医学论文-凝血及纤溶实验室检验的进展及临床应用

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1、现代血小板凝血纤溶功能检查及临床应用【目的】凝血功能检测目前已广泛用于临床，如血液病，抗凝药剂用量的检测，手术前和产前等的诊断和治疗，作用越来越大，其检测方法也越来越先进，从传统的手工法发展到全自动血凝议的检测，使得凝血功能检测变得越来越简便，快速，准确。但在检测功能的全过程中，检测结果会受到很多因素的影响，除了患者的精神状态，标本的采集，抗凝剂与检测的试剂盒等等以外，目前又发现体外循环（CPB）也会导致凝血功能紊乱，这就要求我们除了具备先进的检验设备还要继续探索了解CPB后真实的凝血状态，分析抑肽酶的血液保护机制。【关键词】血小板血液凝固；实验室检验；临床应用机体的止

2、血功能是由血小板、凝血系统、纤溶系统和血管内皮系统等的共同作用来完成的。过去我们曾用出血时间作为止血功能缺陷的筛检试验，但因其操作标准化程度不高，敏感性不好，且无法反映凝血因子的含量及活性，故目前已为凝血功能检查所取代。凝血功能检查主要包括血浆凝血酶原时间（PT）及由PT计算得到的PT活动度、国际标准化比值（INR），纤维蛋白原（FIB），活化部分凝血活酶时间（APTT）和血浆凝血酶时间（TT）。　　　　　　　　　　　　　　　【关键词】血小板血液凝固；实验室检验；临床应用　　血液凝固实质就是血浆中的可溶性纤维蛋白原转变不溶性的纤维蛋白的过程。是指使血液由流动状态变成不能

3、流动的凝胶状态的过程，是一个复杂的生理生化代谢过程，其实质是通过一系列酶促反应，使血浆中呈液态的纤维蛋白原转变成固态的纤维蛋白丝，因而凝血是属于生理生物化学范畴的课题，涉及血液学、分子生物学和免疫学等诸多领域［1］。由于这些相关学科研究的日益深入，不断地给凝血的理论和实践注入新的内容，因此，在测定方法学上也由过去精密度低的方法过渡到精密度高的方法。　　1　实验室检验的进展　　凝血及纤溶检测项目越来越多，实验方法大体分为筛选试验和确证试验两部分。从方法学上又可分为功能测定、免疫学测定和化学测定三大类［2］。功能测定，即传统的最终以出现纤维蛋白作为判断依据的方法，如凝血酶原

4、时间、活化的部分凝血活酶时间、凝血酶时间，以及用各种缺乏因子血浆测定某一凝血因子含量的方法等，方法古老，但仍是目前主要采用的方法。当前用于常规工作的各种型号的自动化凝血仪的主要功能也属此类。PT测定是检测凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ的过筛试验，要用统一标有国际敏感指数ISI的凝血活酶试剂，在抗凝治疗监控和决定用药剂量时，一定要用国际标准化比率报告。免疫学测定是近年来发展最快的检测方法，其原理是以纯化的被检物质为抗原，制备相应的抗体，然后用抗原抗体反应原理对被检物质进行定性或定量测定［3］。其方法采用ELISA、胶乳微粒凝集、火箭电泳等方法。对许多新发现的抗凝因子，纤溶和纤溶抑

5、制因子，纤维蛋白原裂解，纤维蛋白原和纤维蛋白降解，凝血酶原活化等过程中被切下的小肽，基本上都用免疫学方法检测。从理论上讲，免疫学测定不可能全部取代功能测定［4］。因为免疫学测定的仅是该因子的抗原性，只能表明体内存在该因子，但却不能说明其是否有生物活性，而功能测定则是测该因子在凝血或纤溶中的生理生化功能［5］。化学测定的理论根据是：许多凝血、抗凝及纤溶因子本身是水解酶，可以用人工合成含有该酶酶切位点并带有色原(指示剂)的寡肽作为底物，用常规的生化比色法加以测定［6］。国内外已有一些合成的底物用于测定，诸如ATⅢ、凝血酶、FIX、FXA，以及纤溶酶等等。凝血与纤溶检验，关键

6、在于诊断试剂，以往大量凝血检测试剂由于各实验室自行制备，手工操作难以达到规定的质量标准和全国、全球标准化，也难以达到室内、室间质控的要求。为此WHO和ICSH的血栓和止血委员会制定了一些标准或提供少数统一的标准品供各国校准各种试剂和方法。目前国外凝血检测大部分已用自动化仪器测定，绝大部分试剂都有质量较高的商品供应。纤维蛋白溶解系统是人体最重要的抗凝系统，由4种主要部分组成：纤溶酶原激活剂、纤溶酶、纤溶酶抑制物［7］。当纤维蛋白凝结块形成时，在Tpa(链激酶或组织型纤溶酶原活化物)的存在下，纤溶酶原激活转化为纤溶酶，纤维蛋白溶解过程开始，纤溶酶降解纤维蛋白凝结块形成各种可

7、溶片段，形成纤维蛋白产物(FDP)，FDP由下列物质：X寡聚体、D二聚体、中间片段、片段E组成［8］。其中，X寡聚体和D聚体均含D二聚体单位。人体纤溶系统，它对保持血管壁的正常通透性，维持血液的流动状态和组织修复起着重要作用。D二聚体血浆中水平增高说明存在继发性纤溶过程，而先生凝血酶，后又有纤溶系活化，并且也反映在血栓形成的局部纤溶酶活性或浓度超过血浆0.2%—抗纤溶酶活性或浓度。溶栓治疗是指用药物来活化纤维蛋白溶解系统［9］，一般为投入一种纤溶酶原活化物如尿液酶、链激酶或组织型纤溶酶原活化物(tpA)，使大量纤溶