电针足三里对吗啡戒断大鼠μ受体mrna表达的影响论文

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1、电针足三里对吗啡戒断大鼠μ受体mRNA表达的影响论文.freelRNA的表达,观察电针足三里对吗啡戒断大鼠体重及μ受体mRNA表达的影响。结果电针组大鼠体重比戒断组增加明显(P0.05),戒断组和电针组比正常组脑组织中μ受体mRNA表达降低,治疗后电针组比戒断组脑组织中μ受体mRNA表达明显增加。结论电针足三里具有提高吗啡戒断大鼠体重、改善大鼠吗啡戒断症状的作用。电针调节吗啡戒断大鼠海马、下丘脑μ受体mRNA的表达,可能是电针改善大鼠吗啡戒断症状的作用机制之一。【关键词】电针足三里吗啡戒断大鼠μ受体mRNAAbstract:

2、ObjectiveToresearchthemechanismofelectroacupuncture(EA)improvingmorphineabstinencesyndromeinrats.MethodsThemodeloftheratorphineabstinencesyndromeRNAinthebraintissueofmorphineinedbyRT-PCR,andeffectsofEAatZusanli(ST36)onthebodyRNAofmorphineorphineabstinencegroup(P0.0

3、5).paringRNAinthebrainorphineabstinencegroup.AfterEA,theexpressionofμ-opioidreceptormRNAoftheEAgrouporeincreasedthanthemorphineabstinencegroup.ConclusionEAatZusanli(ST-36)canincreasebodyorphineprovemorphineabstinencesyndrome.EAcanincreaseexpressionofμ-opioidrecepto

4、rmRNAinhippolcapalandhypothalamusofbraintissueinmorphineaybeoneofthemechanismsofEAimprovingmorphineabstinencesyndromeofrats.KeyorphineRNA有研究报道,大鼠在吗啡依赖、戒断过程中额叶皮质、海马、丘脑等μ受体出现明显下调,显著低于正常组水平,.freelRNA的表达,在观察电针足三里对吗啡戒断大鼠体重影响的同时,探讨电针对海马、下丘脑μ受体mRNA表达的调节作用。现将结果报道如下。1材料与方法1

5、.1仪器与试药PCR仪(德国产);台式高速冷冻离心机(美国产);电泳及转印系统(瑞典Amersham);凝胶成像系统(美国伯乐)。盐酸吗啡由沈阳第一制药厂提供,批号000606;RT-PCR试剂盒购自基Promega公司,dntp、Taq酶购自Sangon公司。1.2动物健康SD大鼠24只,雌雄各半,体重180~200g,安徽医科大学实验动物中心提供。1.3造模连续递增给予大鼠注射吗啡20d,第1天皮下注射5mg/kg,从第2天起,每天吗啡剂量增加5mg/kg(每天上、下午各1次),第20天的给药量达100mg/kg,造成吗

6、啡依赖大鼠模型,于实验第21天停药,大鼠出现戒断症状,造成自然吗啡戒断大鼠模型。1.4分组将实验大鼠分为正常组、戒断组、电针组,每组8只,雌雄各半。正常组:皮下注射注射用水0.5mL,每天1次,连续20d,常规饲养观察7d;戒断组:造模后不予任何治疗,常规饲养观察7d;电针组:造模后,于实验第21天给予电针双侧足三里(PCE-88A型程控电针仪,采用2Hz和100Hz交替),每天1次,每次30min,连续治疗7d。1.5观察指标1.5.1体重在造模前及造模结束后4、12、24h和电针治疗后,进行大鼠体重的测量。1.5.2μ受

7、体mRNA表达运用半定量RT-PCR方法测定丘脑和海马μ受体mRNA的表达。引物由Sangon公司合成,μ受体两条引物序列为:上游引物:5’ACCTGGCTCCTGGCTCAACTT3’;下游引物:5’TGGACCCCTGCCTGTATTTTG3’;β-actin上游引物:5’ATCATGTTTGAGACCTTCAACACCCCAGCC3’;β-actin下游引物:5’AAGAGAGCCTCGGGGCATCGGAACCGCTCA3’。总提取RNA,逆转录:大鼠脱臼处死,浸泡在75%酒精中10min。在消毒室内断头取脑。迅速分

8、离丘脑和海马,各取100mg,消毒、碾碎;加Tizzol1mL;加氯仿0.2mL;4℃,离心15min;转上层水相于另一1.5mLEP管中;加等体积异丙醇,混匀,室温10min;再4℃,离心10min;弃上清,加冰预冷的75%乙醇1mL;4℃,离心5min;弃上清,空气干燥5~10min;

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