上海交通大学致远学院2015年春季学期

《上海交通大学致远学院2015年春季学期》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、上海交通大学　致远学院　2015年春季学期《生物学实验（2）》课程教学说明一.课程基本信息1．开课学院（系）：致远学院2．课程名称：《生物学实验（2）》学时/学分：64学时/4.0学分3．先修课程：生物化学4．上课时间：星期五12:55-17:40(2-15周)5．上课地点：生物药学楼4-3186．任课教师：郑有丽zylji@sjtu.edu.cn7．办公室及电话：生物药学楼4-316，021-342040978．助教：××××××（姓名+邮箱）10.Officehour：正常上班时间二.课程主要内容（中英文）教学内容及供参考的学时要求。实验一实验认知准备及接种实验5学时【目的与要求】1

2、．了解实验室基本常识；2.了解生物学实验（2）整体安排，学会全局设计安排实验工作。3.学会无菌操作、学会平板划线接种技术实验二大肠杆菌培养和构建4学时【目的与要求】1．学会挑单克隆，接种培养细菌2．构建质粒，基因克隆技术实验三原位PCR扩增目的DNA片段及琼脂糖凝胶电泳鉴定6学时【目的与要求】1.了解PCR的原理，掌握PCR操作方法。2.了解琼脂糖凝胶电泳原理及掌握平板电泳操作技术。实验四目的基因与质粒载体连接转化5学时1.掌握基因克隆技术32.掌握质粒载体体外连接转化操作实验五阳性重组子的鉴定——质粒抽提和酶切电泳鉴定5学时【目的与要求】1.掌握碱裂解法分离纯化质粒DNA。2.了解限制

3、性内切酶酶切原理。实验六蛋白实验接种活化、诱导表达浓度4学时【目的与要求】1.蛋白实验全局设计安排实验工作。2.了解重组蛋白表达的方法和意义3.掌握活化甘油菌、液体接种。实验七重组蛋白的诱导表达，收集裂解菌体6学时【目的与要求】1.了解重组蛋白在表达载体中的表达及控制方法2.掌握分光光度计的原理及操作方法3.学会使用高速离心机实验八重组蛋白的分离、纯化、SDS--聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定10学时【目的与要求】1.掌握Ni-NTA树脂变性亲和纯化蛋白方法2.学习聚丙烯酰胺凝胶电泳原理。3.掌握聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳的操作技术。一.课程教学进度安排（中英文）教学内容教学形式第2周实验认知准备

4、及接种实验实验教学第3周大肠杆菌培养和构建实验教学第4周原位PCR扩增目的DNA片段及琼脂糖凝胶电泳鉴定实验教学第5周目的基因与质粒载体连接转化实验教学第6周阳性重组子的鉴定——实验教学3质粒抽提和酶切电泳鉴定第7周蛋白实验接种活化、诱导表达浓度实验教学第8周重组蛋白的诱导表达，收集裂解菌体实验教学第10周重组蛋白的分离、纯化、SDS--聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定实验教学一.课程考核方式及说明实验预习讨论、实验操作、实验报告、出勤纪律卫生二.教材与参考书1、讲义：《BiochemistryExperiment》.2、«生物化学实验（二版）»丛峰松主编上海交通大学出版社2013.13