化瘀通络中药对糖尿病肾病大鼠肾组织ctgf mrna表达的影响论文

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1、化瘀通络中药对糖尿病肾病大鼠肾组织CTGFmRNA表达的影响论文尹智炜高俊杰陈志强孙玉凤丁奇峰王月华张江华【摘要】观察化瘀通络中药—肾络通对实验性大鼠糖尿病肾病(DN)模型肾功能及肾组织结缔组织生长因子(CTGF)mRNA表达的影响。方法SD大鼠40只随机分为正常组、模型组、对照组和中药组，模型组、对照组和中药组应用链脲佐菌素(STZ)60mg/kg一次性腹腔注射制备大鼠糖尿病模型。中药组给予肾络通煎剂灌胃25g/(kg·d)，对照组给予贝那普利水溶液10mg/(kg·d)，正常组和模型组给予等量0.9%

2、氯化钠注射液灌胃。检测各组大鼠24h尿蛋白、血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)和肾组织CTGFmRNA的表达。结果模型组24h尿蛋白、BUN、Cr和肾组织CTGFmRNA的表达均显著高于正常组(P0.01)；对照组和中药组24h尿蛋白、BUN、Cr和肾组织CTGFmRNA的表达与模型组相比显著降低(P0.01)。结论化瘀通络中药能够显著减少DN模型大鼠24h尿蛋白，保护DN模型大鼠肾脏功能，并可从基因水平显著降低肾组织CTGF的表达，提示下调CTGF的表达可能是化瘀通络中药保护DN模型大鼠肾功能的重要机制

3、。【关键词】糖尿病肾病大鼠SD肾功能结缔组织生长因子【Abstract】ObjectiveToobserveeffectsofdispersingbloodstasisanddredgingcollateral—ShenluotongonrenalfunctionandexpressionofCTGFmRNAindiabeticnephropathy(DN)rats’kidney.MethodsTheratslydividedintofourgroupsincludingnormalgroup,model

4、group,controlgroupandTraditionalChineseMedicine(TCM)group.TheDNmodelofratadethroughone-timeinjectionofperitonealofstreptozotocin(STZ)60mg/kg.TCMgroupinistratedodelgroupinistratedg/kg·d,NormalgroupandmodelgroupRNAinnephridialtissuealgroup,24hoururinaryprot

5、ein,Scr,BUNandtheexpressionofCTGFmRNAinnephridialtissueofmodelgroupodelgroup,thoseofTCMandControlgroupRNAinnephridialtissue.Itindicatedthatdoaybeanimportantatrix,ECM)增生.freelRNA表达的影响，从分子水平探讨化瘀通络中药的可能作用机制，为中药治疗DN提供新的思路。1材料与方法1.1动物清洁级健康雄性Sprague-Dauley系大鼠40

6、只，体质量(180±10)g，由河北医科大学动物实验中心提供，动物合格证号：冀医动管字07259号。1.2化瘀通络中药肾络通，由地龙、乌梢蛇、丹参、黄芪等组成，按比例称取后，水煎、过滤，浓缩至含生药1.5g/mL。装入瓶中密封保存于4℃冰箱中。饮片经过鉴定均为正品，由河北医科大学中医院制剂室提供，并经过鉴定均为正品。1.3造模与分组大鼠自由饮水，常规饲料适应性喂养1周后，进行尿蛋白定性检测，结果全部为阴性。随机分为正常组、模型组、对照组和中药组，每组10只。除正常组外，其他各组按60mg/kg一次性腹腔注

7、射STZ，自由饮水、摄食，72h后尾静脉取血快速血糖仪测随机血糖，以≥16.7mmol/L为糖尿病模型成模标准［3］。正常组注射相应量0.9%氯化钠注射液。造模各组在糖尿病模型建立后，按血糖水平重新分组，组别与动物数不变。1.4给药与取材成模后1周开始给药，中药组给予肾络通煎剂灌胃25g/(kg·d)，对照组给予贝那普利水溶液10mg/(kg·d)，对照组、中药组用药量均相当于临床人用剂量的20倍。正常组和模型组给予等量0.9%氯化钠注射液灌胃，均每日1次。1.5取材给药第16周末，各组大鼠置于代谢笼中，

8、禁食不禁水收集大鼠24h尿液；10%水合氯醛30mg/kg腹腔注射麻醉大鼠，腹主动脉取血，分离血清，然后迅速取肾组织置于液氮中，再转存于-70℃超低温冰箱中待检。1.6生化指标检测双缩脲法定量24h尿蛋白，Beckmancx7全自动生化分析仪检测血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)等生化指标。1.7CTGFmRNA检测各组肾组织采用Trizol一步法提取总RNA，CTGF引物由上海中生生物工程公司合成，其序列为5′-GAAAGA