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1、自体细胞因子诱导杀伤细胞治疗肝硬变临床疗效探究【摘要】目的观察自体细胞因子诱导杀伤细胞(CIK细胞)治疗HBVDNA阳性肝硬化患者的近期疗效。方法CIK细胞在体外培养前后以及回输体内后检测CD+3、CD+3CD+4、CD+3CD+8、CD+3、CD+56、CD+25细胞以及mDC和pDC。治疗肝硬化患者,比较治疗前后病毒学指标及肝脏功能的变化。结果培养结束以及回输体内后,CD+3细胞、CD+3CD+8细胞、CD+3CD+8细胞较培养前显著升高,mDC和pDC在回输后也明显增高,肝脏功能较治疗前有所好转。所有患者均能耐受治疗。结论CIK细胞可明显提高免疫效应细胞数量,具有一
2、定的抗病毒效应作用,毒副作用低。【关键词】CIK细胞;乙型肝炎;肝硬化;疗效�【Abstract】ObjectiveToobservetheautologouscytokine-inducedkillercells(CIKcells)inthetreatmentofchronicHBVDNA-positivepatientswithcirrhosisoftheliverfunction.MethodsBeforeandafterCIKcellsinvitroandinvivodetectionoftransfusionCD+3,CD+3CD+4,CD+3CD+8,CD+3
3、,CD+56cellsandmDC,andpDC.Treatmentofpatientswithlivercirrhosiscomparedbeforeandaftertreatment5virologicalindicatorsandliverfunctionchanges.ResultsAftercultureandreinfusioninvivo,CD+3cells,CD+3CD+8cells,CD+3,CD+56cells,culturedcellsweresignificantlyelevated,mDCandpDCsignificantlyincreaseda
4、ftertransfusion,liverfunctionhadimprovedcomparedwithbeforetreatment.Allpatientscouldtoleratethetreatment.ConclusionsCIKcellscansignificantlyincreasethenumberofimmuneeffectorcells,withacertainanti-viraleffectoftheroleoflowtoxicity.Therearenoaggravatingliverdamage,liverfunctionandforacertai
5、ndegreeofimprovement.【Keywords】CIKcells;HepatitisB;Hepatocirrhosis在HBV持续复制的肝硬化患者中,肝脏炎性纤维化持续进展并且坏死特别严重。由于a-干扰素的不良反应和拉米夫定的高耐药病毒突变,对这类患者还没有很有效的、可耐受的抗病毒治疗。CIK细胞作为高免疫活性细胞已越来越广泛地用于HBV感染所致原发性肝癌和抗HBV治疗,其治疗时可诱导激活特异性细胞免疫反应。用于治疗慢性乙型肝炎报道也有一定疗效[1],本治疗血清HBVDNA5阳性肝硬化的近期临床疗效较好,特报道如下。1研究对象1.1一般资料66例患者均为住院
6、患者,其中男59例,女7例,年龄36～67岁(47.2岁)。所有病例均诊断为肝硬化,诊断符合2000年西安学术会议制定的病毒性肝炎防治方案诊断标准[2],全部病例HBsAg、HBcAg、HBVDNA阳性持续6个月以上,HBeAg阳性42例,阴性24例,其中肝功能正常的5例,肝功能异常的61例。ALT波动于正常至5倍,TBiL≤51μmol/L,肝脏功能childpugh评分为A或B级。1.2排除病例肝性脑病、消化道出血、重度感染或大量腹水等严重并发症,半年内未使用过其他抗病毒药和其他免疫调节剂,其他病毒感染、酒精性、药物性肝病。2治疗方法与检测项目2.1CIK细胞的培养在
7、患者签署知情同意书后,使用采血机(Spectrav611)采集患者外周血单个核细胞,每例患者采集细胞数约(1～4)×109,容积40～70ml。在符合GMP实验室条件下,用无血清培养基调整细胞浓度至(1～2)×106ml,置于透气性培养袋中,于不同时间加入一定剂量的rhIFNr,IL-2、antiCD3mAb(美国BD公司)等各种细胞因子,37℃,5%CO2悬浮培养。2.2CIK细胞悬液的制备及回输,每次取CIK细胞悬液的1/3体积,离心、洗涤和重悬浮后制备成容积为400～5005ml的CIK细胞悬液,将诱导培养成的CIK细胞
