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1、蛹虫草治疗腺嘌呤致大鼠慢性肾功能衰竭的研究论文侯阿澧，刘艳，孟庆繁，冯云，朱凯，滕利荣【摘要】目的讨论蛹虫草及其提取物对大鼠慢性肾衰竭的作用。方法采用饲喂腺嘌呤诱导大鼠慢性肾衰(CRF)模型，观察比较了空白组、阴性对照组、阳性对照组和蛹虫草子实体组CRF模型大鼠血尿素氮、肌酐、24h尿量、尿蛋白量，以及肾组织病理变化。结果蛹虫草子实体.freelinlitarisanditsextractonratCRF.MethodsTheratchronicrenalfailure(CRF)modelindu
2、cedbyfeedingadenineountofemictioneansofparingtheblankcontrol,negativecontrol,positivecontrolinlitarisstromaofCRFrats.ResultsTheexperimentalresultsdemonstratedthattheCordycepsminlitarisstromacouldnotonlyobviouslyreducebloodureanitrogenandcreatininebuta
3、lsoalleviatethepathologicallesion,especiallyitspolysaccharide.ConclusionTheCordycepsminlitarisstromaanditspolysaccharidehaveprominenteffectsontheprocessofratCRF.Keyinlitaris;Polysaccharide慢性肾功能衰竭是多种原发和继发性肾脏病变持续进展的共同结果，为常见肾脏疾病，严重危害人类健康和生命。目前尚缺少积极有效的治疗方
4、法［1］。冬虫夏草治疗该病疗效显著,但药源少,亟需有效替代药品。蛹虫草Cordycepsminlitaris与天然冬虫夏草同属异种，亲缘关系较近,特别是其子实体形态,主要化学成分以及很多药理作用相同［2］。蛹虫草对于生长环境的要求较低,液体发酵可形成菌丝体,人工大规模固体培养可获得子座。研究表明,.freelg/kg体重给予0.75%的腺嘌呤饲料,每日定时投放,自由摄取,正常饮水,经过4周,行眼底静脉丛采血,进行血清肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）检查,模型组Scr（88.53±6.98）μmo
5、1/L,BUN（29.39±5.43）mmo1/L,A组Scr（40.33±4.17）μmo1/L,BUN（8.99±3.71）mmo1/L。检验结果证明造模成功，按Scr高低随机分成6组,阴性对照（B）组10只,阳性对照（C）组10只,虫草混悬液高剂量（D）组10只,虫草混悬液低剂量（E）组10只,虫草水提液（F）组10只,虫草多糖（G）组10只。分组及给药情况见表1。2.2蛹虫草混悬液的配制冷藏干燥蛹虫草子实体干燥,粉碎,研磨过80目筛，收集粉末,用蒸馏水配制1g/5ml浓度的混悬液。2.3蛹
6、虫草水提液的制备冷藏干燥蛹虫草子实体干燥,粉碎,精确称量20g，加入300ml蒸馏水中,微沸状态，回流提取3h,6000r/min离心20min，取上清液,浓缩至100ml，所得浅棕褐色液体即蛹虫草子实体水提液。2.4蛹虫草多糖溶液的制备取冷藏干燥的蛹虫草子实体,精确称量20g,粉碎后分别以甲醇和醋酸乙酯各回流3h脱除有色物质及脂溶性成分,离心收集沉淀,挥发干燥。加入300ml蒸馏水中,微沸状态,回流提取3h，6000r/min离心20min,取上清液,浓缩至100ml,加入四倍体积无水乙醇，使之
7、终浓度为80%,静置沉淀过夜。6000r/min离心20min,收集沉淀,待乙醇充分挥发之后,溶于50ml蒸馏水中,Sevag法除蛋白，蒸馏水透析过夜,浓缩至20ml,所得深棕褐色液体即蛹虫草子实体多糖溶液［3］。2.5尿毒清混悬液配制尿毒清颗粒剂给药前用蒸馏水配成0.5g/ml的混悬液。2.6慢性肾衰大鼠的治疗治疗方法采用灌胃给药,灌胃量及每日生药量如表1,治疗4周后结束。2.7指标检测大鼠治疗4周,末次灌胃后,禁食不禁水收集24h尿液,测尿蛋白量,眼底静脉丛取血,利用生化分析仪测定血清中尿素氮
8、（BUN）,肌酐（Scr）等肾功能指标［4］。表1大鼠分组给药情况（略）2.8肾脏病理改变及病理积分的计算［5］大鼠处死后解剖观察（见图1），取肾称重，用10%甲醛溶液固定,常规石蜡包埋,切片,做HE染色,进行病理组织学观察。参照Purkerson等对肾小球病变组织学的分级标准,分为5个等级：0级，Ⅰ级，Ⅱ级，Ⅲ级，Ⅳ级。每张切片连续观察50个肾小球,并分别归入上述5个等级,计算各个等级肾小球所占的比例。病理积分为各级病变肾小球所占的百分比乘以相应级数之和。3结果3.1一般情况空白
