两种荧光方法分析血样中锌原卟啉和原卟啉论文

《两种荧光方法分析血样中锌原卟啉和原卟啉论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、两种荧光方法分析血样中锌原卟啉和原卟啉论文黄维李元娜刘倩吴海龙李耀群【摘要】利用N,N二甲基甲酰胺同时萃取血样中痕量的锌原卟啉和原卟啉，以三维荧光交替三线性分解算法和导数恒基体同步荧光法同时分析血样中的锌原卟啉和原卟啉。前者中锌原卟啉和原卟啉分别在0.6～35μg/L和0.4～27μg/L范围内呈良好的线性，检出限分别为0.18和0.12μg/L;后者中锌原卟啉和原卟啉在0.14～45μg/L和0.056～28.5μg/L范围内呈良好的线性，检出限分别为0.12和0.045μg/L。实际血样中两种方法的平均回收率分别为(82±9)%和

2、(85±10)%，且两种方法测定20份血样时获得的相关性良好。【关键词】卟啉，导数恒基体同步荧光法，三维荧光交替三线性分解算法,血样1引言常规的荧光光谱法灵敏度较高，然而多组分分析时往往存在光谱干扰。近年来.freelelli13和Chen14提出的常规的荧光光谱法，需要通过数学计算引入光谱补偿因子来校正原卟啉的荧光强度，才能同时测定血样中的锌原卟啉和原卟啉;周培琛等15提出了导数可变角同步荧光法分析光谱严重重叠的原卟啉和锌原卟啉。本研究建立了分析痕量锌原卟啉和原卟啉的两种方法：三维荧光交替三线性分解算法和导数恒基体同步荧光法，将其用

3、于血样的测定，并比较了两种方法的测量结果。2实验部分2.1仪器与试剂除特别指明外，所得的荧光光谱均在实验室自制的荧光仪上绘制15;150模式，激发波长为350～450nm，间隔5nm;发射波长为560～670nm，间隔5nm。扫描速度为480nm/min。本实验获取的三维荧光数阵在Matlab环境下利用交替三线性分解算法(ATLD)解析2。原卟啉二钠盐(Aldrich公司)，锌原卟啉(Strem公司)，N,N二甲基甲酰胺(DMF)，均为分析纯;血样来自厦门大学医院。实验使用1cm×1cm石英比色皿，RJTGL16C型高速离心机(江苏

4、无锡市瑞江分析仪器有限公司)。2.2实验方法锌原卟啉(ZnPP)和原卟啉(PP)标准溶液的配制：分别准确称取1.2mg锌原卟啉和原卟啉二钠盐，用DMF稀释至50mL，得到浓度分别为38.4和39.6mmol/L。避光保存于冰箱中，用时再逐级稀释至所需要浓度。配制一系列浓度分别为1.14,2.28,4.56,11.4,18.2,22.8和34.2μg/L锌原卟啉的DMF溶液，为实验中测定血液中锌原卟啉的校正集。在此范围内待测物的浓度与荧光强度呈线性关系。配制浓度分别为0.57,1.14,.freelapsof9.1μg/LPP(A)and8

5、.5μg/LZnPP(B).ThescanningpathABC(C)isformatrixisopotentialsynchronousspectrum(MISF)图311.4μg/L原卟啉(划线)、11.4μg/L锌原卟啉(点划线)混合物(实线)及其溶剂(点线)的二维导数恒基体同步荧光光谱Fig.32Dderivativematrixisopotentialsynchronousspectraof11.4μg/LPP(dashline)and11.4μg/LZnPP(dashdotline),themixtureeconcentra

6、tionasbefore(realline)andsolvent(dotline)分析化学第37卷第7期黄维等：两种荧光方法分析血样中锌原卟啉和原卟啉3.2.3人工合成样分析配制不同浓度的原卟啉和锌原卟啉系列混合溶液，扫描导数恒基体同步荧光光谱，并在同一条件进行标准曲线的测量，4次测量获得的锌原卟啉和原卟啉平均回收率分别为(91±4)%和(102±9)%，具体数据见表2。表2人工合成样的回收率采用最小二乘法拟合得到锌原卟啉和原卟啉的线性方程分别为Y=42.8X+3.16和Y=52.2X+13.8,相关系数均为0.999。锌原卟啉和原卟啉的

7、线性范围分别为0.14～45μg/L和0.056～28.5μg/L。以3倍空白标准偏差除以工作曲线斜率计算锌原卟啉和原卟啉的检出限分别为0.12和0.045μg/L。3.3血样提取液中锌原卟啉和原卟啉的测定以及两种方法的对比为了验证两种方法的准确性，进行了实际样品的加标回收实验。对8份不同血液平行处理后进行测定。4份用三维荧光交替三线性分解算法计算，4份采用导数恒基体同步荧光法，测得的回收率见表3。三维荧光交替三线性分解算法的平均回收率为(82±9)%，导数恒基体同步荧光法的平均回收率为(85±10)%。对同一血样平行测定4次获得三维

8、荧光ATLD法中锌原卟啉和原卟啉的相对标准偏差分别为1.9%和6.7%;而导数恒基体同步荧光法中锌原卟啉和原卟啉的相对标准偏差分别为1.5%和4.4%。为了验证两种方法的可行性，进行了实际样