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时间：2018-10-14
《实验四原卟啉的测定课件》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、实验四 荧光法测定原卟啉（FEP）的浓度危丽俊卫生化学教研室一、目的：一、掌握荧光测量的基本原理，学会使用930荧光计。二、了解原卟啉的测定方法。二、原理：1激发光谱与发射光谱萘的激发和荧光光谱2、荧光光度计3、930荧光计4、定量方法If=2.3I0lc=Kc三、实验器材与试剂1、930荧光计2、玻璃器材：比色管10ml，六支移液管10ml，5ml各一只4、原卟啉标准溶液0.1μg/ml，临用时新鲜配置，注意蔽光5、依次加0.5NHCl四、实验步骤1、取五支比色管依次加原卟啉标准溶液：0、0.5、1.0、1
2、.5、2.0ml第六支加未知液1.2ml2、依次加0.5NHCl4、3.6、3.0、2.5、2.0、2.8ml测定方法：将5号标准溶液倒入比色皿中确定其荧光强度大于80（一般为95％），0～4号标准溶液依次倒入比色皿中（浓度由低到高），再将6号待测液倒入比色皿中分别测出他们的相对荧光强度。测定条件：激发滤光片：400nm（通带型）荧光滤光片：550nm（截至型）灵敏度：2～3档室温、室内照明：暗五、注意事项1、原卟啉对光热不稳定，易产生分解，应注意避光并冷藏。2、荧光分析用的比色皿四面透明，用时应拿棱角处。3、满
3、度电位器顺时针方向开足后，即使指针调不到“100”，也不能强行旋转，此电位器容易损坏。六、思考题1、能否用930荧光计测原卟啉的激发光谱和荧光光谱？为什么？2、930荧光计上的满度开关与722分光光度计上的满度开关在测定过程中的作用是否相同？
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