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1、HaNPV多角体蛋白在宿主不同组织中的时相性表达zL,;～7应用与环境生暂1999,5(2):203—2o7C.,.押f.Blr.B.1999-04-25HaNPV多角体蛋白在宿主不同组织中的时相性表达/旦U蔡秀玉(中国科学瞎动暂研究所北京t00~0)*摘要应用亲朝爱脏过穗层析对多角体蛋白多克睦抗血清进行纯化,薰程过氧化暂尊进行标记,用于ELISA法检樱I中脑,血{I}巴,脂时体中的多角体蛋白的吉量变化结果:中脑在摩染24b吉量最高.48b量低.72h较48h略有升高.96h和120h与72b基车保持一致:血{I}巴在感染48b古量量^,然后下降至96h.
2、120b卫横有升高:唐肪体在感染72h开始增加.直至120b.三种组织中多角.}I蛋白古量变化并不同步占L寰选的时相性着.与N的感染对程基奉一致.睁中脑至血砬再翻脂肪排免疫电幢麓寨表明,感染72b的中脑.在胞浆中音威的多角体蛋白此时已转运强鲴睢柱中美t谰檀塑多角体病毒(N吖);多角体蛋白中蛋涪分粪号O∞943'-.-.一09653中脑;血淋巴;唐肪体j咏TIMECOUIE0FHaNPVPOLYHEDRINEXP]匿ESS10NINDⅡ重RENT.r1SSUESoFHoSTSUNGuoz'LIrl,DINGCui&CAIXiuyu(n帆知撕y,'k搿
3、eAmdemy&.BeijinBIO(3080)AhstractThePol如,-i血a丑岫6edbyinilyclmmmtognq~y帅usedinF_JJSAbmonitorthedevelopmenlofpolyhedrln.IlwasdemonsU~ed岫inthemldgutthep血c'∞mmestimatedtObethe岫嘲at24h如№NPvinoeu~n,theat48handre=a~.1at^出levelat72,96end120h;thepolyp.~enlxatiollinlhe1.emoIy砒n.dthehi炯leve
4、lat48h妇i丑0c,thende曲96handinoreased~Iightiyat120h;theineree~ebeganat72h如血∞andoonth~ledtOinexea~岫棚120ha8found.mthefatb0dy.pB∞曲,theuIIyIIc.咐cha日髑ofP0n~~enh-afoainthethree鲫l祷tested咖oons~tentwiththeIm~eesNPVinfection:thevlrolns州Leclinthenucleithemid蛐cells,thenenteredintothehea~oood曲帆be
5、sementmt*.andfimtliyinfectedthefatbody.Immtmoeleemmmi口∞pIu如iBc咖dthateoIdc1懵w帅.bseIvedbo山inthe哪.山帅themmleus吐72hafter帆,-gEe咄tpolyhedrinBylI【h雹巴dinthecyto~beIra~itedtOthe硼ld叫.KeywnrdspolyIIedrla;exla'ession;mldgul;hemolymph;f~dy;删dear—ed曲iB(NP)用EusA涪检畏I杆状病毒抗原,前人世过许多工作,怛检测样品多局限于病虫的血淋巴
6、或病虫的匀浆渍在生态学和流行病学研究中,这样的检测无疑是实用,快速的.怛过毕竟不能真实地反腱出抗厚在虫体各组织●中的表达情况.了解一次感染组织,病毒粒子复翩的主要场所——中肠细胞和二次感组织,多角体形成的主要场所——脂肪体细胞中病毒抗原物质的表选.对于理解病毒在虫体内的复制,增殖,体内播散途径等.是有裨益的.本文的目的是用}hNPV多角体蛋白抗体检测其抗原在中肠,血淋巴和赭肪体中的含量变化,以了解收稿日期:1998-04-27接受日期:1998,-06?18"九五攻关礓日(96一∞5—0l一09一∞)部分费曲及农业生害置害综台皓理国采重点实齄宣簧助.t应用
7、与环境生物5卷HaNPV在宿主体内的感染复制情况I材料与方法1.1材料1I.I虫种棉斡虫由中国科学院动物研究所昆虫生态宣吴坤君研究员提供.均为室内人工饲科饲养传代.饲养温度(0)为26℃±J℃.?1I.2HaRTVHaNPv为本实验室分离提供.饲养的棉斡虫中挑选虫赞一致的健康个体,用配成一定浓度的HaNPv悬液感染幼虫增殖病毒.收集感染病毒而死的幼虫怡
8、成匀浆,3层纱布过滤.滤灌经差速离心,蔗糖密度梯度离心(p=450g.L-.一600gL..),纯化的多角体经冷冻干燥,于口一20℃保存备用.1.2方法J.2.I多体量白的分离地化纯化的多角体配成IO异/L
9、悬灌,(070~C保温2h,以灭括碱性蛋白醇,用终浓度0.05mo
