婴儿下呼吸道感染肺炎克雷伯菌耐药性研究

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1、婴儿下呼吸道感染肺炎克雷伯菌耐药性研究肺炎克雷伯菌是儿童下呼吸道感染的常见病原菌之一，正常时寄生于咽部、呼吸道、肠道。近年来，随着广谱抗生素在临床的大量应用，由该菌感染引起的医院感染和耐药率呈上升趋势。超广谱β-内酰胺酶(ES-BLs)是肺炎克雷伯菌对多种抗生素耐药率不断升高的主要原因。我们收集本院近2年婴儿下呼吸道感染标本分离的肺炎克雷伯菌，对其耐药性和ESBLs情况进行分析，以期为临床合理使用抗生素提供参考。1　资料与方法1.1　标本来源2006年10月―2008年12月，我院收住下呼吸道感染婴儿232例，均符合第7版诸福棠编著

2、《实用儿科学》肺炎诊断标准。患儿入院当天，禁食2h后，用一次性封闭吸痰管负压吸抽喉深部痰液及分泌物留取标本，置于无菌痰液收集器中送检，进行细菌培养、分离和药敏分析。1周内同一患者的相同菌株标本不重复药敏鉴定。1.2　菌株鉴定分离菌株用法国梅里埃ATB细菌自动鉴定仪与ID-32E鉴定系统鉴定菌种。61.3　药敏试验采用K-B纸片法，药敏纸片由美国OXOID公司提供。方法与结果判读参照CLSI文件M100-S18(ISBNI-56238-625-5)；大肠埃希菌ATCC25922为质控菌株。1.4　ESBLs检测表型确证试验(纸片扩散法

3、)：将菌液制成0.5麦氏单位，均匀涂布在M-H琼脂，贴上头孢他啶(30μg)、头孢他定/克拉维酸(30μg/10μg)、头胞噻肟(30μg)和头胞噻肟/克拉维酸(30μg/10μg)4种药敏纸片，置(35±2)℃培养16～20h观察结果，2个药物中的任何一个在加克拉维酸后，其抑菌环直径与不加克拉维酸的抑菌环相比增大值≥5mm时，判定为产ESBLs。肺炎克雷伯菌ATCC(r)7006030为阳性质控菌株，大肠埃希菌ATCC(r)25922作阴性对照。1.5　治疗病初经验联合用药，后根据药物敏感试验结果及时调整选用敏感抗生素。2　结果2

4、.1　肺炎克雷伯菌的药物敏感性6从232件痰标本中共分离出致病菌190株，其中肺炎克雷伯菌52株，占27.37％。52株肺炎克雷伯菌除对亚胺培南、美罗培南外的18种抗生素均有不同程度的耐药，对青霉素类高度耐药，对第1代、第2代、第3代及第4代头孢霉素呈不同程度的耐药。耐药力由高到低的抗生素前5位依次是头孢噻吩、头孢噻肟、头孢呋辛、头孢他啶、头孢吡肟。52株肺炎克雷伯菌20种抗生素体外药敏试验结果见表1。2.2　产ESBLs肺炎克雷伯茵的检出及其药物敏感性52株肺炎克雷伯菌中共检出产ESBLs25株，占48.08％，产ESBLs株对所

5、测试β-内酰胺酶类、氨基糖甙类、喹诺酮类及复方新诺明药物敏感性均低于非产ESBLs株，但对亚胺培南、美罗培南的敏感性均较高。肺炎克雷伯菌产ESBLs株和非产ESBLs株对20种抗生素的耐药率见表2。3　讨论6肺炎克雷伯菌为革兰阴性杆菌，常寄殖于人体上呼吸道和肠道，是重要的条件致病菌之一，婴儿由于免疫力弱，可引起较严重的感染，甚至败血症。随着广谱抗生素的大量应用，其耐药性日趋严重，因此，抗生素的合理选择尤为重要。由于儿童免疫系统、肝肾发育尚未完善，以及抗生素的毒副作用，使儿童用药范围受限，临床上多采用β-内酰胺类药物作为下呼吸道感染的

6、首选，肺炎克雷伯菌对β-内酰胺类抗生素耐药率的升高，与近年来大量使用该类药物有关。本组资料显示，肺炎克雷伯菌对β-内酰胺类药物包括青霉素类(不含加酶抑制剂的复合制剂)、头孢菌素类高度耐药，其中对阿莫西林、替卡西林全部耐药，哌拉西林耐药率为65.38％，对第1代、第2代、第3代及第4代头孢霉索呈不同程度的耐药。耐药率由高到低的抗生素前5位依次为头孢噻吩、头孢噻肟、头孢呋辛、头孢他啶、头孢吡肟。对头孢噻吩、头孢呋辛、头孢噻肟的敏感率分别只有30.78％、30.78％、28.85％，已不宜作为下呼吸道感染的经验用药。除亚胺培南、美罗培南外

7、，哌拉西林一他唑巴坦的敏感率为82.7％，可作为肺炎克雷伯菌感染的经验治疗用药。6ESBLs最常见于肺炎克雷伯杆菌和大肠埃希菌，是由于β-内酰胺酶基因突变后产生的，可水解青霉素类和头孢菌素类抗生素的超广谱酶，不水解头霉素类、碳青酶稀类抗生素，常由质粒介导，可通过多种方式在细菌间传播，易引发流行，同时由于ESBLs质粒常常携带对其他抗生素的耐药基因，如ESBLs编码质粒可以携带氨基糖苷类、喹诺酮类等抗生素的耐药基因，因而产ESBLs菌株多表现为多重耐药。ESBLs菌株的感染给临床抗菌治疗带来极大的挑战。本组资料52株肺炎克雷伯菌中，产

8、ESBLs菌株25株，占48.08％，高于杭州地区华春珍报道的42.6％及台州地区徐加勤报道的31.30％。产ESBLs菌株的耐药率显著高于非产ESBLs菌株。产ES-BLs菌株对阿莫西林、替卡西林、哌拉西林、头孢噻吩、头孢呋辛、头孢