尿液蛋白质、葡萄糖与酮体检测

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1、尿液蛋白质、葡萄糖与酮体检测长沙医学院临检教研室陈丽华目的要求掌握：尿蛋白、尿糖定性试验和尿酮体Rothera改良法。熟悉：尿蛋白形成机制与分类、尿蛋白测定的质量控制。了解：尿酮体的产生。重点：尿蛋白、尿糖定性试验和尿酮体Rothera改良法。难点：质量控制肾单位是肾的基本功能单位，由肾小体和肾小管组成。肾单位与集合管共同完成泌尿功能。肾单位示意图肾小球滤过膜有筛孔屏障和电荷屏障。葡萄糖可完全滤过，白蛋白难于滤过。肾小球滤过膜示意图影响肾小球滤过的因素：①肾小球毛细血管血压。②囊内压。③血浆胶体渗透压。④肾血流量。近

2、球小管重吸收葡萄糖示意图重吸收葡萄糖的部位仅限于近球小管。近球小管重吸收葡萄糖有一定的限度。正常情况下葡萄糖被全部重吸收入血。NaG脂肪酸乙酰辅酶A乙酰乙酸丙酮β羟丁酸酮体在肝细胞中的生成β羟丁酸乙酰乙酸乙酰乙酰CoA丙酮自肺、肾排出乙酰CoA酮体的氧化示意图酮体肝内生成肝外利用尿液蛋白质检查一、概述1.历史：1673年，弗雷德里克.德克斯(FrederickDekkers)用加热醋酸酸化尿液方法测定尿液中的蛋白。1790年，弗兰西斯.贺母（FancisHome）用硝酸法检测水肿患者尿液中的蛋白。1827年，理查德.

3、伯瑞特（RichardBright）用加热的方法检测肾病患者尿液中的蛋白2.正常尿蛋白的含量和组成：尿蛋白总量为30~130mg/24h，一次随机尿为0~80mg/L。蛋白定性试验：阴性。主要成分是相对分子质量小的蛋白如β2微球蛋白、α2微球蛋白、溶菌酶等。3.蛋白尿：尿蛋白总量超过150mg/24h或100mg/L，蛋白定性试验：阳性。二、病理性蛋白尿分类及原因1、肾小球性蛋白尿：最常见（1）选择性蛋白尿：当肾小球损伤较轻时,以4－9万的相对分子质量中等的清蛋白为主，可伴抗凝血酶、转铁蛋白、糖蛋白及少量小相对分子质

4、量的β2－M、Fc片断等。Pro:+++-++++.Pro大于3.5g/24h.最典型的是肾病综合症。（2）非选择性蛋白尿反映肾小球毛细血管壁有严重破裂损伤。以分子量较大和中等的蛋白质同时存在为主，Pro：＋－＋＋＋＋。定量0.5~3g/L。多见于原发或继发肾小球疾病。2.肾小管性蛋白尿:感染、中毒引起。小分子蛋白质尿，Pro：＋－＋＋。定量1~2g/L。常见于肾小管疾病。3、混合性蛋白尿：肾小管和肾小球同时损伤，大中小Pro均增多。4、溢出性蛋白尿：指血液循环中，出现了以中、小相对分子质量为主的异常蛋白质，如：游离

5、Hb、肌红蛋白、溶菌酶、本周蛋白等增多，经肾小球滤出，超过了肾小管的重吸收最大能力，而大量出现在尿中。Pro：＋—＋＋。常见于MM。5、组织性蛋白尿：肾组织代谢产生、组织破坏分解的、炎症或药物刺激泌尿系统分泌的蛋白质等。Pro：±－＋；多为T－H糖蛋白三、生理性蛋白尿1.功能性蛋白尿：剧烈运动、发热、寒冷刺激、精神紧张、交感神经兴奋等，多见与青少年。2.体位性蛋白尿：又称直立性蛋白尿，特点：卧位时尿蛋白阴性，起床活动或久立后，尿蛋白阳性，平卧后又阴性。多见于发育期少年。3.偶然性蛋白尿：又称假性蛋白尿，混入多量血液、

6、脓液、粘液或生殖系统分泌物，如：白带、月经血、精液、前列腺液等。尿蛋白血浆蛋白组织蛋白肾小球性肾小管性混合性溢出性组织性泌尿系统、泌尿外系统肾病综合征、肾病性蛋白尿原发、继发肾小球疾病肾小管间质病变、中毒性肾病浆细胞病、血管内溶血、肌肉损伤肾脏疾病、炎症、中毒、泌尿道结石泌尿道、生殖道炎症、出血、排泌物污染四、蛋白质定性检测方法（一）加热乙酸法1.原理：①加热煮沸使蛋白变性、凝固，②然后加酸使尿液pH接近尿蛋白质等电点，在含有适量无机盐状况下，蛋白质更易于变性沉淀。③加酸还可溶解因加热析出的磷酸盐或碳酸盐结晶所致的混

7、浊。2、材料：酒精灯、试管、试管夹、滴管3、试剂：５％醋酸（一）加热乙酸法4.操作：（1）取大试管1支，用试管夹夹住管底部，加尿液至试管2/3处。（2）斜持试管下端，在酒精灯上加热下1/3处，煮沸即止。（3）加5%乙酸2~3滴，再煮沸后立即观察结果。（4）结果判断如下：实验结果结果判断相当含量（g/L）清晰透明无-0改变黑色背景下，±0.1~0.15极轻度混浊明显白色雾状，+0.2~0.5但无颗粒明显混浊，++0.6~2.0出现颗粒大量絮状沉淀+++2.0~5.0但无凝块严重混浊，++++＞5.0有大凝块5.注意事项

8、（1）操作程序要对：加热加酸再加热。（2）加入醋酸量要适当，pH>9或pH<3可以产生假阴性。（3）加热时使底部受热，上部好作对照。（4）加热时管口勿对别人。加尿液1ml判断结果（二）磺基水杨酸法1.原理：在酸性条件下，磺基水杨酸的阴离子和蛋白质氨基酸阳离子结合，形成不溶性蛋白盐沉淀。2.操作：加尿液1ml加磺硫酸2滴1分钟内判断结果同加热乙酸