实验诊断学实验指导

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1、实验诊断学实验指导兰州大学第一医院实验诊断教研室实习的目的与要求：一、实习目的通过实习学习有关检验的操作方法，熟悉和了解其基本技术，以便进一步理解课堂讲授的内容，达到理论联系实际的目的。二、实验室守则1、准时参加实习，进实验室时必须穿好白大衣，遵守课堂纪律注意保持实验室的整齐与安静。2、实验前，将学习手册加以预习。实习开始，仔细听取讲解，认真观察示范操作及示教标本，先明了实验原理和操作步骤后再操作。3、实验过程中要认真操作，仔细观察并联系有关理论进行思考，注意检验数据的准确性和严谨性。4、爱护仪器，节约试剂，用前检查，用

2、后清点，损坏时要登记赔偿。5、注意安全，凡病人标本均应视为有传染性，应防止污染自己及他人每次实习课后认真洗刷实验用具，并轮流搞好实验室的清洁卫生。6、认真作好实验记录，正确地书写实验报告并于每次实习后交给辅导教师。实验成绩共20分（每次实验3分，提问2分），直接加到期末考试成绩中（卷面成绩满分80分）。目录第一单元血液一般检查………………………………………第二单元尿及粪便常规检查……………………………………第三单元浆膜腔穿刺液与脊髓液检查………………………….第四单元检验报告单的阅读及分析…………………………….第一单元

3、血液一般检查一、红细胞计数(redbloodcellcount)[要求]掌握末梢采血技术，熟悉细胞计数板的结构及用法，进行红细胞计数，并记住参考值、临床意义。[原理]一定量的血液，经一定量的等渗性溶液稀释后，充入血细胞计数室中，于显微镜下计数一定体积内的红细胞，并求得每升血液内的红细胞数。．[仪器试剂]1、血细胞计数板，为一特制的长方形硬质玻璃板，中间l／3部分具有“H”形槽沟，横槽沟上下的平台部分各深0.1mm，成为二个计数台(池)，每台有一个计数区域，分为9个大方格，每一个大方格的面积为lmm2，四角的每个大方格又划

4、分为16个中方格，供白细胞计数用。中央的一个大方格用双线划分为25个中方格，每中方格又划分为16个小方格，共为400个小方格，供红细胞计数用。计数台之上覆以特制的盖片(厚度0.4mm、表面平直、质地较硬)后构成计数室。每个大方格的体格是0.1mm3(1mm×lmm×0.1mm)，参阅图1，2及3。2、容量准确的微量吸管(具有10ul及20ul刻度)3、红细胞稀释液(Hayem稀释液)氯化钠1.0ɡ硫酸钠(Na2S04·10H20)5.0ɡ氯化高汞5.0ɡ蒸馏水加至200ml过滤后备用此稀释液为等渗性溶液，比重较大，使红细

5、胞易于悬浮，并有防腐作用。4、光学显微微5、消毒、穿刺用具为75％酒精棉球、干棉球、消毒刺血针。[方法]1、准确加红细胞稀释2m1于一中号试管中，塞紧管口，并拭净血细胞计数板及盖玻片。2、用75％酒精棉球消毒被检人左手无名指尖侧腹部。3、待酒精挥发后．由左手捏紧取血部位，以右手持消毒穿刺针快速速人约2~3mm深。拭去第一滴血后，用微量吸管准确吸血到l0ul处，拭去管尖外余血，将吸管插到稀释液中迅速地把血液放出，并用上清液洗净吸管内残存血液，立即轻轻振荡混匀，用消毒干棉球按压穿刺伤口。4、进一步混匀红细胞悬液，然后用尖吸管

6、吸取数滴(或用细玻璃棒醮取一滴，充入计数室内准备计数。充细胞悬液时应防止产生气泡，要一次充好，液量多少适宜。水平位静置2~3min待细胞沉下。5、用低倍镜找出红细胞计数区域。计数中央大方格中的四个角和中心的五个中方格内的红细胞。凡在中方格双线上的红细胞按压左侧及上侧线者计入。6、将5个中方格内红细胞数×5×10×200×106=5个中方内红细胞数×1010=红细胞数／L，报告方式：Δ、ΔΔ×1012/L上式中×5表示把5个中方格内红细胞数折算为1个大方格的红细胞。×10表示把1个大方格容积(0．1u1)折算为lul。×2

7、00表血液稀释倍数。×106表示将ul换算为L。Δ、ΔΔ×1012表示将红细胞数以小数点前保留1位数字乘以1012形式报告。如数得红细胞为450个则报告为4.5×1012／L。[注意事项]1、取血部位的皮肤必须正常，2、一人一针，防止交叉感染。3、微量吸管的容量必须准确，内腔一定要干燥，4、取血动作必须迅速。若作血红蛋白和红细胞计数两项时，应先取红细胞计数的标本，后取血红蛋白测定的标本。5、充液之前务必充分混匀，否则因久置而红细胞下沉，导致计数值错误地偏低。6、一般于低倍镜下计数即可。为区别异物或残渣，将可疑目标置低倍镜

8、视野中心，然后转高倍镜观察。7、白血病患者，其白细胞明显增多时，则应进行校正，8、高球蛋白血症病人，其血液加稀释液后，迅速出现颗粒状浑浊，高汞将球。此时可换用生理盐水作稀释液，及时计数。9、含高效价冷凝集素的病人，当血加入稀释液之后，应事先将红细胞稀释液管加温后再放入血液或将红细胞悬液管置温箱内待冷凝现象消失后再迅速