睾酮对tnfα作用于内皮细胞表达ho1的影响论文

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1、睾酮对TNFα作用于内皮细胞表达HO1的影响论文井立省张清华蒋知新高德路李令华柳杨龙炫辉【摘要】目的观察不同浓度睾酮对肿瘤坏死因子α(TNFα)作用于人脐静脉内皮细胞(humanumbilicalveinendothelialcells)ECV304表达血红素加氧酶1(HO1)的影响，初步探讨其作用机制。方法用ELISA法观察不同浓度睾酮及雄激素受体拮抗剂Flutimide、雌激素受体拮抗剂ICI182，780对ECV304表达HO1干预作用。结果睾酮在3×10-6,3×10-7,3×10-8,3×10-9mol/

2、L几种浓度下均具有促进TNFα诱导的ECV304细胞表达HO1的量。与3.0×10-8mol/L睾酮干预组相比，予1.0×10-6mol/LICI182，780预处理，ECV304细胞释放的HO1的量明显减少，并诱导HO1的表达呈时间(当t=24h达到最理想的分泌量)、浓度依赖关系。结论睾酮对TNFα诱导的ECV304细胞表达HO1的影响与其浓度有关，生理浓度睾酮对其具有一定的促进作用,而且这种生物学效应是部分通过转化为雌激素后.freelornecrosisfactorα(TNFα)influencingth

3、ereleasingofhemeoxygenase1(HO1)inhumanumbilicalveinendothelialcellsECV304.MethodsTheeffectsoftestosteroneofdifferentconcentrationsideorestrogenreceptorsantagonistICI182,780onthesenescenceofECV304inducedbyTNFαanufacturerinstructionsstrictly.ResultsTestosteroneatloo

4、l/L)hadthetrendofpromotingthereleasingofHO1inECV304inducedbyTNFα,mostobviouslyattheconcentrationof3×10-8mol/L(butP0.05vsTNFαstimulatedgroup),ol/L)hadstimulatedeffectonthesenescenceinducedbyTNFα(6.108±1.154,P0.05vsTNFα).TheestrogenreceptorsantagonistICI182,170rath

5、erthanFlutamideatconcentrationof1×10-6mol/Linhibitedtheprotectioneffectinducedbytestosteroneatconcentrationof3×10-8mol/L.Doseandtime(alsecretionoccurringat24h)dependenteffectofTNFαinducedthesecretionofHO1.ConclusionsTestosteronemodulatesthesenescenceofECV304induce

6、dbyTNFαinadoserelatedmanner.Andatphysiologicalconcentrations,testosteronehasthetrendofprotectingit,mainlybytransformingtoestrogenactingonestrogenreceptor.【Keyeoxygenase1;Tumornecrosisfactorα血红素加氧酶1(HO1)亦称为热休克蛋白32(heatshockprotein32，HSP32)，是应激过程中体内出现浓度明显增加的一种应激蛋白

7、，广泛分布在各种组织和细胞中，在体内可催化血红素降解，其主要产物是CO、胆红素和铁，它们是重要的生物效应分子。HO1发挥的细胞、组织保护作用显然与其降解血红素的代谢产物密切相关。HO1的抗氧化作用对动脉粥样硬化(AS)斑块的稳定性也起着重要的作用。研究表明,.freelide、雌激素受体拮抗剂ICI182，780(Sigma公司)，MCO217AICO2恒温培养箱(三洋公司,日本)，CK2型倒置显微镜(奥雷帕斯公司，日本)，细胞超净工作台(北京昌平长城空气净化工程公司)。1.2方法1.2.1细胞培养从液氮罐中取出冻存的ECV3

8、04细胞37℃，5%CO2培养箱孵育，调整细胞浓度为2×105个/ml，接种在35mm的培养皿中，观察细胞生长密度约80%后，换成2%胎牛血清的培养液2ml继续培养24h。1.2.2实验分组与处理①正常对照组:予低血清(2%)培养基;