卡维地洛抗动脉粥样硬化作用的研究论文

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1、卡维地洛抗动脉粥样硬化作用的研究论文【摘要】目的探讨卡维地洛在动脉粥样硬化病变中的抗氧化作用及其对增殖细胞核抗原（PA）及核因子kappaBp65（NFκBp65）活化的影响。方法雄性新西兰大耳白兔24只，随机分为正常组、高脂组、卡维地洛组，每组8只，共计喂养10周。实验结束后，酶法检测各组家兔的血清三酰甘油及胆固醇，黄嘌呤氧化法检测血清超氧化物歧化酶（SOD），硫代巴比妥酸比色法检测丙二醛（MDA）,并采用免疫组化的方法测定血管壁PA及NFκBp65的表达。结果高脂组和卡维地洛组血清三酰甘油和胆固醇较正常组明显升高（F=146.25、287.83,q=14.76～20.75,P0.01）

2、，而该两组间差别无统计学意义（q=0.53、0.59,P0.05）。高脂组较正常组SOD明显降低.freelaleNelydividedintothreegroups:normalgroup,highfatdietgroupandcavediloltreatedgroup,ent,thelevelsofserumtriglycerideandcholesteroleasuredbyenzymaticmethod,ofserumSODbyxanthineoxidativetechnique,.freelMDAbythiobarbituricacidmethod.Expressionoft

3、hePCANandNFκBp65inthevascularmunohistochemically.Resultsparedalrabbits,thelevelsofserumtriglycerideandcholesterolofthehighfatdietandcavediloltreatedelyhigh（F=146.25，287.83；q=14.76-20.75；P0.01),butnostatisticaldifferenceSODandhighlevelserumMDAalgroup,andMDAalgroup（F=21.65，75.64;q=4.98-24.29;P0.0

4、1）.TheexpressionofPAandNFκBp65inhighfatdietgrouparkedlyincreasedasparedalgroup;buttheexpressionightrelievethelipidperoxidationinjuryandblockNFκBactivationsoastoinhibittheproliferationofsmoothmusclecells.［KEYDA）试剂盒购自南京建成生物工程研究所；PA和NFκBp65及相关SP试剂盒购自武汉博士德生物工程研究所。1.2主要仪器上海精密仪器厂721型分光光度计，美国Lambert公司石蜡

5、切片机，日本Olympus公司显微照相装置，德国欧波同公司VIDAS21图像分析系统。1.3实验动物分组健康雄性新西兰大耳白兔24只（购于华中科技大学同济医学院实验动物学部，合格证号：医动字第19025号），体质量（2.50±0.25）kg，分笼饲养，随机分为正常组、高脂组、卡维地洛组，每组8只。1.4模型的制备及药物干预家兔适应性喂养1周后，高脂组和卡维地洛组均一次性经耳缘静脉注射牛血清清蛋白250mg/kg，然后均行高脂饮食。高脂饲料配方为：1g胆固醇+5g猪油+94g普通饲料。另外，卡维地洛组每日清晨行卡维地洛10mg/kg灌胃。正常组行普通饲料喂养（100mg/d）。各组家兔共喂

6、养10周。1.5血液标本的采集及测定喂养10周后，各组动物分别行250g/L乌拉坦（4mL/kg）腹腔麻醉，沿胸骨正中线纵向剖开胸腔暴露心脏，直视下行右心室穿刺抽血，酶法检测各组家兔的血清三酰甘油及胆固醇，黄嘌呤氧化法检测血清SOD，硫代巴比妥酸比色法检测MDA，各操作步骤严格按说明书进行。1.6局部病理标本的取材及检测全血采集完毕后气胸处死动物，游离主动脉至髂总动脉分叉处，仔细清除血管壁脂肪及结缔组织，纵向剖开血管壁暴露内膜表面，铺平。高脂组、卡维地洛组在主动脉弓病变处取材，大小约1.0cm×0.5cm，正常组亦在主动脉弓处取材，其大小也约1.0cm×0.5cm，分别放入100g/L中性

7、多聚甲醛中固定，并逐步脱水，透明，浸蜡，包埋制成蜡块。每一标本连续切片两张，分别行PA及NFκBp65免疫组化检测，免疫组化采用SP法，DAB显色，操作步骤严格按照说明书进行。PA及NFκBp65阳性表达主要在细胞核内，VIDAS21计算机图像分析系统测定一定面积阳性信号值和阳性信号平均吸光度，并计算二者乘积，即积分吸光度。测定时每一病理切片在高倍镜下随机取10个视野，取其平均值。1.7统计学分析数据以±s表示，用SPS