脑益康对阿尔茨海默病大鼠中枢胆碱能系统酶的影响论文

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1、脑益康对阿尔茨海默病大鼠中枢胆碱能系统酶的影响论文耿劲松，周爱玲，胡亚娥，朱燕，茅家慧，施海燕【摘要】目的观察中药复方脑益康对阿尔茨海默病（Alzheimer'sdisease,AD）大鼠中枢胆碱能系统的保护作用。方法采用脑立体定位仪自双侧基底前脑Meynert核（nucleusbasalisofMeynert,NBM）注射鹅膏蕈氨酸（Ibotenicacid,IBO）建立AD大鼠模型，分别给予不同剂量脑益康对AD大鼠进行治疗，测定不同组实验大鼠脑组织乙酰胆碱酯酶（acetylcholinester

2、ase,AChE）、丁酰胆碱酯酶（butyrocholinesterase,BuChE）活性及胆碱乙酰转移酶（cholineacetyltransferase,ChAT）在基底前脑的表达。结果脑益康能抑制脑组织AChE和BuChE的活性；改善基底前脑ChAT阳性神经细胞形态并增加其数量。结论脑益康通过促进ChAT表达.freelinratser'sdisease(AD).MethodsBilateralinfusionsofIbotenicacid(IBO)intonucleusbasalisofM

3、eynert(NBM)usingstereotaxicapparatusodelofAD.NYKatdifferentdosagehasbeenadministeredtoADrats.Theactivitiesofbrainacetylcholinesterase(AChE)andbutyrocholinesterase(BuChE)asorphologyofcholineacetyltransferase(ChAT)-positivecellsinthebasalforebrainproveth

4、emorphologyandincreasethenumberofChAT-positivecellsasaybeabletoincreasethesynthesisofacetylcholine(ACh)throughelevatingtheexpressionofChAT,inhibitthedegradationofAChbyinhibitingtheactivitiesofAChEandBuChE,thuselevatingthelevelofAChinrats'brainandimprov

5、etheabilityoflearningandmemory.Keyer'sdisease;Acetylcholinesterase;Butyrocholinesterase;Cholineacetyltransferase阿尔茨海默病（AD）是发生在老年前期或老年期，与年龄相关的神经系统退行性疾病。AD的发病机制极其复杂，病因学尚不清楚，且无特效治疗或逆转疾病进展的药物，其病理生理机制及防治研究是近年来神经科学领域的研究热点之一。祖国传统中医药理论对AD有独到的认识，认为AD属中医学“呆证”“善忘

6、”等病的范畴。中药复方脑益康由制首乌、知母、石菖蒲等组成。制首乌是祖国医学中一种古老的用于延年益寿、益脑调心的药物；中药知母能显著上调脑M1-毒蕈碱型乙酰胆碱受体密度，且上调的幅度和改善记忆之间存在明显的正相关［1］；石菖蒲有改善记忆、扩张血管、降压等作用。脑益康有效成分多，药理作用广泛，可以多层次、多靶点地发挥治疗作用。本实验采用自大鼠双侧基底前脑Mey核（NBM）注射鹅膏蕈氨酸（IBO）建立AD动物模型，生物化学方法检测皮层乙酰胆碱酯酶（AChE）和丁酰胆碱酯酶（BuChE）活性，免疫组织化学方

7、法观察基底前脑胆碱乙酰转移酶（ChAT）阳性神经细胞形态，为临床应用脑益康治疗AD，促进中枢胆碱能神经功能的恢复提供充分的理论依据。1器材与方法1.1材料1.1.1动物SPF级SD雄性大鼠60只，体质量(230±10)g，由南通大学实验动物中心提供，动物合格证号：SYXK（苏）2002-0022。1.1.2药品与试剂实验所用中药复方脑益康(NaoYikang，NYK)由南通市中医院制剂室制成颗粒剂，每克颗粒剂含生药1.98g；脑复康（吡拉西坦片，南京白敬宇制药厂）；IBO（Sigma-Aldrich

8、）；山羊抗ChAT一抗（美国Chemicon，批号：0510012059）；AChE及BuChE测定试剂盒（南京建成生物工程研究所）；二抗免疫组化染色及DAB试剂盒（北京中杉金桥生物技术有限公司）。1.1.3仪器大鼠脑立体定位仪、注射泵及微量注射器（美国Stoelting公司）；Y-型迷宫刺激器（张家港市三兴教学机械厂）；XHF-1高速分散器（上海金达生化仪器厂）；754型紫外可见分光光度计（上海光谱仪器有限公司）；冰冻切片机（LAICACM1900，德国）；数码相机