前言 血液标本采集和血涂片制备

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1、血液一般检验主讲人：王新华前言血液标本采集和血涂片制备重点：血标本采集方法和血涂片制备技术难点：各种抗凝剂的优缺点和使用选择第一节血液标本采集和抗凝剂选择血标本：全血：血细胞+血浆;临床血液学检查，血细胞计数、分类和形态学检查血浆：全血除去血细胞；血浆病理性和生理性化学成分的测定，内分泌激素、凝血因子（钙除外）、血栓和止血检查血清：离体后血液自然凝固后析出的液体成分（除纤维蛋白原等凝血因子）；临床化学和临床免疫学检查，可见血浆与血清的主要区别是，血清中不含纤维蛋白原。一、采血方法静脉采血法部位：主要是肘静脉。还可以在：手背、内踝、股静脉，幼儿可采用颈外静脉采血采血器材：一次性注射器采

2、血步骤和注意事项：止血带压迫时间不能过长；注射器和容器必须干燥采血步骤选择适宜静脉，在臂扎上压脉带，于穿刺处皮肤由内而外环形消毒。让病人握拳，使静脉显露。左手拇指固定穿刺部位下端，右手持注射器，使针尖斜面和针筒刻度向上，先以约30o角度沿静脉正面进针，穿过皮肤刺人静脉腔。见回血后，右手固定注射器，用左手缓缓抽出注射器针栓，至所需血量后，解除压脉带，放松拳头，以消毒棉签压住穿刺孔，拔出针头。静脉采血法注意事项1.注射器和盛血器皿清洁干燥2.注射器与针头紧密衔接，不漏气，针尖不带钩3.使针尖斜面和针筒刻度向上4.抽血时只能外抽不能内推，以免形成气栓5.采血前，消除病人恐惧心理部位：WHO推

3、荐中指或无名指尖内侧为宜，耳垂采血受温度影响大；半岁以下拇指或足部，特殊人员视情况而定。所用器材：采血针、吸管采血步骤及注意事项：避免交叉应严格实行一人一针制；穿刺的深度的适当，切忌用力挤压，以免混入组织液，影响检验结果。用消毒干棉球擦去第一滴血，以后流出的血液可以使用。皮肤采血法（毛细血管采血法）部位：主要是肘静脉。采血器材：真空采血装置，头套式、头皮静脉式两种真空采血法（负压采血法）采血步骤及注意事项：利用真空贮血管中的负压原理，自动定量的将血液引入贮血管内；瓶塞穿刺针外具有止血护套，使用时请勿将其取下；采集血样后，针对有输液要求的患者，医务人员可将软座与输液器相接进行输液，减少病

4、人的静脉穿刺次数；一次性使用，用后销毁。既有利于标本的收集运送和保存，又便于防止血液交叉感染，已开始在国内推广使用。方法学评价静脉采血皮肤采血真空采血缺点不同抗凝剂的使用，限制了重复实验；价格高改变血液性质，影易于溶血、凝血响有形成分的形态;和可混入组织液环境污染优点标本代表性大，无价廉、快速、操作减少溶血，操组织液影响，适于简便，标本可直接作规范，防止临床研究，可重复测定交叉感染，保实验和追加其他实护环境验质量控制患者：活动情况、精神状态、药物、年龄、性别标本采集等采血：操作规范溶血：采集、转移、保管、分离血标本处理：立即送检实验结果分析：药物、饮食的影响；密切结合临床二、抗凝剂选择

5、抗凝：用物理或化学方法除去或抑制血液中的某些凝血因子的活性，以阻止血液凝固抗凝剂：能够阻止血液凝固的物质，称抗凝剂乙二胺四乙酸（EDTA）盐抗凝原理：螯合钙离子使用方法：15g/L浓度EDTA和血液1：10适用范围：血细胞形态、血小板计数。但影响血小板聚集和白细胞吞噬功能所以不适合做凝血象检验及血小板功能试验草酸盐（sodiumoxalate）草酸钠、草酸钾、草酸铵原理：草酸盐可与血中钙离子生成草酸钙沉淀，从而阻止血液凝固使用方法：草酸钠0.1mol/L和血液1：9适用范围：凝血象检查肝素（heparin）原理：低浓度时抑制因子Ⅸa、Ⅷ和PF3之间的作用，加强抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）灭活

6、丝氨酸蛋白酶，从而阻止凝血酶形成,还能抑制凝血酶的自我催化及抑制因子Ⅹ的作用；高浓度时阻断凝血酶和纤维蛋白的反应适用方法：1g/L浓度的肝素钠与血液1：10优点：抗凝能力强、不影响血细胞体积、不易溶血、能耐高温适用范围：红细胞检验（红细胞计数、血红蛋白测定、红细胞比积）和多种生化分析枸橼酸盐（枸橼酸三钠）原理：螯合钙离子使用方法：配成109mmol/L的浓度和血液1：9106mmol/L的浓度和血液1：4适用范围：止血学检验、血沉、输血保养液（毒性小）物理方法抗凝脱纤维蛋白：将血液注入有玻璃珠的器皿中，转动，纤维蛋白缠绕凝固于玻璃球，从而防止血成凝块。适用于免疫学检验和红斑性狼疮细胞检

7、查。血液的贮存1.血液标本检验前的预处理分离血清或血浆预温血浆或血清分离细胞冷藏保存:血浆在4℃保存24h后，某些凝血因子活性减少95%。供血细胞分析仪使用的EDTA-k2抗凝全血应保存于室温，但不宜超过8h，如果在4℃保存可使血小板计数结果减低。冷冻保存:要长时间保存血液中有活性的成分如凝血因子、酶类等，可采取分离血清或血浆后快速深低温冷冻的方式，冷冻的标本一般应避免反复冻融。根据检验项目要求有些血液标本要求避光、隔绝空气等,如血液SB（标准