紫外可见分光光度法测定维生素b12含量

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1、紫外可见分光光度法测定维生素B12含量作者:作者：靳月琴郭丽敏宋建荣杨金香刘海林陈文斌    作者单位：长治医学院化学综合实验室(046000)【摘要】 目的：探讨维生素B12片剂中维生素B12的含量测定方法。方法：紫外可见分光光度法。样品以标准曲线法为测定含量依据，在361nm的波长处测定吸光度。结果：维生素B12在5μg/mL～100μg/mL浓度范围线性关系良好。回归方程Y=0.0193X+0.048,r=0.9937。结论：测定的5个不同批号样品其含量均在标示范围之内,该方法简便、准确、灵敏度高。【关键词】 紫外可见分光光度法；维

2、生素B12片剂；含量测定　　TheContentMeasurementofV-B12byUV-Vis　　JinYueqin,GuoLimin，ShongJianrong,etal.　　DepartmentofChemistryComplexLaboratoryofChangzhiMedicalCollege　　Abstract Objective：ThemeasurementmethodofV-B12contentintabletisestablished.Methods：UV-VisTheabsorptionismeasuredat36

3、1nmaccordingtocalibrationcarvemethod.Results：Thelinearrangeisin5μg/mL～100μg/mLandtheregressionequationisY=0.0193X+0.048,r=0.9937.Conclusion：Themeasurementisdonein5kindoflotnumberandtheresultindicatethattheV-B12contentintabletcorrespondswithstandardrange.Thismethodissimple

4、,accurateandhighsensitivity.   　　Keywords UV-Vis；V-B12tablet；Contentmeasurement　　维生素有机药物B12是含钴的有机药物，为深红色结晶，又称为红色维生素B12或氰钴胺，是唯一含有主要矿物质的维生素。测定维生素B12片剂含量的传统方法是运用紫外可见分光光度计，以吸光系数法为测定含量依据，但是该方法对仪器精密度要求较高。标准曲线法是紫外可见分光光度法中最经典的方法，若认定一台仪器，固定其工作状态和测定条件，则该方法可消除因仪器而产生的一些误差，且操作简便易行［1］。

5、本文利用紫外可见分光光度计，建立了维生素B12片剂含量测定的标准曲线法，并利用该方法对山西亨瑞达制药有限公司生产的维生素B12片剂的5个不同批号进行了V-B12的含量测定，方法准确、简便、重复性好。　　1 仪器与试药　　1.1 仪器   　　754型紫外可见分光光度计（上海光谱仪器有限公司）。　　1.2 试药   　　维生素B12对照品（中国药品生物制品检定所）；维生素B12片剂（山西亨瑞达制药有限公司，批号060801，060701，061002，060902，070303）。0.8滤膜［AUTOMATICSCIENCE（TIANJIN

6、）INSTRUMENTCO；LTD］。　　2 方法与结果　　2.1 测定波长的选择   　　维生素B12吸收光谱上有三个吸收峰：278nm、361nm、550nm。维生素B12在361nm的吸收峰干扰因素少，吸收又最强，中国药典规定以361nm处吸收峰的比吸光系数E1%1cm值（207）为计算含量依据［2］。本实验选择361nm为测定波长，以标准曲线法为计算含量依据。　　2.2 溶液的制备　　2.2.1 对照品溶液的制备［3］：精密称定对照品维生素B120.0025g，置于25mL容量瓶中，加水至刻度，摇匀。将溶解后的溶液放置冰箱中冷藏备

7、用。　　2.2.2 供试品溶液的制备：维生素B12片剂为糖衣片，取本品50片，除去糖衣，使其呈现粉红色，研细，精密称定研磨样品，约相当于维生素B121.25mg(每片的标示量为25.0μg),置50mL容量瓶中，加水35mL，充分振摇30min使其溶解，加水稀释至刻度，密塞，再用力振摇10min，静置，取上清液，用0.8μm的微孔滤膜滤过，滤液放置冰箱中冷藏备用。　　2.3 线性关系     　　标准曲线的绘制：精取2.2.1项下的储备液，用水分别按1.5、2、4、6、8、10、15、20倍稀释，摇匀。在361nm波长处测定吸光度，结果见

8、表1。　　表1 100μg/mL标准品稀释倍数测定结果（略）　　以吸光度A与质量浓度c绘制标准曲线，得回归方程Y=0.0193X+0.048,r=0.9937。结果表明维生素B12对照品溶液在