三叶因子蛋白毕业论文

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1、学号：2008xxxxxxx潍坊医学院本科生毕业论文（设计）题目：三叶因子蛋白在毕赤酵母GS115中高效表达姓名xxx专业xxx年级、班级2008级部、系(院)xxxxx指导教师姓名专业技术职务xxx副教授2012年6月4日潍坊医学院本科生毕业论文（设计）诚信声明本人声明：所呈交的毕业论文（设计）是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，论文中引用他人的文献、数据、图件、资料均已作明确标注，论文中的结论和结果为本人独立完成，真实可靠，不包含他人成果及为获得潍坊医学院或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。

2、与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。论文作者签名：日期：年月日潍坊医学院本科生毕业论文(设计)版权使用授权书本毕业论文作者完全了解潍坊医学院有关保留、使用毕业论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权潍坊医学院可以将本毕业论文全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本毕业论文。本人离校后发表或使用该毕业论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时，署名单位仍然为潍坊医学院

3、。论文作者签名：日期：年月日指导教师签名：日期：年月日目录中文摘要…………………………………………………………………………………1英文摘要…………………………………………………………………………………21引言……………………………………………………………………………………32材料……………………………………………………………………………………42.1材料…………………………………………………………………………………42.2主要仪器……………………………………………………………………………53方法……………………

4、………………………………………………………………63.1构建重组质粒………………………………………………………………………63.2工程菌株在试管中的培养…………………………………………………………63.3诱导培养……………………………………………………………………………63.4SDS-PAGE电泳检测重组蛋白……………………………………………………73.5筛选高效表达菌株　…………………………………………………………………84结果……………………………………………………………………………………94.1三叶因子蛋

5、白表达菌株的筛选……………………………………………………94.2三叶因子蛋白的诱导表达…………………………………………………………95讨论……………………………………………………………………………………116结论…………………………………………………………………………………13参考文献………………………………………………………………………………14附图表…………………………………………………………………………………15综述……………………………………………………………………………………17致谢………………………

6、……………………………………………………………21摘要目的：三叶因子蛋白在巴斯德毕赤酵母菌株GS115中摇瓶培养并甲醇诱导表达，筛选出三叶因子蛋白高效表达的菌株。方法：以pPICZα为载体，构建三叶因子蛋白真核表达质粒，经SacI线性化后电转化毕赤酵母GS115感受态细胞，涂布MD平板，得到70个转化子。分别接种到试管中恒温摇动培养24h，再接种到摇瓶BMGY培养基中振荡培养36h，最后转接到BMMY培养基，诱导培养96h，分别在培养24h、48h、72h和96h四个时间点补加甲醇进行诱导表达，SDS-PAGE

7、电泳检测目的蛋白表达情况，从而筛选出三叶因子蛋白高效表达的菌株。筛选出的工程菌株经上述方法诱导培养，摸索三叶因子蛋白在毕赤酵母GS115诱导表达的最适时间。结果：离心培养液，收集上清进行SDS-PAGE电泳，电泳图谱上能清楚的看到目的蛋白表达条带。结论：三叶因子蛋白在巴斯德毕赤酵母菌株GS115获得高效表达。并筛选出高效表达三叶因子蛋白的工程菌株，为对三叶因子蛋白进一步功能研究奠定了基础。关键词：巴斯德毕赤酵母菌株GS115；三叶因子蛋白；甲醇；SDS-PAGE电泳。21AbstractObjective:Tr

8、efoilfactorproteininPichiapastorisyeaststrainGS115shakeflasksandmethanolinduction,screeningouthigh-levelexpressionoftrefoilfactorproteinstrains.Methods:TopPICZαtrefoilfactorproteineukaryoticexpr