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时间:2018-07-08
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1、ERK1/2和cyclinD1蛋白在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达及其意义【摘要】目的探讨卵巢上皮性肿瘤组织中细胞外信号调节激酶(ERK1/2)及细胞周期素D1(cyclinD1)的表达及意义。方法应用免疫组织化学技术,检测49例卵巢上皮性癌组织,26例良性卵巢上皮性肿瘤组织及10例正常卵巢组织中ERK1/2和cyclinD1蛋白表达。结果ERK1/2和cyclinD1在卵巢上皮性癌组织中的表达阳性率显著高于正常卵巢组织和良性卵巢上皮性肿瘤组织(P<0.01)。Ⅲ~Ⅳ期卵巢癌组织中的ERK1/2和cy
2、clinD1蛋白表达水平高于Ⅰ~Ⅱ期卵巢癌(P<0.05)。ERK1/2和cyclinD1蛋白表达阳性率呈明显的正相关(P<0.05)。结论ERK1/2和cyclinD1在卵巢上皮性癌发生、发展中起重要作用,ERK通过诱导cyclinD1蛋白过表达使卵巢上皮性癌细胞增殖和演进。【关键词】卵巢肿瘤信号转导癌基因蛋白免疫组织化学0引言丝裂原活化蛋白激酶(Mitogenactivatedproteinkinases,MAPK)是细胞内一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,是细胞信号的重要传递者。细胞外调节信号激
3、酶(extracellularsignalregulatedkinase,ERK)是MAPK家族的一个亚族,可被多种生长因子、细胞因子激活,参与调节细胞的增殖与分化。ERK活化后通过转录调节引起多种癌基因包括细胞周期素D1(cyclinD1)基因的相继激活导致细胞恶性转化[1]。为研究其在卵巢癌发生、发展中的作用,我们对卵巢上皮性肿瘤组织和正常卵巢组织中ERK和cyclinD1蛋白的表达进行了检测。1资料和方法1.1研究资料49例卵巢上皮性癌,26例卵巢良性上皮性瘤及10例正常卵巢,取自哈尔滨医
4、科大学第一临床医学院和第三临床医学院妇科2001年9月至2002年9月间住院行手术治疗的患者。49例卵巢上皮性癌中,卵巢浆液性囊腺癌18例,子宫内膜样癌14例,粘液性囊腺癌17例。1.2研究方法1.2.1免疫组织化学染色手术切除的标本经10%的甲醛固定,石蜡包埋,组织切片厚4μm,脱蜡、水化后,3%H2O2灭活内源性酶,分别与一抗(兔抗ERK1/2多克隆抗体,鼠抗人CyclinD1单克隆抗体,美国SantaCruz公司产品,工作浓度为1∶000)、二抗(生物素标记IgG,1∶400稀释)及辣
5、根过氧化物酶标记的链霉素亲和素复合物(1∶400稀释)孵育。免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(SP)法染色。SP试剂盒购自北京中山生物技术公司产品。免疫染色阴性对照采用磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗,另选择2例已知ERK和cyclinD1蛋白表达阳性的乳腺癌和子宫内膜癌石蜡切片作为阳性对照。1.2.2结果判定采用双盲法观察结果。阳性细胞呈棕黄色着色,按细胞染色强度分:不着色为阴性(-),淡棕黄色为弱阳性(+),深棕黄色为强阳性(+++),阳性着色介于弱阳性至强阳性之间(++)。1.3
6、统计学方法采用SAS(statisticalanalysissystem)软件包进行统计分析,率的比较采用χ2检验。2结果2.1ERK和cyclinD1蛋白在不同卵巢组织中的表达和定位ERK和cyclinD1蛋白主要在卵巢癌细胞核内分布,部分胞浆着色,呈棕黄色(图略)。在75例卵巢上皮性肿瘤组织中,ERK蛋白表达阳性者38例,其中卵巢上皮性癌31例,表达阳性率为63%,良性肿瘤7例,表达阳性率为27%。cyclinD1在卵巢上皮性癌组织中表达阳性率为47%,在卵巢良性肿瘤组织中表达阳性率1
7、5%。10例正常卵巢组织中ERK和cyclinD1蛋白表达均为阴性。ERK和cyclinD1蛋白在卵巢上皮性癌中的表达阳性率明显高于正常卵巢及卵巢上皮性良性肿瘤(P<0.01)。卵巢上皮性良性肿瘤中ERK蛋白阳性率高于正常卵巢,但差异无显著性,见表1。2.2ERK和cyclinD1蛋白表达与卵巢上皮性癌临床病理特征的关系卵巢上皮性癌中ERK和cyclinD1蛋白的表达与临床病理分期有关,Ⅲ~Ⅳ期卵巢癌ERK和cyclinD1蛋白表达水平高于Ⅰ~Ⅱ期,差异有显著性(P<0.05)。ERK蛋白表达与卵
8、巢上皮性癌的患者年龄、病理类型,组织学类型方面比较,差异均无显著性(P>0.05),见表1。2.3卵巢上皮性癌中ERK和cyclinD1蛋白阳性表达的相关性31例ERK阳性的卵巢上皮性癌病例中,21例cyclinD1蛋白呈阳性表达,阳性符合率68%;18例ERK阴性病例中,16例cyclinD1蛋白呈阴性表达,阴性符合率89%,统计学分析表明ERK和cyclinD1蛋白的表达呈正相关(P<0.05),见表2。表1卵巢上皮性肿瘤患者各临床病理因素中ERK和cyclinD1的表达(略)
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