临床微生态学及其理论基础论文

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1、临床微生态学及其理论基础论文.freell(G)。Ⅱ级(记为“++”):油镜(放大倍数15×1000)观察每视野平均细菌数10个~99个,经换算标本中的细菌数约107~8个/ml(G)。Ⅲ级(记为“+++”):油镜下每视野平均细菌数在100个以上光镜下观察细菌满视野,经换算此时标本中的细菌数约为109~10个/ml(G)。Ⅳ级(记为“++++”):光镜下观察细菌聚集成团、或密集覆盖粘膜上皮细胞,标本中细菌数在1010个/ml(G)以上。也可采用菌落计数的方法来检查细菌的密集度,但在得结论时要小心,因为菌群的自然分布排列复杂

2、多样,可以是单个或数个散在排列也可能是以微菌落的方式或菌膜(Biofilm)的方式密集排列,所以平板上的单个菌落既可以自单个细菌生长而来,也可以是由数十、数百甚至上千个细菌组成的微菌落生长而来。有动力的革兰阴性杆菌和无动力的阳性球菌比较,即使细菌个体的绝对数相同,因前者有动力细菌分布较为分散、CFU值高,而后者常积聚生长且很难人为使其分散,故CFU值会相差很远。另外细菌的生长还受培养基营养条件、培养时的气体条件等等的影响,涂片观察到的优势菌因培养条件的限制而不生长的情况就比较常见。基于上述原因,在检查细菌密集度时涂片直接观

3、察是基础,有着细菌培养不能替代的独特价值。1.2菌群多样性(PopulationDiversity)指某一菌群中所有细菌种类的多少,这也是一个非常重要的指标,但以前一直未受到重视。影响菌群多样性的因素也主要有两方面,一是菌群自身自胎儿出生开始的,从简单到复杂、由低级向高级的逐渐演变过程,导致菌群复杂性和多样性增加;二是微生境参数对菌群的选择压力或限制性微生境参数的作用使菌群多样性增加受到限制。从总体上看,菌群多样性主要反映了菌群所处微生境选择压力的大小。机体对菌群的机械性清除作用,是最重要的决定菌群多样性的微生境参数之一,

4、清除速率高,将使菌群演化停留在早期较为简单的阶段,不能进一步演进成为复杂的菌群,因而菌群多样性低如上、中段小肠菌群;酸度也是人体某些微生境重要限制性参数,如胃的低酸对胃和上段小肠的菌群都有重要的限制作用,阴道的酸性环境则对维持阴道菌群正常至关重要。机体内限制性微生境参数的改变,将不可避免地导致菌群的改变,这在很多菌群失调或微生态疾病的病理生理机制中都扮演着关键的角色。一般来说,菌群多样性高、复杂的菌群,生活的微生境选择压力小,不同细菌之间关联度高,细菌间的相互作用在维持菌群稳定方面起着决定性的作用,使菌群具有较强的自身稳定

5、性,能在一定程度上抵抗微环境参数的变化,对外源性细菌也有很强的抗定植作用;菌群多样性低、简单的菌群,一般生活在选择压力大的微生境,菌群内不同细菌之间的相互作用弱、菌群稳定性低,易随某些微环境参数的周期变化而发生周期性的激烈变化,如口腔菌群晨起时的量可比餐后高100倍~1000倍。决定这些部位微生境抗外源性细菌定植的首要因素是机体的防御能力,正常菌群的作用居次要地位甚至没有重要意义。自然状态下的菌群其细菌密集度与多样性有很强的相关性,密集度高多样性通常也高;抗菌治疗下可以出现由耐药菌组成的密集度高而多样性低的菌群。光镜观察能

6、比较准确地观察到标本中的优势细菌,可籍此对菌群的多样性进行分级。细菌培养的方法检测菌群多样性的准确性和价值取决于培养方法和培养技术,其中选择性培养的方法对非优势菌也能查出来,但太繁琐、消耗太大,除非有特殊需要,否则意义不大。根据光镜下观察细菌的形态,我们将菌群的多样性分为四级:Ⅰ级(记为“+”):能辨别1~3种细菌;Ⅱ级(记为“++”):能辨别4~6种细菌;Ⅲ级(记为“+++”):能辨别7~10种细菌;Ⅳ级(记为“++++”):能辨别11种以上细菌。可按照以下方式记录细菌的形态:以“G”表示革兰染色方法,在G的右上角以小写

7、英文字母表示光镜下观察到的细菌染色和形态,具体为:革兰阳性小球菌,G+c(s);革兰阳性大球菌,G+c(L);革兰阳性小杆菌,G+b(s);革兰阳性大杆菌,G+b(L);芽孢杆菌,G+sp;革兰阴性短杆菌,G-b(s);革兰阴性长杆菌,G-b(L);革兰阴性弧形菌,G-v;革兰阴性梭形菌,G-f;酵母样真菌,G+Y。再在G的右下角以阿拉伯数字表示同一大类但形态不同的细菌,如两种阴性球菌则分别记为G+c1、G+c2,等等。非选择性细菌培养,通常只能检查出比较优势的细菌,选择性培养方法则只能检查出目标细菌,总的说来,培养的方法

8、检查菌群多样性不如涂片染色镜检来得便捷而可靠。1.3优势菌(PredominatingPopulation)指菌群中生物量或种群密集度大的细菌,在很大程度上影响着整个菌群的功能及其对宿主的生理病理意义。优势菌也与微生境的特征密切相关,以厌氧菌为优势菌的菌群,一般生存在清除速率较低的微生境,且菌群密集度、

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