹足类)的4个高度多态性的同工酶位点(无机焦磷酸酶,肽酶及两个酯酶基因)(Mollusca,Gastropoda)(ZasavskayaandPudovkin,2005)。本文则采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对分布于各个组织的参与泥蚶生理活动及能量代谢的同工酶进行研究。本研究的最终目的就是为了探索该物种是如何进行能量吸
5、收、能量分布和能量代谢的。1材料与方法1.1材料采集由浙江省海水养殖研究所提供常见的泥蚶样品,将活体运回到实验室后立即对其进行解剖并分别取出外套膜、闭壳肌、鳃、足和消化腺等5种组织,分装并保存于-70℃冰箱中备用。-16-温州大学本科毕业论文乐清野生种群泥螺同工酶的生化遗传分析1.2样品制备对上述5种内脏器官分别进行精确称量。用蒸馏水清洗后,放入玻璃匀浆器,按1:3比例加入0.05%巯基乙醇为匀浆缓冲液,在冰浴中匀浆。于4℃,12000转/分离心30min。取上清液贮存于-70℃冰箱(Lietal.,2002)。1.3电泳采用聚丙烯酰胺
6、凝胶电泳技术(Huandwang,1985)分析组织中的同工酶。对电泳后的胶片染色并保存于7.5%醋酸。将凝胶置于凝胶电泳图像分析系统中进行分析。1.4同工酶的命名同工酶带按从负极到正极的方向进行命名(Wang,1996)。2结果2.1有关能量吸收的同工酶的表达2.1.1酯酶见图1-A,泥蚶的酯酶(EST)同工酶结构非常复杂,其在几乎所有被测定的组织中都有很高的活性,尤其是在消化腺。这种高活性的酯酶可能与消化腺的生理功能有关。2.1.2α-淀粉酶见图1-B,泥蚶的α-淀粉酶(α-AMY)同工酶在消化腺中有很高的活性,但在其他组织中没有发
7、现该酶的活性。α-淀粉酶的分布是与消化腺的生理功能相一致的。2.2同工酶表达与能量代谢2.2.1苹果酸脱氢酶图2所示的是苹果酸脱氢酶(MDH)同工酶在泥蚶不同组织中的表达情况。总体而言,苹果酸脱氢酶的活性在5个组织中均较高,但经更仔细的观察可知,苹果酸脱氢酶在消化腺、闭壳肌和足等组织中的活性相对更高,而在其它两个组织中表现出相对较低的活性。2.2.2苹果酸酶图3所示的是苹果酸酶(ME)同工酶在泥蚶不同组织中的表达情况。总体而言,苹果酸酶在消化腺和足部有更高的活性,同时在这两个组织中同工酶的谱带也更复杂些。2.2.3异柠檬酸脱氢酶图4所示
8、的是异柠檬酸脱氢酶(IDH)同工酶在泥蚶不同组织中的表达情况。异柠檬酸脱氢酶几乎在所有的组织中都有较高的活性,但在外套膜和鳃组织中的活性相对较低。2.2.4琥珀酸脱氢酶-16-温州大学本科毕业论文乐清野生种
此文档下载收益归作者所有