市售红花中总黄酮含量研究

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1、市售红花中总黄酮含量研究【摘要】目的比较市售三种新疆产红花的总黄酮含量。方法运用紫外分光光度法对红花中的总黄酮含量进行测定。结果在0.1~0.5mg/ml检测浓度范围内,芦丁浓度与吸光度之间有良好的线性关系(r=0.9996);总黄酮含量:1号为0.18%,2号为0.20%,3号为0.19%。结论该方法具有较好的精密度(RSD=1.11%),简单易行,科学合理,适用于评价红花药材的质量。�【关键词】新疆红花;总黄酮;紫外分光光度法�中药红花为菊科植物红花CarthamustinctoriusL.的干燥花��[1]�,具有活血通经,散瘀止痛。红花为传

2、统的常用中药,经多年研究发现其具有扩张冠脉、降血压、耐缺氧、活血化淤和抗炎镇痛等多种药理学功效。黄酮类化合物是红花中最主要的化学成分之一。本文采用乙醇回流提取法对新疆产红花进行提取,运用紫外分光光度法对红花中的总黄酮含量进行测定,对比市售三种新疆产红花的总黄酮含量。一方面为丰富红花的质量标准提供实验依据,另一方面阐明市售红花质量情况,为红花的研究、开发及临床应用提供理论依据及检测手段。� 51仪器与试药材料�1.1仪器LIV-2102c型紫外-可见分光光度计(尤尼柯仪器有限公司);N-1000旋转蒸发仪(EYELA上海爱朗仪器有限公司);电热恒温鼓

3、风干燥箱(上海一恒科技有限公司);BS110S型电子分析天平(北京塞多利斯天平有限公司)。�1.2试药芦丁对照品(中国药品生物制品检定所,批号100080-200306);1号新疆红花(宝丰药店);2号新疆红花(海晖医药连锁);3号新疆红花(红旗大药房)。无水乙醇(分析纯)、石油醚(分析纯)、氢氧化钠、亚硝酸钠、硝酸铝甲醇、蒸馏水。�2方法与结果�2.1对照品溶液和供试品溶液的制备�2.1.1对照品溶液的制备精密称取芦丁对照品2.5mg,置25ml容量瓶中,用30%乙醇溶液溶解定容,配成浓度为0.1mg/ml的对照品溶液。�2.1.2供试品溶液的制

4、备从3个红花样品中各取10g,粉碎(40目),得红花粗粉。在250ml圆底烧瓶中加入经称量的1.00g的红花粉末,并标号1,2,3。加入70%的乙醇溶液100ml摇匀,加入沸石。于80℃下回流提取1h,再加入100ml乙醇,继续回流1h,停止加热后,将回流液进行真空抽滤,回收溶剂,烘干,得浸膏。用30%的乙醇定容至100ml容量瓶,备用。� 52.2线性关系考察将芦丁对照品溶液分别移取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml,置10ml比色管中,用30%的乙醇补充至5ml,加入5%的亚硝酸钠0.3ml,摇匀,放置5min,加入10%硝酸铝溶液0.

5、3ml,摇匀,放置5min后再加入4%的氢氧化钠溶液4ml,摇匀,用30%的乙醇至刻度,摇匀,放置12min后,在510nm下测定。以吸光度为纵坐标(Y)、芦丁对照品溶液的浓度(mg/ml)为横坐标(X),得其回归方程:Y=11.26X+0.0128(r=0.9998),芦丁对照品在0.01~0.05mg/ml范围内线性关系良好。�2.3精密度试验用移液管移取芦丁对照品溶液1ml于比色管中,加30%乙醇稀释至5ml,加入5%NaNO��2�0.3ml,摇匀,静置6min,再加10%Al(NO��3�)��3�0.3ml,摇匀,静置6min,再加4%

6、NaOH4ml,再加0.4ml30%乙醇,摇匀,静置12min。于510nm波长下测定吸光度值,重复测定6次,计算其相对标准偏差。结果RSD为0.04%,本实验精密度良好。�2.4重复性试验用移液管平行移取红花提取液1ml于5个比色管中,按“供试品溶液制备”方法制备,在510nm波长处测定吸光度值,结果RSD为0.89%,表明实验重复性良好。� 52.5稳定性考察用移液管移取红花提取液1ml于比色管中,按“供试品溶液制备”方法制备,每隔30min测定1次吸光度值,测定6次,结果RSD=0.13%,表明供试品溶液在3h内稳定。�2.6加样回收率实验用

7、移液管平行移取红花提取液(人民同泰,0.207mg/ml)1ml于5个比色管中,再分别加入芦丁对照品溶液(0.1mg/ml)2ml,按“供试品溶液制备”方法制备,在510nm波长处测定吸光度值,计算加样回收率。结果加样回收率为(99.89±1.43)%,RSD为1.75%(n=5),表明该含量测定结果准确。�2.7样品测定每个新疆红花样品溶液平行取样3份,每份2ml,按“供试品溶液制备”方法制备,每样品平行测定3次,在510nm波长处测定吸光度值,根据标准曲线计算总黄酮含量(表1)。�3讨论�5红花是临床中常用的一种中药材,由于其价格较高,市场上不

8、法分子不顾药材的质量,不择手段,造假作假。医疗机构及中药生产企业应给予注意。目前,常见的掺伪手法主要有以下4种:一是以添加

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