高效液相色谱法测定人血中氢溴酸右美沙芬浓度

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1、高效液相色谱法测定人血中氢溴酸右美沙芬浓度【摘要】目的研究氢溴酸右美沙芬在健康志愿者体内的血药浓度。方法采用高效液相色谱法测定8例健康受试者口服右美沙芬糖浆和片剂后不同时间血浆中的美沙芬浓度。结果右美沙芬在5~500ng/ml浓度范围内呈良好线性关系(r=0．9965)。结论本法精密，准确，可用于氢溴酸右美沙芬的药动学研究。�【关键词】氢溴酸右美沙芬；血药浓度；高效液相色谱法��ContentdeterminationofdextromethorphanhydrobromideinhumanplasmabyHPLCLIANGFa-Hua,HE

2、Rui-xing.RenminHospitalofLuoding,GuangdongLuoding527200,China�【Abstract】ObjectiveTostudytheconcentrationofdextromethorphanhydrobromideinhumanplasma.MethodsAnoraldoesoftabletsandsyrupweregiventoeighthealthyvolunteersinarandomizedcrossoverdesign,respectively.thedrug5concentra

3、tionsweredeterminedbytheHPLC.ResultsThedextromethorphanhydrobromidewasagoodlinear,withinaconcentrationrangeof5~500ng/ml,r=0．9965.ConclusionThemethodisaccurateandprecise，itisusableforthestudyofclinicaldextromethorphanhydrobromidepharmacokinetics.�【Keywords】Dextromethorphan;P

4、lasmaconcentration;HPLC氢溴酸右美沙芬(dextromethorphanhydrobromide,DM)是一种中枢性镇咳药，其作用机制是通过阻断咳嗽中枢反射以提高中枢神经系统咳嗽阈值而起镇咳作用,其作用与磷酸可待因相当,但无可待因的镇痛和镇静作用,无成瘾性，治疗剂量不会抑制呼吸中枢和呼吸道黏膜分泌,临床应用镇咳效果显著,不良反应发生率低,临床应用极为安全，具有服用剂量少而镇咳效果好的优点，临床上广泛应用[1]。本实验通过采用HPLC法测定DM在8例正常人体内的血药浓度，进而对DM糖浆和片剂的生物利用度作出评价。现报告如下

5、。�1仪器与试药�日本Waters高效液相色谱仪，Ubondpakphenyl色谱柱，电子分析天平，旋涡混合器，电动振荡器，离心机等；乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯；DM标准品，瑞士罗氏药厂生产；DM糖浆，广东罗定制药有限公司生产；每105ml含DM15mg，DM片剂，广州光华药业有限公司生产，每1片含DM15mg。�2实验方法与结果�2．1色谱条件Ubondpakphenyl色谱柱，流动相：10mm磷酸氢二钾缓冲液�∶�乙腈(55�∶�45，pH4．0)；检测波长：220nm；流速1．0ml/min。�2．2标准曲线制作与回收率测定准确称

6、取氢溴酸右美沙芬标准品25mg，置25ml量瓶中，加蒸馏水使溶解并稀释至刻度，摇匀，配成浓度为1mg/ml的标准品溶液，再将其稀释成1μg/ml，分别吸取5、10、25、50、75、100、200、300、400、500μl，加入1ml人新鲜空白血浆中，混匀，配成浓度为5~500ng/ml的右美沙芬标准血浆溶液。�准确称取地平泮标准品25mg，置25ml量瓶中，加甲醇溶解后加水稀释至刻度，配成浓度为1mg/ml的安定标准品溶液，同样将其稀释成1μg/ml，作为内标液。上述各浓度氢溴酸右美沙芬标准血浆溶液均加入100μl内标液，混匀，然后加入正

7、己烷�∶�正丁醇(10�∶�1)混合溶剂6ml和0．1NNaOH溶液0．5ml,水平振荡20min后,离心10min,将上层有机溶液吸入试管中,加入0．1NHCL溶液200μl,水平振荡20min后,离心15min,下层酸液100μl用于HPLC进样分析,吸取205μl，按上述色谱条件分析，根据测得的美沙芬和内标色谱峰高算出峰高比。以美沙芬浓度为横坐标，峰高比为纵坐标，绘制标准曲线,得回归方程：Y=0．0128X+0．0276，r=0．9965。�吸取上述各浓度经提取处理后氢溴酸右美沙芬标准血浆溶液和氢溴酸右美沙芬标准水溶液同时进样分析进行比

8、较,求得美沙芬在血浆中的提取回收率为92．6%(n=15)。�2．3方法重现性选择10、50、100、300ng/ml四个浓度的氢溴酸右美沙芬标准血浆溶液,在同1天