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1、口腔癌患者外周血树突状细胞的生物学特性论文张素欣，王士杰，单保恩，段玉芹，许艳枝【关键词】口腔肿瘤;树突状细胞;表型；增殖Biologicalcharacteristicsofmonocytederiveddendriticcellsfromperipheralbloodofpatientsa【Abstract】AIM:Toinvestigatethemorphology,phenotypeandfunctionsofdendriticcell(DC)fromperipheralbloodofthehealt
2、hyindividualsandthepatientsa.METHODS:FifteenpatientsaatstagesofIIoraboveorphologicalchangeoftheculturedcellsicroscopyandelectronmicroscopy.TheexpressionsofCD83,CD1a,CD86,CD80,HLADRetry.TheabilityofDCtostimulatetheproliferationoflymphocyteinmixedlymphocytere
3、actions(MLR)inedethodofMTT.RESULTS:MorphologicallyandphenotypicallytypicalDCthepatientshealthyvolunteers(P0.05).TheDCfromthepatientshadtheloeanfluorescenceintensityofCD83,CD1a,CD80,CD86andHLADRexpressedinstudygroupthecontrolgroup(P0.05).Inaddition,DCfromthe
4、studygrouphadtheabilitytostimulatetheproliferationofallogeneicandautogenouslymphocytesinvitro.CONCLUSION:MonocytesinperipheralbloodofthepatientsacanbeinducedtodifferentiateintomatureDCulatetheproliferationoflymphocytes,andsotheseDCmightbeusedinimmunotherapy
5、fororalcarcinoma.【Keyouthneoplasms;dendriticcell;phenotyping;proliferation【摘要】目的:研究口腔癌患者外周血树突状细胞(DC)的形态、表型和功能性变化及其临床意义.方法：口腔癌患者（实验组）及正常人（对照组）15例外周血单个核细胞经GMCSF,IL4及TNFα诱导培养,获取成熟DC,光镜和电镜观察细胞的形态，流式细胞仪检测细胞表型如CD1a,CD83,CD80,CD86和HLADR等分子的表达变化，用噻唑蓝（MTT）法检测DC与自体和同
6、种异体的混合淋巴细胞反应（MLR）中对淋巴细胞增殖的刺激能力.结果：正常人及口腔癌患者的外周血单个核细胞经体外7d诱导培养.freel清除病灶，而且手术本身造成的面部畸形严重破坏了患者的口腔功能和心理健康.因此，如何缩小手术范围、有效控制临近亚病灶及微小病灶的发展是亟待解决的问题.树突状细胞（dendriticcells,DC）是已知功能最强的抗原提呈细胞，并被认为是抗肿瘤免疫治疗的一种非常有前途的方法［1-3］，由于DC对T细胞的活化受MHC限制，故临床应用的DC细胞及其疫苗必须使用肿瘤患者自身来源的DC，
7、那么从肿瘤患者的外周血单个核细胞中能否经过体外诱导产生出功能性DC，口腔癌患者与健康人DC细胞的表型及其抗原提呈分子的表达以及刺激淋巴细胞增殖能力有何不同，因此本研究旨在为临床以DC为基础的免疫治疗提供实验依据.1材料和方法1.1材料RPMI培养基(HycloneUSA),淋巴细胞分离液(上海恒生公司),重组人单核巨噬细胞集落刺激因子(rhGMCSF),重组人白细胞介素4(rhIL4),肿瘤坏死因子α(TNFα)均使用美国PeprotechAsia公司产品.取200505/200510来我院口腔科住院治疗的口
8、腔癌患者15例作为实验组，本组病例均经术后病理证实；对照组为健康志愿者15例.两组人员均排除感染、糖尿病、血液病和自身免疫性疾病.1.2方法无菌采集外周血50mL，肝素钠抗凝.加入等量无钙镁DHanks缓冲液（pH7.4），充分混匀.取50mL离心管加入Ficoll淋巴细胞分离液20mL后，再沿壁小心加入上述稀释的外周血20mL，2000r/min，20min离心，分离外周血单个核细胞.小心吸取中间
