酪氨酸激酶受体eph亚族的研究进展

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1、酪氨酸激酶受体Eph亚族的研究进展摘要:酪氨酸激酶受体参与细胞生长、分化、胚胎发育及细胞内信号传递等过程，具有相当菪重要的生理功能，目前发现ヮ50多种RTK基因属于1谩4种亚簇，Eph亚族是其脒中最大的家族，由14具基因组成，一些基因主要在脑署的发育中表达，另一些在各鹆种组织中广泛表达，最近亚曜族胞外配体的发现为深入研稂究其生理功能打下基础，综淡述了Eph亚族成员的来源类、表达及其配体的研究概况梅。从细胞表面到细胞核的疆信号转途径是人们十分关心瑞并不断探索的热点。具有酪钹氨酸激酶活性的受体是外界刺激信息传递至细胞核，转旖化成细胞效应的信号通路的瀑关键组

2、成，参与细胞生长、衔增殖、转化及胚胎发育和肿暹瘤形成，具有重要的生理功┬能[1]。所有RTKs都穆是膜结合的Ⅰ型糖蛋白，其浓结构的共同特点是整个分子┮可分成三个结构区，即胞外的配体结合区，细胞内部具濂有酪氨酸激酶活性的功能区嘎和连接这两个区域的由疏水氨基酸组成的跨膜区，配体悼结合PTK胞外区域后使其沆构象发生变化引起受体在包怛膜上迁移、聚集，并形成寡镦聚化的受体-配体复合物，╄激活胞浆的酪氨酸激酶而活螅化，导致自身磷酸化及下游靥胞内底物蛋白质分子的酪氨钷酸磷酸化，启动不同信号途赍径将信号逐级传递[2]。痍RTKs研究发展速度非购常快，按其独特的结构特点

3、逞12/12，序列同源性及配体性质分拭类，就目前的报告统计至少绥已发现有50多个RTK基因分属于14个不同亚族，Eph是其中成员最多的家予族，约有14个基因组成。1Eph亚族受体的的结构埸与分类Eph亚族明显的谟结构特点[3]是它们的胞外配体结合区含一个免疫球财蛋白样重复序列，一个半胱瓿氨酸富含区，后面有两个F添NⅢ重复区；在胞浆酷氨酶阈区无激酶插入的序列阻断，咧由于核区氨基酸序列尤其在箩各受体亚族中高度保守，对萌这部分序列按氨基酸同源性哇分析的高低做为建立种系发生树的依据，从中可以得出隳各亚族成员关系[4]。同眵源性基因间序列同一性大于88%的

4、归于一种，从而将禀已克隆的40多个基因归于田14种，尽管Eph亚族在ㄌ结构上高度保守，但各成员同源性，表达分布与结合配功体各不相同，据此又可将其瘃分成EphA和EphBsubgroup.这几年来兵对Eph亚族的研究蓬勃发展，突出成就在于不断发现队和克隆新的成员及配体，证萦实Eph亚族的基因区域化殒表达与神经轴突束的组织趋杜化性发育途径有对应关系，从而与脑区的形态结构以及恍神经网络结构的形成密切相关。Eph亚族的命名[6]源自该亚族最早的成员治Eph，是Hirai用非米严谨杂交技术以vfps的狩酪氨酸激区序列为探针从人杆细胞癌细胞株cDNA文

5、库中克隆[3]。Eph基碡12/12因在进化上高度保守，用人リEphcDNA探针可从大铙鼠、鸡、小腹果蝇中检测到豇特异DNA带，人Eph基蚶因定位于7号染色体，编码澎Mrna,RNA印迹分析裉表达在大鼠肝、肺、肾有Mｎrna水平高表达，在小肠表达较低，在几种人肿瘤中缕，Eph表达高于相应正常血组织，但无基因扩增，且高砗表达的Eph基因体外使N勖IH3T3诱发裸鼠致瘤及能在软琼脂上形成克隆[4纫]。提示Eph高表达也许谡与肿瘤发生有关。Elk急(eph-like-kinase)Elk是该亚ㄟ族第二个成员，是用抗磷酸醚酪氨酸抗体从大鼠的脑cD浙NA文库中

6、克隆[7]，它蹁的表达与eph不同，仅大鼠脑中检测到ElkmRN浯A，在小肠中表达较少，l羸wase[8]通过RNAり印迹分析表明Elk在14至16d大鼠胚胎胃中表达瓦高，至18d及新生鼠中表幔达非常低，在成年鼠胃中没侏有检测到Elk表达，在3颥例人胃癌组织中发现有2例盥Elk的mRNA表达水平几倍高于正常胃组织，推测Elk也许在人胃癌中起一饕定作用。Eck(epi飓thelial-cell-kinase)Eck媒是该亚族第三个发现并克隆呆全长cDNA的成员，来源卅于人角化细胞cDNA文库，并由此得名，它广泛表达与上皮来源细胞中[9]，县其在

7、大鼠肺、皮肤、小肠和醉卵巢及上皮性细胞系高表达阵，在肾、脑，脾等有低水平表达，eck是该亚族成员被发现有酪氨酸激酶活性的12/12第一个基因，用免疫沉淀方甍法以抗Trpe融合蛋白，万并将免疫复合物进行体外激锎酶实验，对磷酸化蛋白进行舷磷酸氨基酸分析，确证了其剧磷酸化主要是在酪氨酸上。服Heks(humane┄ph-like-kina笮ses)Heks(Hek4,5,7,8,11)鬈[10]。是从人胚脑cD钨NA文库中用PCR和5’卵RACE方法克隆出来的一煮组基因，采用的是根据该亚舻族高度保守的胞内催化功能卞域WTAPEAI和VCK霉VSDFG基序

8、而设计合成水，氨基酸同源性分析表明h忸ek4与cek4(99%Π)