sdf 1α对大鼠骨髓源性内皮祖细胞克隆形成能力及增殖影响

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1、SDF1α对大鼠骨髓源性内皮祖细胞克隆形成能力及增殖影响【摘要】目的观察基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)对体外培养的大鼠骨髓源性内皮祖细胞(EPCs)动员和增殖的影响。方法微孔法获取大鼠骨髓EPCs并采用荧光显微镜和流式细胞术鉴定EPCs特异性标记物。不同浓度SDF-1α处理EPCs后，采用细胞培养、MTT检测EPCs的克隆形成、细胞增殖。结果通过MTT法检测，对照组与(1、10、100μg/L)SDF-1α处理组的OD值分别为0．311±0．054、0．587±0．072、0．813±0．056、1．029±0．078，通过统计学方

2、法分析，对照组与SDF-1α处理组比较差异均有统计学意义(n=5，P<0．05)；100μg/LSDF-1α处理组次级内皮祖细胞集落单位数目是对照组近3倍(4．67±1．577比14．33±3．055，n=5，P<0．01)。结论SDF-1α剂量依赖性地促进EPCs增殖，并显著增强EPCs克隆形成能力。�【关键词】基质细胞衍生因子-1α；内皮祖细胞；增殖Effectsofstromalcell-derivedfactor-1αonproliferationandcloneformationofratbonemarrowderivedendo

3、thelialrrogenitorCellsXIAYi-ping,WEIDang-heng,TONGZhong-yi,etal.InsititueofCardiovascularDisease,KeyLabfor12ArteriosclerologyofHunanProvince,UniversityofNanhua,Hengyang421001,China�【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheroleofstromalcell-derivedfactor-1α(SDF-1α)toproliferation

4、andcloneformationonendothelialprogenitorcells(EPC).MethodsBonemarrowderivedEPCwereindfinedbyimmunofluorescencestainingandflowcytometry.TreatedwithdifferentconcentrationsofSDF-1α,thepropertyofproliferationwasdetectedbyMMTandcloneformationwasdetectedwithopticalmicroscopy.Res

5、ultsSDF-1αpromotedEPCproliferationandcloneformationwithconcentration-dependentmanner.ConclusionSDF-1αcanimproveproliferationofEPC.�【Keywords】StromalCell-DerivedFactor-1α;EndothelialProgenitorCells;Proliferation基质细胞衍生因子-1(Stromalcellderivedfactor121，SDF-1)属于内分泌型CXC趋化蛋白超家族，包

6、括两种同分异构体，SDF-1α和SDF-1β，两者的区别在于前者比后者少4个3′氨基酸[1-3]。CXCR4为SDF-1的唯一生理配体，与SDF-1特异性的结合并引起细胞多种生物学功能改变[4-9]。研究表明，SDF-1参与造血祖细胞的归巢、细胞的迁徙与增殖、细胞的形成与发展、刺激免疫反应，促进恶性肿瘤血管形成及转移、促进血管新生[10]。�内皮祖细胞(endothelialprogenitorcells，EPCs)主要来源于骨髓，也存在于外周血、脐血、脾等组织，在血管受损后血管内皮重新内皮化(reendothelialization)，组

7、织缺血后血管新生以及包裹血管移植物中起重要作用。但循环EPC数目非常低，急性心血管疾病或伴有冠心病危险因素的病人数目更低，而且EPC迁移功能受损。研究发现，循环EPC数目与冠心病危险因素呈负相关[11]。故从分子水平研究调控EPC生物学特性基因对心血管疾病干细胞治疗有着重要的意义。本文旨在研究SDF-1α对EPCs的动员及增殖。1材料与方法1．1材料和试剂4周龄左右雄性SD大鼠购自南华大学动物部；胎牛血清购自元亨圣马生物技术研究所；DMEM培养基购自Gibco公司；VEGF(Peprotech)；MurineSDF-1α(Peprotech

8、)；明胶(sigma)；杂交瘤皿(Greinerbio-one)；其它试剂均为国产分析纯。1．2EPC分离与培养[12]12分离大鼠股骨和胫骨骨髓，采用杂交瘤皿培养分离内皮祖细胞