中药治疗对大鼠坐骨神经损伤后mrnangf表达的影响论文

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1、中药治疗对大鼠坐骨神经损伤后mRNANGF表达的影响论文.freel处造成坐骨神经挤压伤，根据分组，术后给予不同的中药喂养大鼠。术后不同时间，取紧邻挤压伤部位远侧神经干.freelRNA（mRNANGF）的表达。结果丹参组和黄芪组大鼠坐骨神经挤压伤后第2周起，坐骨神经组织中mRNANGF表达明显增加，至伤后第4周达到高峰。党参治疗坐骨神经挤压伤，治疗后8周，mRNANGF表达较对照组明显增加，差异有显著性。在复方冲剂组，大鼠坐骨神经挤压伤后8周内，神经组织中mRNANGF表达始终处于高水平。各组大鼠坐骨神经mRNANGF表达与对照组之间的差异具有显著性（P＜0.05）。复方冲剂组大鼠坐骨神经

2、mRNANGF表达与丹参和黄芪组之间的差异也具有显著性。结论中药党参、丹参和黄芪可以促进挤压伤后大鼠坐骨神经mRNANGF表达；这种作用在组成复方冲剂后，表现得更为明显。【关键词】中药；坐骨神经损伤；神经生长因子mRNA【Abstract】ObjectiveTodecideprovingtheregenerationofperipheralnerveafternervelesionandtostudythemechanismofChineseherb.Methods108SDrats(male，220～250g)ixedgroupandcontrolgroup.Theratsdistalto

3、sciaticnotch.AftersurgerytheratseafteroperationtheratpjustdistaltothecrushsiteovedtoevaluatethelevelofmRNANGF.mRNANGFeansofinsituhybridizationandthelevelinedbyimaginganalysis.ResultsInDanshenandHuangqigroupsthelevelsofmRNANGFinsciaticnervemarkedlyincreasedatthesecondRNANGFinthesetixedgroupthemRNANG

4、FareallinhighlevelparedRNANGFinDangshengroupixedherbscanincreasetheexpressionofmRNANGFofratsciaticnerveandimprovetheregenerationofsciaticnerveafternervecrushed.【KeyRNA复方神肌再生冲剂对神经再生的促进作用已经被实验研究初步证实［1，2］。为了研究中药复方神肌再生冲剂及其组成成分对神经再生的影响，我们曾应用免疫组织化学的方法检测中药治疗后损伤的大鼠坐骨神经组织NGF蛋白表达［3］。随着分子生物学技术的飞跃发展，运用先进的实验手段，

5、检测神经生长因子mRNA（mRNANGF）在神经组织中的表达来判断神经再生，其敏感度比检测NGF的方法要高得多。我们应用原位分子杂交的方法，研究复方神肌再生冲剂治疗大鼠坐骨神经损伤后神经生长因子（NGF）mRNA（mRNANGF）的变化，确定中药复方神肌再生冲剂中对神经再生有促进作用的单味中药。1材料与方法1.1动物选择及分组SD大鼠，健康，雄性，体重230～250g，SPF级。由复旦大学医学院实验动物部提供。实验组90只大鼠分为5个处理组，分别为党参组、丹参组、黄芪组、生地组和复方冲剂组。每处理组18只大鼠再按术后取材时间分为术后2周、4周和8周3个时间组，每时间组6只。对照组30只大鼠分

6、为5个时间组，分别为术后2天、1周、2周、4周和8周，每时间组6只大鼠。1.2动物模型制作1%硫喷妥钠腹腔注射麻醉。局部脱毛，消毒。取右侧为手术侧。沿右侧臀大肌纤维方向做右臀及大腿上部皮肤切口，分开臀肌显露坐骨神经。于坐骨结节远侧0.8cm，坐骨神经分出支配大腿肌肉的分支之近侧，用带卡扣的无齿显微持针器夹住坐骨神经，合拢卡扣30s，造成神经挤压伤（crush）［4］。在损伤部位用11-0的无损伤缝线固定于神经外膜作为标记，伤口内置适量青霉素粉剂，关闭切口。术后将大鼠分笼饲养，每笼3只。常规供给大鼠专用饲料和饮用水，室内20℃恒温。根据实验分组，每日给予相应的中药汤剂2ml灌胃。对照组大鼠术后

7、给等量生理盐水灌胃。按分组要求，术后取紧邻挤压伤部位远侧坐骨神经干0.6cm，迅速置入4%多聚甲醛溶液固定。另取正常大鼠6只，取其右侧坐骨神经相应部位神经干，作为正常神经标本，用以检测正常神经mRNANGF。标本经4%多聚甲醛溶液固定24h后，脱水，石蜡包埋。常规石蜡切片，厚度为4μm。载玻片需要经过高温灭活RNA酶，APES镀膜。切片置4℃冰箱保存。1.3原位分子杂交实验方法［5］及步骤NGF型原位杂交检测