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1、HPLC法测定何首乌中二苯乙烯苷含量[摘要]目的:建立高效液相色谱法(HPLC)测定何首乌中二苯乙烯苷含量的方法。方法:采用高效液相色谱法(HPLC),以十八烷基硅烷键合相硅胶为固定相(4.6mm×250mm,5μm),色谱纯乙腈-水(25∶75),检测波长325nm,流速为1.0ml/min,色谱柱柱温30℃,测定何首乌中主要成分二苯乙烯苷的含量。结果:何首乌中二苯乙烯苷进样量在0.200～4.000μg范围内,与峰面积呈良好的线性关系,其回归方程为Y=152.92X+45.67(r=0.9997);平均回收率为99.96%。结论:该方法操作简单、方便
2、、准确、重复性好,用于测量二苯乙烯苷的含量可信度高。[关键词]何首乌;二苯乙烯苷;高效液相色谱法;含量测定[中图分类号]R283[文献标识码]B[文章编号]1674-4721(2010)06(c)-041-02HPLCDeterminationofstilbeneglucosideinpolygonummultiflorumcontentdeterminationofcontentof2,3,5,4’-tetrahydroxystilbene-O-β-D-glucosideinradixpolygonimultifloriSULijie6(Chinese
3、MedicineHospitalofXiangtanCity,HunanProvince,Xiangtan411100,China)[Abstract]Objective:Toestablishamethodforthedeterminationof2,3,5,4’-tetrahydroxystilbene-O-β-D-glucosideinradixpolygonimultifloribyHPLC.Methods:TheconditionofHPLCwasKromasiLC18column(octadecylsilanreversedbondedpha
4、se,4.6mm×250mm,5μm),mobilephaseofchromatographicpurityacetonitrile:water(25:75)andUVdectorat325nm.Theflowratewas1.0ml/minandthecolumntemperaturewas30℃.Results:Themethodprovedtobelinearintherangeat0.200-4.000μgwithcorrelationcoefficientof0.9997.ThelinearformulawasY=152.92X+45.67.T
5、heaveragerecoveryandrecisionwere99.96%.Conclusion:ThemethodissimpLe,accurate,andcanbeaeffectivemethodtocontrolthequality.[Keywords]Radixpolygonimultiflori;2,3,5,4’-tetrahydroxystilbene-O-β-D-glucoside;HPLC;Assessment何首乌为蓼科植物何首乌(polygonummultiflorum6thunb)的干燥块根,具有补肝肾、益精血、乌须发、壮筋骨、解
6、毒、消痛、润肠通便之功效[1]。何首乌中二苯乙烯苷类成分在抗衰老、抗老年痴呆、增强机体免疫、造血和改善心血管功能等方面有许多独到之处[2]。本文采用高效液相色谱法,对二苯乙烯苷类的含量测定进行了方法学方面的考察试验。该方法操作简单、方便、重复性好,用于测定含量可信度高,效果满意。1仪器与试剂1.1仪器Waters高效液相色谱仪;Empower色谱工作站;KromasiLC18反相柱(4.6mm×250mm,5μm);纯水器。1.2试剂纯水,溶剂均为分析纯;流动相为色谱纯,2,3,5,4-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品,简称二苯乙烯苷,购于
7、中国药品生物制品检定所。1.3试验材料何首乌药材干粉碎过60目筛,于60°C干燥至恒重后置干燥器中备用。1.4高效液相色谱条件色谱柱:KromasiLC18反相柱;流动相色谱纯乙腈-水(25∶75),流速1.0ml/min:色谱柱柱温30℃;紫外检测波长325nm,理论板数按二苯乙烯苷计算应不低于26000[3],与其他组分均能达到较好的分离。进样体积:10μl。此条件下,二苯乙烯苷的保留时间为6.857min(图1)。1.5溶液的制备1.5.1对照品溶液的制备精密称取干燥至恒重的二苯乙烯苷对照品10.00mg置50ml棕色容量瓶中,加色谱纯甲醇溶解,定
8、容至刻度,摇匀,制成每1毫升含0.2mg的溶液,即得浓度为200μg/ml的二苯
