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1、磷酸氯喹对白血病细胞株的影响中国实验诊断学2011年4月第15卷第4期文章编号:1007—4287(2()11)04—0571—05磷酸氯喹对白血病细胞株的影响刘佳,陈芳源,王海嵘,钟华,钟济华,王利民,欧阳仁荣(上海交通大学医学院附属仁济医院1.血液科,2.中心实验室,上海200001)摘要:目的本实验以药物磷酸氯喹干预白血病细胞株,观察其对白血病细胞生长凋亡的影响,同时研究用药后凋亡相关蛋白Pnas一2的变化,以探寻磷酸氯喹作用白血病细胞株机制.方法MTF法检测药物干预后白血病细胞增长情况;AnnexinV/sytox标记细胞以流式细胞仪检测药物干预前后细胞凋亡情况
2、的差别;激光共聚焦观察蛋白Pnas一2的亚细胞定位,蛋白印迹实验检测药物作用前后,Pnas一2表达量的变化.结果50ug/mL的磷酸氯喹能够诱导白血病细胞株凋亡.并发现凋亡相关蛋白Pnas一2在白血病细胞株中存在异常定位和过量表达.磷酸氯喹能够使白血病细胞株中Pnas一2蛋白的表达量及亚细胞定位发生变化.结论磷酸氯喹能够抑制白血病细胞株生长,诱导凋亡,机制可能是恢复了Pnas一2蛋白的异常定位及表达.关键词:磷酸氯喹;白血病细胞株;PNAS-2;凋亡中图分类号:R733.7;R979.1文献标识码:ATheeffectofchloroquinephosphateonle
3、ukemiaceRlinesLIU胁,CHENFang-yuan,WANGHai—rong,eta1.(1.DepartmentofHematology,2.Centrallaboratory,RenJiHospital,ShanghaiJiaoTongUniversitySchoolofMedicine,Shanghai200001,China)Abstract:ObjectiveInthisstudy,wetreatedleukemiacelllineswithchloroquinephosphatetoobserveitseffectO13thecelllines
4、.BesidesweexploredchangesoftheproteinPnas一2aftertheinterventionofthedrug,inordertofoundthemechanismofthedrugthatinfluencedleukemiacelllines.MethodsChloroquinephosphateofdefferentconcentrationswasaddedintotheculturefluidatlogaritlnnicphase.MTFassayWasusedtomeasurethecellproliferation,flow
5、cytometryWasappliedtodetectthecellapoptosis,im—mun0f】uorescencetechnologywasemployedtoobservethesubcellularlocationofproteinPnas一2,andWesternblotwasusedtocomparetheexpressioncontentofPnas一2.Resets50m/mLchloroquinephosphatecouldinduceleukemiccelllinestoapoptosis.Andinleukemiccelllines,pro
6、teinPnas一2'SexpressioncontentWaSmorethannon-tumorcelllines,anditssubeelMarlocationwasabnormal,too.Simultaneously.thedrugcouldrevertPnas一2'sabnormalsubcellularlocationanditsredundantexpressioncontent.Conclusionchloroquinephosphatecouldinhibitthegrowthofleukemiccelllinesandinduceapoptosis.
7、Themechanismmayberelatedtoitsrever—sionofPnas2'sabnormalcontentandlocation.Keywords:chloroquinephosphate;leukemiacelllines;PNAS一2;apoptosisPNAS一2(apoptosis—relatedproteingene,GeneBank编号:AF229832),它是一种凋亡相关基因,定位于染色体9P13.3,与CHMP5,SNF7DC2,CGI一34,HSPC177编码同一分子量为28kd左右的蛋白质….已知C
