吗啡通过突触前机制抑制视上核神经元兴奋性突触传递论文

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1、吗啡通过突触前机制抑制视上核神经元兴奋性突触传递论文.freelEPSCs（miniatureEPSCs）的影响.结果20μmolL-1的吗啡可分别使大鼠视上核神经元的EPSCs的频率下降65%，幅度减少44%，mEPSCs频率下降45%，幅度减少12%.结论吗啡通过突触前机制抑制视上核神经元突触前兴奋性递质的传递.KeyissionAbstract:AIMToobservetheeffectsofmorphineontheexcitatorypostsynapticcurrents（EPSCs）andminiatureEP-SCs（mEPSCs）inratsupraopticnucleu

2、s（SON）neuronsandtodetermineitssynapticmechanism.METHODSUsingprecordingtechniqueinbrainslices.freelEPSCsofratSONneuronsolL-1morphinedecreasedthefrequencyofEPSCsandmEPSCs（EPSCsby65%，mEP-SCsby45%），anddecreasedtheamplitudeofEPSCsby44%inallSONneurons，buthadnoeffectontheamplitudedistri-butionofmEPSCs.CO

3、NCLUSIONMorphineinhibitstheexcitatorytransmissionsviapresynapticmechanismsinSONneuronsfromratbrainslices.0引言视上核（supraopticnucleus，SON）内分泌大细胞主要通过体液途径来调控机体的内平衡和自主功能.当受到应激、吸吮、渗透压改变以及其他生理刺激时，视上核神经元就会释放催产素或（和）加压素入血以及其在脑干边缘系统的投射区域［1，2］，在激素释放过程中视上核神经元的放电模式起了决定性作用，而放电模式主要由视上核神经元内在膜特性和突触输入的综合作用调控［3］.阿片是一种重

4、要的神经调质，能抑制视上核神经元的内分泌活动.阿片的这种抑制作用主要通过直接抑制视上核神经元来实现，但在许多脑区阿片还能通过抑制突触递质的释放从而影响突触后神经元的电学特性［4］.在视上核，阿片是否也能通过抑制突触前递质的释放来影响内分泌大细胞的电活动，尚没有明确结论，本实验采用脑片膜片钳全细胞记录方法研究吗啡对视上核神经元兴奋性突触传递的影响.1材料和方法1.1材料成年SD雄性大鼠，体质量约250g，由本校实验动物中心提供.蔗糖ACSF的成分为（mmolL-1）:蔗糖250，KCl2.5，CaCl22，Mg-SO42，NaH2PO41.25，NaHCO225.ACSF的成分为（mmolL

5、-1）:NaCl125，KCl3，CaCl22，Mg-SO42，NaH2PO41.25，NaHCO225，葡萄糖10.蔗糖ACSF电极内液的成分（mmolL-1）:K-Glu-conate140，MgCl22，Hepes10，ATP2，KOH调pH为7.2.bicuculline、盐酸吗啡（morphine），-QX，APV，naloxone和TTX（Sigma产品）在实验前溶解于ACSF.1.2方法1.2.1脑薄片的制备大鼠经ip氯胺酮（100mgkg-1）麻醉后，使用0～4℃经950mLL-1O2和50mLL-1CO2饱和的蔗糖人工脑脊液（artificialcere-brospina

6、lfluid，ACSF）进行心脏灌流，然后断头并迅速取脑，快速置于冰冷的0～4℃经950mLL-1O2和50mLL-1CO2饱和的蔗糖人工脑脊液中.待脑完全冷却后，对视上核所在脑区进行修块，然后在震动切片机（CampdenInstruments，USA）上制备厚度约为300μm的含视上核的水平下丘脑脑片，并置于26℃的持续充以950mLL-1O2和50mLL-1CO2的ACSF中孵育.1.2.2实验记录脑片在26℃的ACSF中孵育至少2h，待脑片恢复后移至记录槽，用尼龙网及U形铂丝框加以固定，并以1～2mLmin-1的速度灌流26℃的充以950mLL-1O2和50mLL-1CO2的AS-C

7、F.在解剖镜（×15）下根据大鼠脑定位图谱分辨视上核，采用“盲插”方法进行全细胞记录.玻璃微电极由PP-83电极拉制器（日本Narishige公司）拉制，尖端开口约2μm，充以电极内液.封接前微电极阻抗为3～7MΩ，封接电阻为2～6GΩ，串联电阻在20MΩ以下.在形成全细胞记录方式后，单细胞的生物电信号经膜片钳放大器Axopatch200A放大，并由Digi-Data1200板进行A/D转换后，输入计算机，由软件包Pcl