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1、玻璃化保存扶芳藤茎尖再生苗夏季适应性研究第43卷第9期2007年9月林业科学SCIENTIASILVAESINICAEVo1.43,No.9Sep.,2007玻璃化保存扶芳藤茎尖再生苗夏季适应性研究王贞高健洲刘燕(北京林业大学园林学院国家花卉工程技术中心北京100083)关键词:扶芳藤;超低温再生苗;生长性状;生理指标测定中图分类号:$723.13文献标识码:A文章编号:1001—7488(2007)O9—0150—05TheAdaptabilityofPlantletsRegeneratedfromCryoprese
2、rvedShoot—TipsofEuonymusfortuneicv.'Yuanban'inSummerWangZhenGaoJianzhouLiuYan(CollegeofLandscape,BellingForestryUniversityNationalFlowerEngineeringCentreBeijing100083)Abstract:Theshoot—tipsofEuonymusfonuneiCV.'Yuanban'excisedfromhealthyinvitroplantsweresuccessfu
3、llycryopreservedwiththevitrificationtechnique.AftertheshoottipsformedrootsandweI-esuccessfullytransferredtosoilofoutsidewiththecontrolplant.Tostudytheadaptabilitytosummerhightemperaturesoftheregeneratedplantlets,theyweretestedforvegetativegrowth(plantheight,bran
4、chnumber,branchlength,leafnumber),andphysiologicalparameters(photosyntheticpigmentcontent,pralineandelectrolyteleakage)atintervals.Theresultsshowedthatnostatisticaldifferenceinthephysiologicalparametersbetweentheregeneratedplantletsandthecontro1.Thechangesinvege
5、tativegrowthoftheregeneratedplantletswerequitesimilartothecontrolandtherewasnostatisticaldifferenceinamountaboutbranchnumber,branchlength,leafnumber.However,dataoftheplantheightrevealedthattheplantheightofthecontrolwashigherthanthatoftheregeneratedones.Thereason
6、forthatwasnotclearandmoreresearcheswereneeded.Keywords:Euonymusfonunei;cryopreservation;vegetativegrowth;physiologicalparameters近20年来发展起来的超低温保存技术由于可以实现种质的"长久"保存而倍受重视,其中的玻璃化法超低温保存技术已被广泛应用,并被证实是冻存植物茎尖和分生组织的良好途径.从1989年开始,完全玻璃化法冻存的植物材料已涉及茎尖(Leunufnaeta1.,2003),芽(Mar
7、uyamaeta1.,1997),顶端分生组织(Matsumotoeta1.,1994),愈伤组织(Paniseta1.,1996),悬浮细胞(Tsukazakieta1.,2000),胚状体(Touchelleta1.,2002),幼苗(刘燕,2000),须根(Jungeta1.,2001)等.目前国内外这方面的研究工作基本集中在依据植物种类和基因型研究玻璃化保存技术程序,包括玻璃化技术中各步骤使用的溶液筛选,处理方法,并依据液氮冻融后成活率选择出最佳组合.另外,通过RAPD(Ahuja,2002),PFLP(Men
8、uhreta1.,1997)等分析技术验证超低温保存后的基因稳定性,发育能力,通过超低温方法对植物进行脱毒也有一些报道(Hellioteta1.,2002;2003;Wangeta1.,2003),并对超低温保存过程中细胞所发生的一系列超微结构变化进行了电镜观察(蔡祖国等,2006)以及再生(吴黎明等,2006)研究进行了探讨;而