p16蛋白在正常卵巢和卵巢上皮性浆液性肿瘤中的表达及其临床意义.doc

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1、P16蛋白在正常卵巢和卵巢上皮性浆液性肿瘤中的表达及其临床中国肿瘤临床2000年第3期第27卷论著选登作者：王晓彬王敏王伟张淑兰陆景明单位：王晓彬（辽宁省肿瘤医院沈阳市110042）；王敏（中国医科大学第二临床医院妇科）；王伟（中国医科大学第二临床医院病理科）；张淑兰（中国医科大学第二临床医院妇科）;陆景明（屮国医科大学第二临床医院妇科）新近发现的P16基因与多种肿瘤的形成和发生有关。而且能直接作用于细胞周期并抑制肿瘤细胞的生长。P16基因所表达的P16蛋白是迄今为止人类所发现的第一个能抑制肿瘤发生的细胞固有成分。有关P16蛋白在卵巢肿瘤中表达国内外文献报道尚少，并

2、存在争议，为此本研究应用免疫组化法对47份卵巢上皮性浆液性肿瘤组织和8份正常卵巢组织手术切除的冰冻新鲜标本进行P16蛋白检测，以探讨pl6蛋白在正常卵巢和卵巢浆液性肿瘤中的表达及其临床意义。1材料与方法1.1标本与来源收集中国医科大学附属一、二院及辽宁省肿瘤医院1996年〜1998年手术切除的55例新鲜组织标本冰冻切片，分为4组:1）正常卵巢组织8例，2）良性浆液性瘤组织10例，3）交界性浆液性瘤组织4例，4）浆液性卵巢癌组织33例。浆液性卵巢癌均有完整病理资料。1.2抗体与试剂ABC试剂盒购自美国Vectorlab,兔抗人pl6多克隆抗体为美国Santacruz生

3、物技术公司产品。1.3检测方法与步骤冰冻切片用预冷丙酮固定5分钟后常规进行ABC免疫组化染色。pl6蛋白的免疫产物用AEC显色，抗体效价为1:50。免疫染色阴性对照采用PBS替代一抗，选择2份乳腺癌已知阳性的冰冻组织切片作为P16蛋白阳性对照。1.4结果判定及统计学处理阳性染色为红色颗粒，特异性位于细胞浆内，少部分核浆共存。综合染色强度和分布范围进行半定量处理，染色强度按下列标准评分：阴性为0分；染色弱但明显强于阴性对照者为1分；染色清晰者为2分；染色强者为3分；分布范围按下列标准评分:无阳性细胞者记为0分；V30%者为1分；30%〜60%者为2分；>60%者为3分

4、。上述两种评分相加0〜1分为阴性，2分为(+),3〜4分为(++),5〜6分为(+++)o率的比较采用四格表确切概率法。2结果2.1pl6蛋白的免疫组化染色P16阳性物质主要在细胞浆内，阳性细胞多呈灶状分布，少数为散在分布。除小部分间质外大部分间质及其他细胞均为阴性。8例正常卵巢组织和9例良性浆液性瘤组织P16蛋口均显示阳性，4例交界性浆液性瘤组织中2例(50%)及14例浆液性卵巢癌组织中(42.4%)显不pl6蛋白阳性表达。pl6蛋白在卵巢浆液性癌中检出率(42.4%)低于良性浆液性瘤者(90.0%)及正常卵巢组织(100%),PV0.05。卵巢浆液性癌pl6蛋白

5、阳性表达率低于交界性瘤(50%),交界性瘤低于良性瘤(90%),但差异均无显著性(P>0.05)o2.2pl6蛋白表达与卵巢浆液性癌牛物学特征的关系将33例卵巢浆液性癌pl6蛋白表达情况分别与临床分期、组织学分级、腹水、癌瘤播散和淋巴结转移多因素进行比较、分析如下：2.2.1pl6蛋白表达在卵巢浆液性癌临床分期中早期卵巢癌(I*11期)pl6蛋白阳性表达率85.7%(6/7)高于晚期卵巢癌(III+IV期)30.8%(8/26),差异有显著性(PV0.05)。但I期与II期、III期与IV期比较差异无显著性(P>0.05)。2.2.2pl6蛋白表达在卵巢浆液性癌组织

6、学分级中I级与III级及I级与II+III级中的表达差异均有显著性(P<0.05),而II级与IV级之间差异无显著性(P>0.05)o2.2.3pl6蛋白表达在卵巢浆液性癌中有与无癌瘤播散和淋巴结转移屮的表达差异有显著性(P<0.05)；而有与无腹水屮pl6蛋白表达差异无显著性(P>0.05)。3小结研究表明P16基本在大多数肿瘤细胞株和许多实体肿瘤中都有变化。但其在卵巢肿瘤中表达的研究甚少，存有争议。本研究结果表明：卵巢浆液性癌P16蛋白阳性表达率明显低于良性瘤及正常卵巢组织(PV0.05),根据P16蛋口阳性表达的有无，分别与卵巢浆液性癌临床分期、组织学分级、腹

7、水、癌瘤播散及淋巴结转移多因素进行比较、分析，结果其表达除在腹水的变化缺乏统计学意义外，P16蛋白与癌瘤的恶性程度、自然病程和生物学行为之间均有密切关系。通常随恶性程度、临床期别的增加、癌瘤播散和淋巴结转移的出现,P16蛋白阳性表达率也明显降低,具有统计学差异(PV0.05)。此结果与杨红等和Ichikana等在卵巢肿瘤中P16基因的表达研究结果一致。但Dong等有不同研究结果的报道认为P16蛋口在肿瘤细胞中的高表达是与卵巢癌的进展和不良的预后相关联。各研究结果虽不同但都从蛋白水平证实了卵巢浆液性肿瘤发生、发展与抑癌基因P16异常密切相关。收稿日期:1999-0